Obohacené mléko, růst a stav mikroživin u mexických batolat (růst mléka)

Studie byla provedena v Mexiku. Vyšetřovatelé zahrnovali děti ve věku 12 až 30 měsíců, které navštěvovaly centra denní péče. Tato centra denní péče jsou součástí národního vládního programu, jehož hlavním cílem je podpora pracujících matek a těch, které chtějí pracovat, nemají přístup ke zdravotní péči a jsou ohroženy chudobou. Program zahrnuje také rodiče samoživitele, kteří se starají o rodinu s dětmi ve věku od 12 do 36 měsíců.

Zde popsaná studie je randomizovaná, paralelní, dvojitě zaslepená, kontrolovaná studie s podáváním pěstebního mléka (GM) a obohaceného mléka (FM).

Randomizace a maskování:

Metoda Moses-Oakford byla použita k náhodnému rozdělení 189 dětí do 1 ze 2 skupin v této dvojitě zaslepené kontrolované studii podáváním růstového mléka (Enfa-Grow® GM) (GM) a obohaceného mléka (FM). Ve skupině červeno-šedé bylo 96 dětí a ve skupině modro-zelené 93, studie bude zaslepena, dokud nebude dokončena statistická analýza. Jedna skupina přijímá GM a druhá skupina přijímá FM. Obě skupiny dostávaly 480 ml/den (240 ml v 7:00 a 240 ml v 16:00). Oba doplňky byly k nerozeznání, stejné barvy, vůně (sušeného bílého mléka) a chuti s výjimkou barevného označení plechovky. Barevný kód byl neznámý pro výzkumníky, terénní pracovníky, uživatele a analytiky. Mléko bylo dětem nabízeno 5 d/týden po dobu 4 měsíců pod dohledem personálu studie, který zaznamenával, zda byl doplněk spotřebován a také množství.

Kritéria vyloučení:

Výzkumníci nezahrnuli děti, které byly v době studie kojené, ani děti, které dostávaly vícenásobné doplňky mikroživin. Pokud mělo dítě kapilární hemoglobin < 9,0 g/dl, na začátku studie nebo bylo klinicky nemocné, nebyl zahrnut.

Sběr dat Antropometrická měření Antropometrická měření byla provedena na začátku, 8 a 16 týdnů. Hmotnost byla měřena s přesností na 10 g pomocí elektronické váhy (TANITA Scale, Tanita Corp., Arlington Heights, kapacita IL 14 kg pro kojence a 36 kg pro dospělé, Tokio) a délka a výška byly měřeny s přesností na milimetr pomocí délkové desky ( Schorr Industries, Glenn Burney, MD). Obvod hlavy byl měřen pružnou nepružnou měkčenou páskou s přesností na milimetr (model, Hoechstmass-Rollfix 150 cm). Terénní pracovníci byli vyškoleni a standardizováni pomocí standardních technik podle protokolů. Hmotnost, délka a obvod hlavy byly převedeny na skóre Z pomocí referenčních standardů Světové zdravotnické organizace (WHO) z roku 2006. Výskyt zakrnění, chřadnutí a podváhy byl vypočítán pomocí mínus 2 z-skóre pro každý ukazatel (délka nebo výška vzhledem k věku, váha k délce nebo výška a váha k věku) ve specifických hraničních bodech pro věk a sex. Nadváha/obezita byly definovány jako hmotnost pro délku/výšku nad plus 2 z-skóre.

Koncentrace hemoglobinu byla stanovena ve vzorcích kapilární krve získaných píchnutím do prstu a měřena v přenosném fotometru -HemoCue-, na začátku. Podle kritérií výběru, pokud mělo dítě <9,0 g/dl, bylo dítě odesláno do nejbližšího zdravotního střediska. Po celonočním hladovění byly odebrány vzorky žilní krve (10 ml) z antekubitální žíly na začátku a 8 a 16 týdnů poté. Vzorky byly získány vyškolenou sestrou, která měla zkušenosti s prací s dětmi a podle protokolárních postupů stanovených Komisí pro biologickou bezpečnost při Státním zdravotním ústavu (NIPH). Vzorky kapilární a venózní krve byly odebrány v každém středisku denní péče. Vzorky kapilární krve byly odebrány pouze na začátku. Některé matky ze studie odstoupily kvůli odběru krve. Vzorky byly odstředěny pomocí přenosné odstředivky EBA8 (Hettich, Tuttlingen, Německo) při 280 x g; 20 minut in situ a sérum bylo skladováno v barevně označených kryogenních lahvičkách a konzervováno v kapalném dusíku chráněném před světlem až do dodání do Biochemické a nutriční laboratoře na SZÚ.

