Az üvegesedés hatásának összehasonlítása az in vitro érés előtt vagy után
2018. január 31. frissítette: University Hospital, Clermont-Ferrand
A daganatos betegséggel diagnosztizált betegek termékenységmegőrzési módszerének jellemzése
Az emberi petesejtek mélyhűtését rutinszerűen alkalmazzák olyan nők termékenységének megőrzésére, akik ki lesznek téve a rákkezelés gonadotoxikus hatásának. A petefészek stimulálása után az érett petesejtek üvegesednek. Ez a stratégia azonban nem mindig alkalmazható, különösen hormonérzékeny rák esetén, vagy amikor a petefészek stimulálása nem lehetséges. Ezekben az esetekben megfontolható egy olyan megközelítés, amely magában foglalja az éretlen petesejteket és az in vitro érést (IVM). Míg az IVM előtt vagy után üvegesített petesejtek néhány kvalitatív elemzése azt sugallja, hogy az IVM után vitrifikációt kell végezni, keveset tudunk az aktin és tubulin citoszkeletonra gyakorolt vitrifikációs hatásáról, valamint az emberi ovociták érésének kinetikájáról.
Ennek a kérdésnek a megválaszolásához az Investigator kvantitatív elemzéseket végzett, három különböző csoport érett petesejteket összehasonlítva: IVM előtt vagy IVM után üvegesített petesejtek és nem üvegesített petesejtek. Kontrollként nem üvegesített érett petesejteket használtunk. Különböző paramétereket elemeztek az érés során és az érett petesejtekben.
A tanulmány áttekintése
Állapot
Ismeretlen
Beavatkozás / kezelés
Részletes leírás
Az ICSI-n átesett (≤37 éves, endometriózis, policisztás szindróma vagy más ovulációs betegség nélküli) betegek éretlen petesejteket gyűjtöttük.
Ezenkívül a rákos betegséggel diagnosztizált betegektől gyűjtött éretlen petesejteket is bevonják ebbe a vizsgálatba.
A petesejteket in vitro IVM tápközeggel érleltük, és zárt rendszerben ("Vitrolife") üvegesítettük.
Az érés kinetikáját a Primovision ("Vitrolife") és az aktin, az orsó szerveződését mikroszkóppal, immunfestési technikákkal és mennyiségi elemzéssel vizsgálták.
Tanulmány típusa
Megfigyelő
Beiratkozás (Várható)
100
Kapcsolatok és helyek
Ez a rész a vizsgálatot végzők elérhetőségeit, valamint a vizsgálat lefolytatásának helyére vonatkozó információkat tartalmazza.
Tanulmányi helyek
-
-
-
Clermont-Ferrand, Franciaország, 63003
- Toborzás
- Chu Clermont-Ferrand
-
Alkutató:
- Aïcha METCHAT
-
-
Részvételi kritériumok
A kutatók olyan embereket keresnek, akik megfelelnek egy bizonyos leírásnak, az úgynevezett jogosultsági kritériumoknak. Néhány példa ezekre a kritériumokra a személy általános egészségi állapota vagy a korábbi kezelések.
Jogosultsági kritériumok
Tanulmányozható életkorok
18 év (Felnőtt)
Egészséges önkénteseket fogad
Igen
Tanulmányozható nemek
Női
Mintavételi módszer
Nem valószínűségi minta
Tanulmányi populáció
női
Leírás
Bevételi kritériumok:
- - ICSI kezelés
- Éretlen petesejtek
- <37 éves
Kizárási kritériumok:
- - Polickisztikus petefészek-szindróma
- Endometriózis
- Ovulációs betegség
Tanulási terv
Ez a rész a vizsgálati terv részleteit tartalmazza, beleértve a vizsgálat megtervezését és a vizsgálat mérését.
Hogyan készül a tanulmány?
Tervezési részletek
Kohorszok és beavatkozások
Csoport / Kohorsz |
Beavatkozás / kezelés |
|---|---|
|
Az éretlen petesejtek üvegesedtek az in vitro érés előtt
Az éretlen petesejteket zárt rendszerű üvegezéssel üvegesítettük.
