Leche fortificada, crecimiento y estado de micronutrientes en niños pequeños mexicanos (MilkGrowth)

El estudio se realizó en México. Los investigadores incluyeron niños de 12 a 30 meses de edad que asistían a guarderías. Estas guarderías son parte de un programa del gobierno nacional cuyo principal objetivo es apoyar a las madres trabajadoras y aquellas que pretenden trabajar y no tienen acceso a un servicio de salud y están en riesgo de pobreza. El programa también incluye a padres solteros a cargo de su familia con niños entre 12 y 36 meses de edad.

El estudio descrito en este documento es un ensayo controlado aleatorizado, paralelo, doble ciego mediante la administración de leche de crecimiento (GM) y leche fortificada (FM).

Aleatorización y enmascaramiento:

Se utilizó el método de Moses-Oakford para asignar al azar a 189 niños a 1 de 2 grupos en este ensayo controlado doble ciego mediante la administración de leche de crecimiento (Enfa-Grow® GM) (GM) y leche fortificada (FM). Hubo 96 niños en el grupo rojo-gris y 93 en el grupo azul-verde, el estudio será cegado hasta que finalice el análisis estadístico. Un grupo recibió GM y el otro grupo recibió FM. Ambos grupos recibieron 480 mL/d (240 mL a las 7:00 am y 240 mL a las 16:00 pm). Ambos suplementos eran indistinguibles, del mismo color, olor (leche blanca en polvo) y sabor, excepto por el código de color de la lata. El código de colores era desconocido para investigadores, trabajadores de campo, usuarios y analistas. Se ofreció leche a los niños 5 días por semana durante un período de 4 meses bajo la supervisión del personal del estudio que registró si se consumió el suplemento y la cantidad.

Criterio de exclusión:

Los investigadores no incluyeron niños que fueran amamantados en el momento del estudio, ni niños que recibieran suplementos de micronutrientes múltiples. Si un niño tenía hemoglobina capilar <9,0 g/dl, al inicio del estudio o estaba clínicamente enfermo, no se incluyó.

Recopilación de datos Medidas antropométricas Se tomaron medidas antropométricas al inicio del estudio, a las 8 y 16 semanas. El peso se midió con una precisión de 10 g con una báscula electrónica (TANITA Scale, Tanita Corp., Arlington Heights, IL capacidad 14 kg para bebés y 36 kg para adultos, Tokio) y la longitud y la altura se midieron al milímetro más cercano con una tabla de longitud ( Industrias Schorr, Glenn Burney, MD). El perímetro cefálico se tomó con una cinta métrica plastificada flexible no estirable al milímetro (modelo, Hoechstmass-Rollfix 150cm). Los trabajadores de campo fueron capacitados y estandarizados utilizando técnicas estándar de acuerdo con los protocolos. El peso, la longitud y la circunferencia de la cabeza se transformaron en puntajes Z utilizando los estándares de referencia de la Organización Mundial de la Salud (OMS) de 2006. La prevalencia del retraso en el crecimiento, la emaciación y la insuficiencia ponderal se calculó utilizando puntuaciones z de menos 2 para cada indicador (longitud o altura para la edad, peso para la longitud o altura y peso para la edad) en puntos de corte específicos para la edad y la edad. sexo. El sobrepeso/obesidad se definió como el peso para la longitud/talla superior más 2 z-Score.

La concentración de hemoglobina se determinó en muestras de sangre capilar obtenidas por punción digital y medidas en un Fotómetro Portátil -HemoCue-, al inicio del estudio. Según criterios de selección si un niño tenía < 9,0g/dl, se derivaba al centro de salud más cercano. Después de ayunar durante la noche, se extrajeron muestras de sangre venosa (10 ml) de la vena antecubital al inicio y a las 8 y 16 semanas después. Las muestras fueron obtenidas por una enfermera capacitada que había tenido experiencia trabajando con niños y de acuerdo con los procedimientos de protocolo establecidos por la Comisión de Bioseguridad del Instituto Nacional de Salud Pública (NIPH). Se tomaron muestras de sangre venosa y capilar en cada guardería. Se tomaron muestras de sangre capilar solo al inicio del estudio. Algunas madres se retiraron del estudio debido a la muestra de sangre. Las muestras se centrifugaron utilizando una centrífuga portátil EBA8 (Hettich, Tuttlingen, Alemania) a 280 X g; 20 min in situ y el suero se almacenó en viales criogénicos codificados por colores y se conservó en nitrógeno líquido protegido de la luz hasta su envío al Laboratorio de Bioquímica y Nutrición del NIPH.