Jakmile byly vzorky v laboratoři, byly skladovány při -70 °C, dokud nebyly připraveny k analýze. Každá mikroživina byla měřena následovně: Feritin, zinek a folát: Pro hodnocení sérových koncentrací feritinu byly použity komerční soupravy (Dade Behring Inc.) Sérové ​​koncentrace zinku byly měřeny atomovou emisní spektroskopií s indukčně vázaným plazmatem za použití CCD spektrometru Varian Vista Pro. Sérový folát byl uvolněn z proteinu pomocí hydroxidu sodného, ​​dithiothreitolu a kyanidu draselného a transformován na kyanokobalamin a stabilní foláty. Jejich koncentrace byly měřeny kompetitivními enzymatickými imunotesty v automatické imunitní analýze TOSOH. Vitamin D: sérum 25-OH-D3 bylo analyzováno CMIA za použití modulu Abbott Architect. Vitamin A: Sérový retinol byl extrahován 100% čistým ethanolem; ethanol byl odpařen pod proudem dusíku a rozpuštěn ve 100 ml 10% ethanolu. Stanovení byla provedena vysokoúčinnou kapalinovou chromatografií (HPLC) v přístroji Waters (Waters Co., Milford, MA, USA), s použitím kolony 3,9 x 150 mm Nova-Pak C18 ODS (Waters Co.), s mobilní fází CH30H, 100% s rychlostí toku 1,5 ml/min, při vlnové délce 325 nm. Sérové ​​lipidy: lipidový sérový profil byl stanoven plynovým chromatografem (5890 Series II, Hewlett-Packard, Spojené státy americké). Údaje o morbiditě byly shromažďovány denně v každém centru denní péče. K zaznamenání příznaků průjmu a akutních respiračních infekcí byl použit kontrolní seznam. Matky nebo pečovatelé byli požádáni, aby si vzpomněli na jakékoli příznaky týkající se konzumace mléka.

Socioekonomický status Informace o charakteristikách domácnosti účastníka, úrovni vzdělání a zaměstnání rodičů byly získány rozhovorem s matkou.

Intervence Sušené mléko bylo připraveno a rekonstituováno každý všední den v každém centru denní péče podle pokynů WHO a pokynů pro denní péči. Ráno přibližně v 7 hodin připravil vyškolený personál mléko podle barevného označení přiděleného každému dítěti. Pro usnadnění měření v mililitrech byly použity lahvičky. Každá láhev byla zvážena před a po přípravě mléka v dietní odměrné váze (OHOUSE, model CS5000, kapacita 5000gx2g). Používaly se také trénované kelímky. Každé dítě dostalo samostatnou lahvičku nebo kelímek s vlastním mlékem (240 ml). Jakmile byla každá láhev nebo šálek připravena, byla předána dítěti. Poté, co dítě dopilo mléko, byly zbytky zváženy a zaznamenány do konzumního formuláře. Před odchodem každého dítěte přibližně v 16:00 bylo opět připraveno mléko (240 ml) podle protokolů. Zbylé mléko bylo zváženo, změřeno a zaznamenáno. Matky nebo pečovatelky byly poučeny, jak si doma připravit sušené mléko podle pokynů WHO. To bylo provedeno o víkendech a pro děti, které před příchodem do centra denní péče pily mléko. Matkám bylo podáváno množství mléka potřebné k přípravě 480 ml denně během víkendu. Matky registrovaly množství mléka zanechaného dítětem v konzumní formě a byly vyškoleny k odhadu a registraci spotřeby mléka.

Definice nedostatků mikroživin:

1. Folát: Děti se sérovými koncentracemi folátu pod < 4 ng/ml byly kategorizovány jako deficitní.
2. Feritin: Děti se sérovými koncentracemi pod <12 μg/l (LIS).
3. Zinek: Děti se sérovými koncentracemi pod <65 μg/dl.
4. Vitamin A: Děti se sérovými koncentracemi pod < 20,02 ug/dl (<0,70 µmol/l).
5. Vitamin D: Děti se sérovými koncentracemi pod < 20 nmol/l (< 8 ng/ml) byly považovány za s těžkým nedostatkem.

Statistická analýza Základní charakteristiky byly porovnány mezi studijními skupinami pomocí t statistiky pro nezávislé vzorky. Pro kategoriální charakteristiky byla použita statistika chí-kvadrát.

Pro každou proměnnou spojité odezvy -tj. růst nebo mikroživiny-, rozdílný účinek suplementace byl odhadnut pomocí vícenásobného regresního modelu, který zahrnoval indikační proměnnou studijní skupiny, indikační proměnnou období sledování a odpovídající interakci těchto dvou pojmů. Pro binární výsledky byl použit logistický regresní model. Základní charakteristiky, které se významně lišily mezi studijními skupinami, byly zahrnuty jako kovariáty. Všechny standardní chyby byly upraveny o závislosti dat na úrovni subjektu. Antropometrické kontinuální odezvy byly analyzovány za předpokladu normality, zatímco kontinuální mikronutriční odezvy byly předpokládány s lognormální distribucí. U posledně jmenovaného byla výsledná proměnná logaritmicky transformována před odhadem modelu a upravené geometrické průměry byly získány jako následný odhad. Upravené pravděpodobnosti byly získány po přizpůsobení logistických modelů a aplikaci inverzní funkce logit na lineární predikci. Upravené geometrické průměry a pravděpodobnosti byly získány pomocí prediktivních okrajů a jejich standardních chyb pomocí metody Delta; změny v čase pro tyto prediktivní rozpětí byly získány jako průměrné okrajové účinky.

Ukazatel socioekonomického stavu byl získán abstrahováním první hlavní složky z materiálových charakteristik domácností a služeb. První hlavní složka vysvětlila 30 % celkového rozptylu.