Melegítés után 36 órán át IVM tápközegben tenyésztettük, és sejtelemzés céljából rögzítettük
|
Az ICSI-n átesett (≤37 éves, endometriózis, policisztás szindróma vagy más ovulációs betegség nélküli) betegek éretlen petesejteket gyűjtöttük.
Ezenkívül a rákos betegséggel diagnosztizált betegektől gyűjtött éretlen petesejteket is bevonják ebbe a vizsgálatba.
A petesejteket in vitro IVM tápközeggel érleltük, majd zárt rendszerben (Vitrolife) üvegesítettük.
Az érés kinetikáját Primovision (Vitrolife) és aktin, az orsó szerveződését mikroszkóppal, immunfestési technikákkal és kvantitatív elemzéssel vizsgáltuk.
|
|
Éretlen petesejtek in vitro tenyésztése üvegezés előtt
Éretlen petesejteket tenyésztettünk in vitro IVM tápközegben 36 órán keresztül.
Az IVM után üvegesítették.
Felmelegedés után sejtelemzés céljából rögzítették őket.
|
Az ICSI-n átesett (≤37 éves, endometriózis, policisztás szindróma vagy más ovulációs betegség nélküli) betegek éretlen petesejteket gyűjtöttük.
Ezenkívül a rákos betegséggel diagnosztizált betegektől gyűjtött éretlen petesejteket is bevonják ebbe a vizsgálatba.
A petesejteket in vitro IVM tápközeggel érleltük, majd zárt rendszerben (Vitrolife) üvegesítettük.
Az érés kinetikáját Primovision (Vitrolife) és aktin, az orsó szerveződését mikroszkóppal, immunfestési technikákkal és kvantitatív elemzéssel vizsgáltuk.
|
|
Friss petesejtek
Az éretlen petesejteket in vitro IVM tápközegben tenyésztettük 36 órán keresztül, majd fixáltuk sejtelemzés céljából.
|
Az ICSI-n átesett (≤37 éves, endometriózis, policisztás szindróma vagy más ovulációs betegség nélküli) betegek éretlen petesejteket gyűjtöttük.
Ezenkívül a rákos betegséggel diagnosztizált betegektől gyűjtött éretlen petesejteket is bevonják ebbe a vizsgálatba.
A petesejteket in vitro IVM tápközeggel érleltük, majd zárt rendszerben (Vitrolife) üvegesítettük.
Az érés kinetikáját Primovision (Vitrolife) és aktin, az orsó szerveződését mikroszkóppal, immunfestési technikákkal és kvantitatív elemzéssel vizsgáltuk.
|
Mit mér a tanulmány?
Elsődleges eredményintézkedések
Eredménymérő |
Intézkedés leírása |
Időkeret |
|---|---|---|
|
A Prophase I stádiumban üvegesedett petesejtek érési kinetikájának elemzése a friss petesejtekhez képest
Időkeret: az 1. napon
|
A petesejtek kinyerése után az éretlen petesejteket üvegesítik (Rapid Vit Ovocyte®, Vitrolife) zárt rendszerben (Rapid-I®, Vitrolife), majd néhány nappal később in vitro érlelés céljából felolvasztják.
A meiotikus folyamatot time lapse technológia (Primovision®, Vitrolife) elemzi.
Ez lehetővé teszi az ovociták érési idejének értékelését az újrakezdéstől a poláris test extrudálásáig.
|
az 1. napon
|
Másodlagos eredményintézkedések
Eredménymérő |
Intézkedés leírása |
Időkeret |
|---|---|---|
|
Aktin és tubulin citoszkeleton elemzése a metafázis-II stádiumban
Időkeret: az 1. napon
|
Mindkét protokoll metafázis-II stádiumú petesejteket immunfluoreszcencia kísérletekhez használjuk fel az aktin, a tubulin és a kromoszómák megfestésére.
A petesejteket konfokális mikroszkóp segítségével leképezik a nagy felbontású képalkotás és a kvantitatív képelemzés elvégzése érdekében.
A második meiotikus orsó hossza, helyzete és orientációja számszerűsíthető.
