Forsterket melk, vekst og mikronæringsstoffstatus hos meksikanske småbarn (MilkGrowth)

Studien ble utført i Mexico. Etterforskerne inkluderte barn i alderen 12 til 30 måneder som gikk i barnehager. Disse barnehagene er en del av et nasjonalt statlig program som har som hovedmål å støtte arbeidende mødre og de som har tenkt å jobbe og ikke har tilgang til helsetjenester og er i fare for fattigdom. Programmet inkluderer også enslige forsørgere med ansvar for deres familie med barn mellom 12 og 36 måneder.

Studien beskrevet her er en randomisert, parallell, dobbeltblind, kontrollert studie ved administrering av oppvekstmelk (GM) og beriket melk (FM).

Randomisering og maskering:

Moses-Oakford-metoden ble brukt til å tilfeldig tildele 189 barn til 1 av 2 grupper i denne dobbeltblinde kontrollerte studien ved administrering av vekstmelk (Enfa-Grow® GM) (GM) og beriket melk (FM). Det var 96 barn i den rødgrå gruppen og 93 i den blågrønne gruppen, studien vil bli blindet til den statistiske analysen er ferdig. Den ene gruppen mottok GM og den andre gruppen mottar FM. Begge gruppene fikk 480 ml/d (240 ml kl. 07.00 og 240 ml kl. 16.00). Begge kosttilskudd var umulig å skille, samme farge, (hvitt melkepulver) lukt og smak bortsett fra fargekoden på boksen. Fargekoden var ukjent for forskere, feltarbeidere, brukere og analytikere. Melk ble tilbudt barna 5d/wk i en periode på 4mnd under tilsyn av studiepersonellet som registrerte om tilskuddet ble konsumert samt mengden.

Ekskluderingskriterier:

Undersøkerne inkluderte ikke barn som ble ammet på tidspunktet for studien, ingen av barna som fikk flere mikronæringstilskudd. Hvis et barn hadde kapillært hemoglobin <9,0 g/dl, ved baseline eller var klinisk syk ble ikke inkludert.

Datainnsamling Antropometriske mål Antropometriske mål ble tatt ved baseline, 8 og 16 uker. Vekten ble målt til nærmeste 10g med en elektronisk vekt (TANITA Scale, Tanita Corp., Arlington Heights, IL kapasitet 14 kg for spedbarn og 36 kg voksne, Tokyo) og lengde og høyde ble målt til nærmeste millimeter med en lengdetavle ( Schorr Industries, Glenn Burney, MD). Hodeomkretsen ble tatt med et fleksibelt ikke-strekkbart plastifisert målebånd til nærmeste millimeter (modell, Hoechstmass-Rollfix 150cm). Feltarbeidere ble opplært og standardisert ved bruk av standardteknikker i henhold til protokoller. Vekt, lengde og hodeomkrets ble transformert til Z-poeng ved å bruke referansestandardene fra Verdens helseorganisasjon (WHO) fra 2006. Prevalens av stunting, sløsing og undervekt ble beregnet ved å bruke minus 2 z-poeng for hver indikator (lengde- eller høyde-for-alder, vekt-for-lengde eller høyde- og vekt-for-alder) ved spesifikke grensepunkter for alder og kjønn. Overvekt/fedme ble definert som vekt for lengde/høyde over pluss 2 z-Score.

Hemoglobinkonsentrasjonen ble bestemt i kapillære blodprøver oppnådd ved fingerstikk og målt i et bærbart fotometer -HemoCue-, ved baseline. Etter utvalgskriterier dersom et barn hadde <9,0g/dl, ble barnet henvist til nærmeste helsestasjon. Etter faste over natten ble venøse blodprøver (10 ml) tatt fra antecubital vene ved baseline og 8 og 16 uker deretter. Prøver ble tatt av en utdannet sykepleier som hadde erfaring med arbeid med barn og i henhold til protokollprosedyrer fastsatt av Biosikkerhetskommisjonen ved Folkehelseinstituttet (FHI). Kapillær- og veneblodprøver ble tatt ved hver barnehage. Kapillærblodprøver ble tatt kun ved baseline. Noen mødre trakk seg fra studien på grunn av blodprøvetakingen. Prøver ble sentrifugert ved bruk av en bærbar sentrifuge EBA8 (Hettich, Tuttlingen, Tyskland) ved 280 X g; 20 minutter in situ og serum ble lagret i fargekodede kryogene ampuller, og konservert i flytende nitrogen beskyttet mot lys inntil levering til Biokjemisk og ernæringslaboratoriet ved Folkehelseinstituttet.

