Porównanie efektu witryfikacji przed lub po dojrzewaniu in vitro
31 stycznia 2018 zaktualizowane przez: University Hospital, Clermont-Ferrand
Charakterystyka metody zachowania płodności u pacjentek z rozpoznaniem choroby nowotworowej
Kriokonserwacja ludzkich oocytów jest rutynowo stosowana w celu zachowania płodności kobiet, które będą narażone na gonadotoksyczne działanie leczenia przeciwnowotworowego. Po stymulacji jajników dojrzałe oocyty poddaje się witryfikacji. Jednak ta strategia nie zawsze może być stosowana, szczególnie w przypadku raka wrażliwego na hormony lub gdy stymulacja jajników nie jest możliwa. W takich przypadkach można rozważyć podejście obejmujące niedojrzałe oocyty i dojrzewanie in vitro (IVM). Podczas gdy niektóre analizy jakościowe oocytów zeszklonych przed lub po IVM sugerują, że witryfikację należy przeprowadzić po IVM, niewiele wiadomo na temat wpływu witryfikacji na cytoszkielet aktynowy i tubulinowy oraz kinetykę dojrzewania ludzkich jajników.
Aby odpowiedzieć na to pytanie, Investigator przeprowadził analizy ilościowe porównujące dojrzałe oocyty z trzech różnych grup: oocyty zeszklone przed IVM lub po IVM oraz oocyty nie poddane witryfikacji. Niezeszklone dojrzałe oocyty zastosowano jako kontrolę. Analizowano różne parametry podczas dojrzewania iw dojrzałych oocytach.
Przegląd badań
Status
Nieznany
Interwencja / Leczenie
Szczegółowy opis
Niedojrzałe oocyty pobrano od pacjentek (≤37 lat, bez endometriozy, zespołu policystycznych lub innych chorób owulacyjnych), które przeszły ICSI.
Ponadto w tym badaniu zostaną uwzględnione niedojrzałe oocyty pobrane od pacjentki z rozpoznaniem raka.
Oocyty dojrzewano in vitro z pożywką IVM i witryfikowano w układzie zamkniętym („Vitrolife”).
Kinetykę dojrzewania analizowano za pomocą Primovision („Vitrolife”) i aktyny, a organizację wrzeciona badano za pomocą mikroskopii, technik barwienia immunologicznego i analizy ilościowej.
Typ studiów
Obserwacyjny
Zapisy (Oczekiwany)
100
Kontakty i lokalizacje
Ta sekcja zawiera dane kontaktowe osób prowadzących badanie oraz informacje o tym, gdzie badanie jest przeprowadzane.
Lokalizacje studiów
-
-
-
Clermont-Ferrand, Francja, 63003
- Rekrutacyjny
- Chu Clermont-Ferrand
-
Pod-śledczy:
- Aïcha METCHAT
-
-
Kryteria uczestnictwa
Badacze szukają osób, które pasują do określonego opisu, zwanego kryteriami kwalifikacyjnymi. Niektóre przykłady tych kryteriów to ogólny stan zdrowia danej osoby lub wcześniejsze leczenie.
Kryteria kwalifikacji
Wiek uprawniający do nauki
18 lat do 37 lat (Dorosły)
Akceptuje zdrowych ochotników
Tak
Płeć kwalifikująca się do nauki
Kobieta
Metoda próbkowania
Próbka bez prawdopodobieństwa
Badana populacja
Kobieta
Opis
Kryteria przyjęcia:
- - zabieg ICSI
- Niedojrzałe oocyty
- < 37 lat
Kryteria wyłączenia:
- - zespół policystycznych jajników
- Endometrioza
- Choroba owulacyjna
Plan studiów
Ta sekcja zawiera szczegółowe informacje na temat planu badania, w tym sposób zaprojektowania badania i jego pomiary.
Jak projektuje się badanie?
Szczegóły projektu
Kohorty i interwencje
Grupa / Kohorta |
Interwencja / Leczenie |
|---|---|
|
Niedojrzałe oocyty zeszklone przed dojrzewaniem in vitro
Niedojrzałe oocyty witryfikowano za pomocą witryfikacji w systemie zamkniętym.
Po ogrzaniu hodowano je przez 36 godzin w pożywce IVM i utrwalano do analizy komórkowej
|
Niedojrzałe oocyty pobrano od pacjentek (≤37 lat, bez endometriozy, zespołu policystycznych lub innych chorób owulacyjnych), które przeszły ICSI.
Ponadto w tym badaniu zostaną uwzględnione niedojrzałe oocyty pobrane od pacjentki z rozpoznaniem raka.
Oocyty dojrzewały in vitro z pożywką IVM i witryfikowano w układzie zamkniętym (Vitrolife).
Kinetykę dojrzewania analizowano za pomocą Primovision (Vitrolife) i aktyny, a organizację wrzeciona badano za pomocą mikroskopii, technik barwienia immunologicznego i analizy ilościowej.
|
|
Niedojrzałe oocyty hodowane in vitro przed witryfikacją
Niedojrzałe oocyty hodowano in vitro w pożywce IVM przez 36 godzin.
Po IVM zostały zeszklone.
Po ogrzaniu utrwalono je do analizy komórkowej.
|
Niedojrzałe oocyty pobrano od pacjentek (≤37 lat, bez endometriozy, zespołu policystycznych lub innych chorób owulacyjnych), które przeszły ICSI.
Ponadto w tym badaniu zostaną uwzględnione niedojrzałe oocyty pobrane od pacjentki z rozpoznaniem raka.
Oocyty dojrzewały in vitro z pożywką IVM i witryfikowano w układzie zamkniętym (Vitrolife).