Az aktin hálózatot és a kromoszómákat kvantitatívan elemezzük.
Minden mérést összehasonlítanak a kontrollcsoportként használt friss metafázis-II oocitákkal.
|
az 1. napon
|
|
A kromoszóma szegregáció elemzése az első meiotikus osztódás során.
Időkeret: az 1. napon
|
Az első aszimmetrikus felosztás nagyon hibás.
Annak vizsgálatára, hogy a kromoszómák pontosan szegregálódtak-e az üvegezés után, fluoreszcens in situ hibridizációt végzünk, hogy minden kromoszómát megfesthessünk, miután a kromoszóma elterjedt a metafázis-II stádiumú petesejtekből mindkét állapotból.
|
az 1. napon
|
|
A kérgi szemcsék eloszlásának elemzése metafázis-II stádiumú petesejtekben.
Időkeret: az 1. napon
|
Lectinnel való festést használnak az érett petesejtek kérgi szemcséinek megjelölésére mindkét protokollból annak megfigyelésére, hogy a vitrifikáció módosítja-e azok térbeli eloszlását.
Ennek a festődésnek az elemzéséhez kvantitatív képelemzési módszert alkalmazunk.
|
az 1. napon
|
|
Az anyai tényező stabilitásának elemzése.
Időkeret: az 1. napon
|
Az oogenezis során a petesejtek citoplazmájában tárolt anyai faktorok, mint fehérjék és transzkriptumok nélkülözhetetlenek a korai embrionális fejlődéshez.
Annak érdekében, hogy megtudjuk, az anyai faktorok állománya csökken-e a vitrifikációs eljárás miatt, valós idejű PCR-rel kombinált fordított transzkripciót végzünk, hogy számszerűsítsük a humán petesejtek adatbázisából kiválasztott jelölt gének transzkriptum mennyiségét.
|
az 1. napon
|
Együttműködők és nyomozók
Itt találhatja meg a tanulmányban érintett személyeket és szervezeteket.
Együttműködők
Tanulmányi rekorddátumok
Ezek a dátumok nyomon követik a ClinicalTrials.gov webhelyre benyújtott vizsgálati rekordok és összefoglaló eredmények benyújtásának folyamatát. A vizsgálati feljegyzéseket és a jelentett eredményeket a Nemzeti Orvostudományi Könyvtár (NLM) felülvizsgálja, hogy megbizonyosodjon arról, hogy megfelelnek-e az adott minőség-ellenőrzési szabványoknak, mielőtt közzéteszik őket a nyilvános weboldalon.
Tanulmány főbb dátumok
Tanulmány kezdete (Tényleges)
2017. január 1.
Elsődleges befejezés (Tényleges)
2018. január 1.
A tanulmány befejezése (Várható)
2019. december 31.
Tanulmányi regisztráció dátumai
Először benyújtva
2018. január 24.
Először nyújtották be, amely megfelel a minőségbiztosítási kritériumoknak
2018. január 24.
Első közzététel (Tényleges)
2018. január 31.
Tanulmányi rekordok frissítései
Utolsó frissítés közzétéve (Tényleges)
2018. február 1.
Az utolsó frissítés elküldve, amely megfelel a minőségbiztosítási kritériumoknak
2018. január 31.
Utolsó ellenőrzés
2018. január 1.
Több információ
A tanulmányhoz kapcsolódó kifejezések
Egyéb vizsgálati azonosító számok
- CHU-372
Gyógyszer- és eszközinformációk, tanulmányi dokumentumok
Egy amerikai FDA által szabályozott gyógyszerkészítményt tanulmányoz
Nem
Egy amerikai FDA által szabályozott eszközterméket tanulmányoz
Nem
Ezt az információt közvetlenül a clinicaltrials.gov webhelyről szereztük be, változtatás nélkül. Ha bármilyen kérése van vizsgálati adatainak módosítására, eltávolítására vagy frissítésére, kérjük, írjon a következő címre: register@clinicaltrials.gov. Amint a változás bevezetésre kerül a clinicaltrials.gov oldalon, ez a webhelyünkön is automatikusan frissül. .