Обогащенное молоко, рост и статус питательных микроэлементов у мексиканских малышей (MilkGrowth)

Исследование проводилось в Мексике. В исследование были включены дети в возрасте от 12 до 30 месяцев, которые посещали детские сады. Эти центры дневного ухода являются частью национальной государственной программы, основной целью которой является поддержка работающих матерей и тех, кто собирается работать, но не имеет доступа к медицинскому обслуживанию и рискует оказаться за чертой бедности. Программа также включает родителей-одиночек, отвечающих за свою семью с детьми в возрасте от 12 до 36 месяцев.

Описанное здесь исследование представляет собой рандомизированное, параллельное, двойное слепое, контролируемое исследование с введением молока для выращивания (GM) и обогащенного молока (FM).

Рандомизация и маскировка:

Метод Мозеса-Окфорда был использован для случайного распределения 189 детей в 1 из 2 групп в этом двойном слепом контролируемом исследовании путем введения молока для роста (Enfa-Grow® GM) (GM) и обогащенного молока (FM). Было 96 детей в красно-серой группе и 93 в сине-зеленой группе, исследование будет слепым до завершения статистического анализа. Одна группа получила GM, а другая группа получила FM. Обе группы получали 480 мл/день (240 мл в 7:00 и 240 мл в 16:00). Обе добавки были неразличимы, имели одинаковый цвет, запах (сухое белое молоко) и вкус, за исключением цветовой маркировки банки. Цветовой код был неизвестен исследователям, полевым работникам, пользователям и аналитикам. Молоко предлагалось детям 5 дней в неделю в течение 4 месяцев под наблюдением исследовательского персонала, который фиксировал потребление добавки, а также ее количество.

Критерий исключения:

Исследователи не включали детей, находившихся на грудном вскармливании во время исследования, а также детей, получавших комплексные добавки микроэлементов. Если ребенок имел капиллярный гемоглобин <9,0 г/дл на исходном уровне или был клинически болен, его не включали.

Сбор данных Антропометрические измерения Антропометрические измерения проводились в начале исследования, через 8 и 16 недель. Вес измеряли с точностью до 10 г с помощью электронных весов (весы TANITA, Tanita Corp., Арлингтон-Хайтс, грузоподъемность 14 кг для младенцев и 36 кг для взрослых, Токио), а длину и рост измеряли с точностью до миллиметра с помощью доски для измерения длины ( Schorr Industries, Гленн Берни, доктор медицины). Окружность головы измеряли с точностью до миллиметра гибкой нерастяжимой пластифицированной измерительной лентой (модель Hoechstmass-Rollfix 150 см). Полевые работники были обучены и стандартизированы с использованием стандартных методов в соответствии с протоколами. Вес, длина тела и окружность головы были преобразованы в Z-баллы с использованием эталонных стандартов Всемирной организации здравоохранения (ВОЗ) 2006 года. Распространенность задержки роста, истощения и недостаточной массы тела рассчитывали с использованием минус 2 z-показателей для каждого показателя (длина тела или рост к возрасту, масса тела к длине тела или рост и масса тела к возрасту) в определенных точках отсечки для возраста и возраста. секс. Избыточный вес/ожирение определяли как отношение массы тела к длине тела/росту выше плюс 2 z-показателя.

Концентрацию гемоглобина определяли в образцах капиллярной крови, полученных путем прокола пальца, и измеряли с помощью портативного фотометра HemoCue- на исходном уровне. В соответствии с критериями отбора, если у ребенка было <9,0 г/дл, ребенка направляли в ближайший медицинский центр. После ночного голодания образцы венозной крови (10 мл) брали из локтевой вены в начале исследования, а также через 8 и 16 недель после этого. Образцы были получены обученной медсестрой, имевшей опыт работы с детьми, в соответствии с протокольными процедурами, установленными Комиссией по биобезопасности Национального института общественного здравоохранения (NIPH). Пробы капиллярной и венозной крови брали в каждом дневном стационаре. Образцы капиллярной крови брали только на исходном уровне. Некоторые матери отказывались от участия в исследовании из-за забора крови. Образцы центрифугировали с использованием портативной центрифуги EBA8 (Hettich, Tuttlingen, Germany) при 280×g; 20 минут на месте, и сыворотку хранили в криогенных флаконах с цветовой кодировкой и хранили в жидком азоте, защищенном от света, до доставки в лабораторию биохимии и питания в NIPH.

