Jämförelse av förglasningseffekt före eller efter in vitro-mognad
31 januari 2018 uppdaterad av: University Hospital, Clermont-Ferrand
Karakterisering av en metod för bevarande av fertilitet för patienter med diagnosen cancer
Kryokonservering av mänskliga oocyter används rutinmässigt för att bevara fertilitet hos kvinnor som kommer att utsättas för gonadotoxisk effekt av cancerbehandling. Efter äggstocksstimulering förglasas mogna oocyter. Denna strategi kan dock inte alltid användas, särskilt för hormonkänslig cancer eller när äggstocksstimulering inte är möjlig. En metod som inkluderar omogna oocyter och in vitro mognad (IVM) kan övervägas i dessa fall. Även om viss kvalitativ analys av oocyter förglasade före eller efter IVM tyder på att förglasning bör utföras efter IVM, är lite känt om förglasningseffekter på aktin- och tubulins cytoskelett och mognadsmognaden hos mänskliga äggceller.
För att svara på denna fråga utförde Investigator kvantitativa analyser som jämförde mogna oocyter från tre olika grupper: förglasade före IVM eller efter IVM och icke-vitrifierade oocyter. Icke-vitrifierade mogna oocyter användes som kontroll. Olika parametrar har analyserats under mognad och i mogna oocyter.
Studieöversikt
Status
Okänd
Intervention / Behandling
Detaljerad beskrivning
Omogna oocyter samlades in från patienter (≤37 år gamla, utan endometrios, polycystiskt syndrom eller annan ovulatorisk sjukdom) som genomgick ICSI.
Dessutom kommer omogna oocyter insamlade från patienter med diagnosen cancer att inkluderas i denna studie.
Oocyter mognades in vitro med IVM-medium och förglasades i slutet system ("Vitrolife").
Mognadskinetiken analyserades av Primovision ("Vitrolife") och aktin, och spindelorganisationen studerades med mikroskopi, immunfärgningstekniker och kvantitiv analys.
Studietyp
Observationell
Inskrivning (Förväntat)
100
Kontakter och platser
Det här avsnittet innehåller kontaktuppgifter för dem som genomför studien och information om var denna studie genomförs.
Studieorter
-
-
-
Clermont-Ferrand, Frankrike, 63003
- Rekrytering
- CHU Clermont-Ferrand
-
Underutredare:
- Aïcha METCHAT
-
-
Deltagandekriterier
Forskare letar efter personer som passar en viss beskrivning, så kallade behörighetskriterier. Några exempel på dessa kriterier är en persons allmänna hälsotillstånd eller tidigare behandlingar.
Urvalskriterier
Åldrar som är berättigade till studier
18 år till 37 år (Vuxen)
Tar emot friska volontärer
Ja
Kön som är behöriga för studier
Kvinna
Testmetod
Icke-sannolikhetsprov
Studera befolkning
kvinna
Beskrivning
Inklusionskriterier:
- - ICSI-behandling
- Omogna oocyter
- < 37 år gammal
Exklusions kriterier:
- - Polyckistiskt ovariesyndrom
- Endometrios
- Ägglossningssjukdom
Studieplan
Det här avsnittet ger detaljer om studieplanen, inklusive hur studien är utformad och vad studien mäter.
Hur är studien utformad?
Designdetaljer
Kohorter och interventioner
Grupp / Kohort |
Intervention / Behandling |
|---|---|
|
Omogna oocyter förglasade före in vitro-mognad
Omogna oocyter förglasades med förglasning i slutet system.
Efter uppvärmning odlades de under 36 timmar i IVM-medium och fixerades för cellulär analys
|
Omogna oocyter samlades in från patienter (≤37 år gamla, utan endometrios, polycystiskt syndrom eller annan ovulatorisk sjukdom) som genomgick ICSI.
Dessutom kommer omogna oocyter insamlade från patienter med diagnosen cancer att inkluderas i denna studie.
Oocyter mognades in vitro med IVM-medium och förglasades i slutet system (Vitrolife).
Mognadskinetiken analyserades med Primovision (Vitrolife) och aktin, och spindelorganisationen studerades med mikroskopi, immunfärgningstekniker och kvantitiv analys.
|
|
Omogna oocyter odlade in vitro före vitrifiering
Omogna oocyter odlades in vitro i IVM-medium under 36 timmar.
Efter IVM förglasades de.
Efter uppvärmning fixerades de för cellulär analys.
|
Omogna oocyter samlades in från patienter (≤37 år gamla, utan endometrios, polycystiskt syndrom eller annan ovulatorisk sjukdom) som genomgick ICSI.
Dessutom kommer omogna oocyter insamlade från patienter med diagnosen cancer att inkluderas i denna studie.
Oocyter mognades in vitro med IVM-medium och förglasades i slutet system (Vitrolife).
Mognadskinetiken analyserades med Primovision (Vitrolife) och aktin, och spindelorganisationen studerades med mikroskopi, immunfärgningstekniker och kvantitiv analys.
|
|
Färska oocyter
Omogna oocyter odlades in vitro i IVM-medium under 36 timmar och fixerades därefter för cellulär analys.
|
Omogna oocyter samlades in från patienter (≤37 år gamla, utan endometrios, polycystiskt syndrom eller annan ovulatorisk sjukdom) som genomgick ICSI.