Una vez en el laboratorio, las muestras se almacenaron a -70ºC hasta el momento de su análisis. Cada micronutriente se midió de la siguiente manera: Ferritina, zinc y folato: Se utilizaron kits comerciales para evaluar las concentraciones séricas de ferritina (Dade Behring Inc.) Las concentraciones séricas de zinc se midieron mediante espectroscopía de emisión atómica de plasma acoplado inductivamente usando un espectrómetro Varian Vista Pro CCD. El folato sérico se liberó de la proteína utilizando hidróxido de sodio, ditiotreitol y cianuro de potasio, y se transformó en cianocobalamina y folatos estables. Sus concentraciones se midieron mediante inmunoensayos enzimáticos competitivos en un inmunoanálisis automatizado TOSOH. Vitamina D: la 25-OH-D3 sérica fue analizada por CMIA utilizando un módulo Abbott Architect. Vitamina A: el retinol sérico se extrajo con etanol puro al 100 %; el etanol se evaporó bajo un flujo de nitrógeno y se disolvió en 100 ml de etanol al 10%. Las determinaciones se realizaron por cromatografía líquida de alta resolución (HPLC) en un instrumento Waters (Waters Co., Milford, MA, EE. UU.), utilizando una columna de 3,9 x 150 mm Nova-Pak C18 ODS (Waters Co.), con una fase móvil de CH3OH, 100% con una velocidad de flujo de 1,5 ml/min, a una longitud de onda de 325 nm. Lípidos séricos: el perfil lipídico sérico se determinó mediante un cromatógrafo de gases (5890 Series II, Hewlett-Packard, Estados Unidos). Los datos de morbilidad se recolectaron diariamente en cada guardería. Se utilizó una lista de cotejo para registrar los síntomas de diarrea e infecciones respiratorias agudas. Se pidió a las madres o cuidadores que recordaran cualquier síntoma relacionado con el consumo de leche.

Nivel socioeconómico La información sobre las características del hogar del participante, el nivel de educación y la ocupación de los padres se obtuvo mediante entrevistas a la madre.

Intervención La leche en polvo se preparó y reconstituyó todos los días de la semana en cada guardería de acuerdo con las directrices de la OMS y las guarderías. En la mañana aproximadamente a las 7 a.m., personal capacitado preparó la leche de acuerdo al código de colores asignado a cada niño. Se utilizaron botellas para facilitar la medición en mililitros. Cada biberón se pesó antes y después de preparar la leche en una báscula dietética (OHOUSE, modelo CS5000, capacidad 5000gx2g). También se utilizaron vasos entrenados. Cada niño recibió un biberón o vaso individual con su propia leche (240ml). Una vez preparado cada biberón o vaso se le entregaba al niño. Después de que el niño terminó de tomar la leche, se pesaron los sobrantes y se registraron en el formulario de consumo. Se volvió a preparar leche (240ml) según protocolos antes de que cada niño saliera aproximadamente a las 16:00 horas. La leche sobrante se pesó, midió y registró. Se instruyó a las madres o cuidadores sobre cómo preparar la leche en polvo en casa según las directrices de la OMS. Esto se hizo los fines de semana y para los niños que tomaban leche antes de llegar a la guardería. A las madres se les suministró la cantidad de leche necesaria para preparar 480 ml por día durante el fin de semana. Las madres registraron la cantidad de leche que dejaba el niño en una ficha de consumo y fueron capacitadas para estimar y registrar el consumo de leche.

Definición de deficiencias de micronutrientes:

1. Folato: Los niños con concentraciones séricas de folato inferiores a < 4 ng/mL se clasificaron como deficientes.
2. Ferritina: Niños con concentraciones séricas por debajo de <12 μg/L (LIS).
3. Zinc: Niños con concentraciones séricas por debajo de <65 μg/dL.
4. Vitamina A: Niños con concentraciones séricas inferiores a < 20,02 ug/dL (<0,70 µmol/l).
5. Vitamina D: Los niños con concentraciones séricas por debajo de < 20 nmol/L (< 8 ng/ml) se consideraron con deficiencia grave.

Análisis estadístico Las características generales basales se compararon entre los grupos de estudio mediante el estadístico t para muestras independientes. Para las características categóricas se utilizó el estadístico chi-cuadrado.

Para cada variable de respuesta continua, es decir, crecimiento o micronutrientes-, el efecto diferencial de la suplementación se estimó con un modelo de regresión múltiple que incluía una variable indicadora del grupo de estudio, una variable indicadora del período de seguimiento y la correspondiente interacción de estos dos términos. Para los resultados binarios se utilizó un modelo de regresión logística. Las características iniciales que diferían significativamente entre los grupos de estudio se incluyeron como covariables. Todos los errores estándar se ajustaron por dependencias de datos a nivel de sujeto. Las respuestas continuas antropométricas se analizaron asumiendo normalidad, mientras que las respuestas continuas de micronutrientes se supusieron con una distribución lognormal. Para este último, la variable de resultado se transformó logarítmicamente antes de estimar el modelo y se obtuvieron medias geométricas ajustadas como posestimación. Las probabilidades ajustadas se obtuvieron tras ajustar los modelos logísticos y aplicar la inversa de la función logit a la predicción lineal. Las medias geométricas ajustadas y las probabilidades se obtuvieron mediante márgenes predictivos y sus errores estándar mediante el método Delta; los cambios en el tiempo para estos márgenes predictivos se obtuvieron como efectos marginales promedio.

Se obtuvo un indicador de estatus socioeconómico abstrayendo el primer componente principal de las características materiales y servicios del hogar. El primer componente principal explicó el 30% de la varianza total.