Попав в лабораторию, образцы хранились при температуре -70ºC до тех пор, пока не были готовы к анализу. Каждый микроэлемент измеряли следующим образом: ферритин, цинк и фолиевая кислота: для оценки концентрации ферритина в сыворотке использовали коммерческие наборы (Dade Behring Inc.). Концентрации цинка в сыворотке измеряли с помощью атомно-эмиссионной спектроскопии с индуктивно связанной плазмой с использованием спектрометра Varian Vista Pro CCD. Фолат сыворотки освобождали от белка с помощью гидроксида натрия, дитиотреитола и цианида калия и превращали в цианокобаламин и стабильные фолаты. Их концентрации измеряли с помощью конкурентного иммуноферментного анализа в автоматизированном иммунном анализе TOSOH. Витамин D: 25-OH-D3 в сыворотке анализировали с помощью CMIA с использованием модуля Abbott Architect. Витамин А: ретинол сыворотки экстрагировали 100% чистым этанолом; этанол выпаривали в токе азота и растворяли в 100 мл 10% этанола. Определения проводили с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) на приборе Waters (Waters Co., Милфорд, Массачусетс, США) с использованием колонки 3,9 x 150 мм Nova-Pak C18 ODS (Waters Co.) с подвижной фазой. CH3OH, 100%, со скоростью потока 1,5 мл/мин, при длине волны 325 нм. Липиды сыворотки: липидный профиль сыворотки определяли на газовом хроматографе (5890 Series II, Hewlett-Packard, США). Данные о заболеваемости собирали ежедневно в каждом детском саду. Контрольный список использовался для записи симптомов диареи и острых респираторных инфекций. Матерей или опекунов просили вспомнить любые симптомы, связанные с потреблением молока.

Социально-экономический статус Информация о характеристиках домохозяйства участника, уровне образования и роде занятий родителей была получена путем опроса матери.

Вмешательство Сухое молоко готовили и восстанавливали каждый будний день в каждом детском саду в соответствии с рекомендациями ВОЗ и руководств по уходу за детьми. Утром, примерно в 7 часов утра, обученный персонал приготовил молоко в соответствии с цветовой маркировкой, присвоенной каждому ребенку. Бутылки использовались для облегчения измерения в миллилитрах. Каждую бутылку взвешивали до и после приготовления молока на диетических весах (OHOUSE, модель CS5000, вместимость 5000 г x 2 г). Также использовались специальные чашки. Каждый ребенок получил индивидуальную бутылочку или чашку со своим молоком (240 мл). После того, как каждая бутылочка или чашка были приготовлены, их отдавали ребенку. После того, как ребенок выпил молоко, остатки взвешивались и записывались в бланк потребления. Молоко было приготовлено снова (240 мл) в соответствии с протоколами перед уходом каждого ребенка примерно в 16:00. Оставшееся молоко взвешивали, измеряли и регистрировали. Матери или лица, осуществляющие уход, были проинструктированы о том, как приготовить сухое молоко в домашних условиях в соответствии с рекомендациями ВОЗ. Это было сделано в выходные дни и для детей, которые пили молоко до прихода в детский сад. Матерям давали количество молока, необходимое для приготовления 480 мл в день в выходные дни. Матери регистрировали количество молока, оставленного ребенком, в форме потребления и были обучены оценивать и регистрировать потребление молока.

Определение дефицита микроэлементов:

1. Фолат: дети с концентрацией фолиевой кислоты в сыворотке ниже < 4 нг/мл классифицировались как дефицитные.
2. Ферритин: дети с концентрацией в сыворотке ниже <12 мкг/л (LIS).
3. Цинк: дети с концентрацией в сыворотке ниже <65 мкг/дл.
4. Витамин А: дети с концентрацией в сыворотке ниже <20,02 мкг/дл (<0,70 мкмоль/л).
5. Витамин D: Дети с концентрацией в сыворотке крови ниже <20 нмоль/л (<8 нг/мл) считались страдающими тяжелым дефицитом.

Статистический анализ Исходные общие характеристики сравнивались между исследуемыми группами с использованием t-статистики для независимых выборок. Для категориальных характеристик использовалась статистика хи-квадрат.

Для каждой непрерывной переменной отклика -т.е. рост или микронутриенты, дифференциальный эффект добавок оценивался с помощью модели множественной регрессии, которая включала индикаторную переменную исследуемой группы, индикаторную переменную периода наблюдения и соответствующее взаимодействие этих двух условий. Для бинарных результатов использовалась модель логистической регрессии. Исходные характеристики, которые значительно различались между исследуемыми группами, были включены как ковариаты. Все стандартные ошибки были скорректированы с учетом зависимостей данных на уровне субъектов. Антропометрические непрерывные реакции анализировались в предположении нормальности, в то время как непрерывные реакции на микронутриенты предполагались как имеющие логарифмически нормальное распределение. Для последнего переменная результата была логарифмически преобразована перед оценкой модели, а скорректированные средние геометрические были получены в качестве постоценки. Скорректированные вероятности были получены после подгонки логистических моделей и применения обратной логит-функции к линейному прогнозу. Скорректированные средние геометрические значения и вероятности были получены через прогностические пределы и их стандартные ошибки с помощью дельта-метода; изменения с течением времени для этих прогностических пределов были получены как средние предельные эффекты.

Индикатор социально-экономического статуса был получен путем абстрагирования первого главного компонента от материальных характеристик и услуг домохозяйства. Первая главная компонента объясняла 30% общей дисперсии.