Dessutom kommer omogna oocyter insamlade från patienter med diagnosen cancer att inkluderas i denna studie.
Oocyter mognades in vitro med IVM-medium och förglasades i slutet system (Vitrolife).
Mognadskinetiken analyserades med Primovision (Vitrolife) och aktin, och spindelorganisationen studerades med mikroskopi, immunfärgningstekniker och kvantitiv analys.
|
Vad mäter studien?
Primära resultatmått
Resultatmått |
Åtgärdsbeskrivning |
Tidsram |
|---|---|---|
|
Analys av mognadskinetik för oocyter förglasade i profas-I-stadiet jämfört med färska oocyter
Tidsram: på dag 1
|
Efter oocythämtning kommer omogna oocyter att förglasas (Rapid Vit Ovocyte®, Vitrolife) i ett slutet system (Rapid-I®, Vitrolife) och tinas för in vitro-mognad några dagar efter.
Den meiotiska processen kommer att analyseras med time lapse-teknologi (Primovision®, Vitrolife).
Detta kommer att göra det möjligt att poängsätta mognadstiden från återupptagande till polär kroppsextrudering av äggocyter.
|
på dag 1
|
Sekundära resultatmått
Resultatmått |
Åtgärdsbeskrivning |
Tidsram |
|---|---|---|
|
Analys av aktin- och tubulincytoskelett vid metafas-II-stadiet
Tidsram: på dag 1
|
Metafas-II-stadiet oocyter från båda protokollen kommer att användas för immunfluorescensexperiment för att färga aktin, tubulin och kromosomer.
Oocyter kommer att avbildas med konfokalmikroskop för att utföra högupplöst bildbehandling och kvantitativ bildanalys.
Längden, positionen och orienteringen av den andra meiotiska spindeln kommer att kvantifieras.
Aktinnätverket och kromosomerna kommer att analyseras kvantitativt.
Alla mätningar kommer att jämföras med färska Metaphase-II oocyter som används som kontrollgrupp.
|
på dag 1
|
|
Analys av kromosomsegregation under den första meiotiska uppdelningen.
Tidsram: på dag 1
|
Den första asymmetriska divisionen är mycket felbenägen.
För att undersöka om kromosomerna segregeras exakt efter förglasning kommer vi att utföra Fluorescence In Situ Hybridization för att måla varje kromosom efter kromosomspridning från oocyter i Metafas II-stadiet från båda tillstånden
|
på dag 1
|
|
Analys av kortikala granulatfördelning i oocyter i Metafas II-stadiet.
Tidsram: på dag 1
|
En färgning med Lektin kommer att användas för att markera kortikala granuler av mogna oocyter från båda protokollen för att observera om vitrifieringen ändrar deras rumsliga fördelning.
För att analysera denna färgning kommer vi att använda kvantitativ bildanalysmetod.
|
på dag 1
|
|
Analys av maternal faktorstabilitet.
Tidsram: på dag 1
|
Maternala faktorer som lagras i oocytcytoplasman under oogenes som proteiner och transkript är väsentliga för den tidiga embryonala utvecklingen.
För att veta om beståndet av maternala faktorer minskar genom förglasningsproceduren kommer vi att utföra omvänd transkription kombinerat med realtids-PCR för att kvantifiera transkriptmängder av kandidatgener valda från humana oocytdatabaser.
|
på dag 1
|
Samarbetspartners och utredare
Det är här du hittar personer och organisationer som är involverade i denna studie.
Samarbetspartners
Studieavstämningsdatum
Dessa datum spårar framstegen för inlämningar av studieposter och sammanfattande resultat till ClinicalTrials.gov. Studieposter och rapporterade resultat granskas av National Library of Medicine (NLM) för att säkerställa att de uppfyller specifika kvalitetskontrollstandarder innan de publiceras på den offentliga webbplatsen.
Studera stora datum
Studiestart (Faktisk)
1 januari 2017
Primärt slutförande (Faktisk)
1 januari 2018
Avslutad studie (Förväntat)
31 december 2019
Studieregistreringsdatum
Först inskickad
24 januari 2018
Först inskickad som uppfyllde QC-kriterierna
24 januari 2018
Första postat (Faktisk)
31 januari 2018
Uppdateringar av studier
Senaste uppdatering publicerad (Faktisk)
1 februari 2018
Senaste inskickade uppdateringen som uppfyllde QC-kriterierna
31 januari 2018
Senast verifierad
1 januari 2018
Mer information
Termer relaterade till denna studie
Andra studie-ID-nummer
- CHU-372
Läkemedels- och apparatinformation, studiedokument
Studerar en amerikansk FDA-reglerad läkemedelsprodukt
Nej
Studerar en amerikansk FDA-reglerad produktprodukt
Nej
Denna information hämtades direkt från webbplatsen clinicaltrials.gov utan några ändringar. Om du har några önskemål om att ändra, ta bort eller uppdatera dina studieuppgifter, vänligen kontakta register@clinicaltrials.gov. Så snart en ändring har implementerats på clinicaltrials.gov, kommer denna att uppdateras automatiskt även på vår webbplats .