En gang i laboratoriet ble prøvene lagret ved -70ºC til de var klare til å bli analysert. Hvert mikronæringsstoff ble målt som følger: Ferritin, sink og folat: Kommersielle sett ble brukt for å vurdere serumkonsentrasjonene av ferritin (Dade Behring Inc.) Serumkonsentrasjonene av sink ble målt ved induktivt koblet plasma atomemisjonsspektroskopi ved bruk av et Varian Vista Pro CCD-spektrometer. Serumfolatet ble frigjort fra protein ved bruk av natriumhydroksid, ditiotreitol og kaliumcyanid, og omdannet til cyanokobalamin og stabile folater. Konsentrasjonene deres ble målt ved konkurrerende enzymatiske immunanalyser i en TOSOH automatisert immunanalyse. Vitamin D: serum 25-OH-D3 ble analysert med CMIA ved bruk av en Abbott Architect-modul. Vitamin A: Serumretinol ble ekstrahert med 100 % ren etanol; Etanolen ble fordampet under nitrogenfluks og oppløst i 100 ml 10% etanol. Bestemmelser ble utført ved høyytelses væskekromatografi (HPLC) i et Waters-instrument (Waters Co., Milford, MA, USA), ved bruk av en 3,9 x 150 mm kolonne Nova-Pak C18 ODS (Waters Co.), med en mobil fase CH3OH, 100 % med en flukshastighet på 1,5 ml/min, ved en bølgelengde på 325 nm. Serumlipider: lipidserumprofilen ble bestemt av en gasskromatograf (5890 Series II, Hewlett-Packard, USA) Morbiditetsdata ble samlet inn daglig ved hver barnehage. En sjekkliste ble brukt for å registrere symptomer på diaré og akutte luftveisinfeksjoner. Mødre eller omsorgspersoner ble bedt om å huske eventuelle symptomer angående melkeforbruk.

Sosioøkonomisk status Informasjon om deltakerens husholdnings egenskaper, utdanningsnivå og foreldres yrke ble innhentet ved intervju av mor.

Intervensjon Melkepulver ble tilberedt og rekonstituert hver ukedag i hver barnehage i henhold til WHOs og barnehagens retningslinjer. Om morgenen omtrent klokken 07.00 tilberedte utdannet personell melken i henhold til fargekodene som ble tildelt hvert barn. Flasker ble brukt for å lette måling i milliliter. Hver flaske ble veid før og etter tilberedning av melk i en diettmåleskala (OHOUSE, modell CS5000, kapasitet 5000gx2g). Trenede kopper ble også brukt. Hvert barn fikk en individuell flaske eller kopp med sin egen melk (240 ml). Når hver flaske eller kopp var klargjort ble den gitt til barnet. Etter at barnet var ferdig med å drikke melken, ble rester vektet og registrert i forbruksskjemaet. Melk ble tilberedt igjen (240 ml) i henhold til protokoller før hvert barn dro ca kl. 16:00. Rester av melk ble veid, målt og registrert. Mødre eller omsorgspersoner ble instruert i hvordan man tilbereder pulvermelk hjemme i henhold til WHOs retningslinjer. Dette ble gjort i helgene og for barn som drakk melk før de kom til barnehagen. Mødre fikk den mengden melk som var nødvendig for å tilberede 480 ml per dag i helgen. Mødre registrerte mengden melk som barnet la igjen i et forbruksskjema og ble opplært til å estimere og registrere melkeforbruk.

Definisjon av mangel på mikronæringsstoffer:

1. Folat: Barn med serumkonsentrasjoner av folat under < 4ng/ml ble kategorisert som mangelfulle.
2. Ferritin: Barn med serumkonsentrasjoner under <12 μg/L (LIS).
3. Sink: Barn med serumkonsentrasjoner under <65 μg/dL.
4. Vitamin A: Barn med serumkonsentrasjoner under < 20,02 ug/dL (<0,70 µmol/l).
5. Vitamin D: Barn med serumkonsentrasjoner under < 20nmol/L (<8ng/ml) ble vurdert med alvorlig mangel.

Statistisk analyse Baseline generelle karakteristika ble sammenlignet mellom studiegrupper ved å bruke t-statistikken for uavhengige utvalg. For kategoriske egenskaper ble kjikvadratstatistikken brukt.

For hver kontinuerlig responsvariabel -dvs. vekst eller mikronæringsstoffer – den differensielle effekten av tilskudd ble estimert med en multippel regresjonsmodell som inkluderte en indikatorvariabel for studiegruppen, en indikatorvariabel for oppfølgingsperioden og den tilsvarende interaksjonen mellom disse to begrepene. For binære utfall ble logistisk regresjonsmodell brukt. Baseline-karakteristikker som var signifikant forskjellig mellom studiegruppene ble inkludert som kovariater. Alle standardfeil ble justert for dataavhengigheter på fagnivå. Antropometriske kontinuerlige responser ble analysert forutsatt normalitet, mens mikronæringsstoff-kontinuerlige responser ble antatt å ha en lognormal fordeling. For sistnevnte ble utfallsvariabelen logtransformert før estimering av modellen og justerte geometriske gjennomsnitt ble oppnådd som postestimering. Justerte sannsynligheter ble oppnådd etter å ha tilpasset de logistiske modellene og brukt den inverse av logit-funksjonen på den lineære prediksjonen. Justerte geometriske gjennomsnitt og sannsynligheter ble oppnådd gjennom prediktive marginer og deres standardfeil gjennom Delta-metoden; endringer over tid for disse prediktive marginene ble oppnådd som gjennomsnittlige marginale effekter.

En sosioøkonomisk statusindikator ble oppnådd som abstraherer den første hovedkomponenten fra husholdningens materielle egenskaper og tjenester. Den første hovedkomponenten forklarte 30 % av total varians.