Kinetykę dojrzewania analizowano za pomocą Primovision (Vitrolife) i aktyny, a organizację wrzeciona badano za pomocą mikroskopii, technik barwienia immunologicznego i analizy ilościowej.
|
|
Świeże oocyty
Niedojrzałe oocyty hodowano in vitro w pożywce IVM przez 36 godzin, a następnie utrwalano do analizy komórkowej.
|
Niedojrzałe oocyty pobrano od pacjentek (≤37 lat, bez endometriozy, zespołu policystycznych lub innych chorób owulacyjnych), które przeszły ICSI.
Ponadto w tym badaniu zostaną uwzględnione niedojrzałe oocyty pobrane od pacjentki z rozpoznaniem raka.
Oocyty dojrzewały in vitro z pożywką IVM i witryfikowano w układzie zamkniętym (Vitrolife).
Kinetykę dojrzewania analizowano za pomocą Primovision (Vitrolife) i aktyny, a organizację wrzeciona badano za pomocą mikroskopii, technik barwienia immunologicznego i analizy ilościowej.
|
Co mierzy badanie?
Podstawowe miary wyniku
Miara wyniku |
Opis środka |
Ramy czasowe |
|---|---|---|
|
Analiza kinetyki dojrzewania oocytów zeszklonych w fazie profazy-I w porównaniu z oocytami świeżymi
Ramy czasowe: w dniu 1
|
Po pobraniu oocytów, niedojrzałe oocyty zostaną poddane witryfikacji (Rapid Vit Ovocyte®, Vitrolife) w systemie zamkniętym (Rapid-I®, Vitrolife) i rozmrożone do dojrzewania in vitro kilka dni później.
Proces mejotyczny będzie analizowany za pomocą technologii poklatkowej (Primovision®, Vitrolife).
Pozwoli to na ocenę czasu dojrzewania od wznowienia do wytłoczenia ciała kierunkowego komórek jajowych.
|
w dniu 1
|
Miary wyników drugorzędnych
Miara wyniku |
Opis środka |
Ramy czasowe |
|---|---|---|
|
Analiza cytoszkieletu aktyny i tubuliny w fazie metafazy-II
Ramy czasowe: w dniu 1
|
Oocyty w stadium metafazy II z obu protokołów zostaną użyte do eksperymentów immunofluorescencyjnych w celu wybarwienia aktyny, tubuliny i chromosomów.
Oocyty zostaną zobrazowane za pomocą mikroskopu konfokalnego w celu wykonania obrazowania w wysokiej rozdzielczości i ilościowej analizy obrazu.
Długość, pozycja i orientacja drugiego wrzeciona mejotycznego będzie określana ilościowo.
Sieć aktynowa i chromosomy zostaną przeanalizowane ilościowo.
Wszystkie pomiary zostaną porównane ze świeżymi oocytami Metaphase-II użytymi jako grupa kontrolna.
|
w dniu 1
|
|
Analiza segregacji chromosomów podczas pierwszego podziału mejotycznego.
Ramy czasowe: w dniu 1
|
Pierwszy asymetryczny podział jest bardzo podatny na błędy.
Aby zbadać, czy chromosomy są dokładnie segregowane po witryfikacji, przeprowadzimy hybrydyzację fluorescencyjną in situ, aby pomalować każdy chromosom po rozprzestrzenieniu chromosomu z oocytów w stadium metafazy II z obu warunków
|
w dniu 1
|
|
Analiza rozmieszczenia ziarnistości korowych w oocytach w stadium metafazy-II.
Ramy czasowe: w dniu 1
|
Barwienie lektyną zostanie użyte do oznaczenia ziarnistości korowych dojrzałych oocytów z obu protokołów w celu zaobserwowania, czy witryfikacja modyfikuje ich rozkład przestrzenny.
Aby przeanalizować to zabarwienie, użyjemy ilościowej metody analizy obrazu.
|
w dniu 1
|
|
Analiza stabilności czynników matczynych.
Ramy czasowe: w dniu 1
|
Czynniki matczyne przechowywane w cytoplazmie oocytu podczas oogenezy jako białka i transkrypty są niezbędne dla wczesnego rozwoju embrionalnego.
Aby dowiedzieć się, czy w wyniku procedury witryfikacji zasoby czynników matczynych są zmniejszone, przeprowadzimy odwrotną transkrypcję połączoną z PCR w czasie rzeczywistym w celu ilościowego określenia ilości transkryptów genów kandydujących wybranych z baz danych ludzkich oocytów.
|
w dniu 1
|
Współpracownicy i badacze
Tutaj znajdziesz osoby i organizacje zaangażowane w to badanie.
Współpracownicy
Daty zapisu na studia
Daty te śledzą postęp w przesyłaniu rekordów badań i podsumowań wyników do ClinicalTrials.gov. Zapisy badań i zgłoszone wyniki są przeglądane przez National Library of Medicine (NLM), aby upewnić się, że spełniają określone standardy kontroli jakości, zanim zostaną opublikowane na publicznej stronie internetowej.
Główne daty studiów
Rozpoczęcie studiów (Rzeczywisty)
1 stycznia 2017
Zakończenie podstawowe (Rzeczywisty)
1 stycznia 2018
Ukończenie studiów (Oczekiwany)
31 grudnia 2019
Daty rejestracji na studia
Pierwszy przesłany
24 stycznia 2018
Pierwszy przesłany, który spełnia kryteria kontroli jakości
24 stycznia 2018
Pierwszy wysłany (Rzeczywisty)
31 stycznia 2018
Aktualizacje rekordów badań
Ostatnia wysłana aktualizacja (Rzeczywisty)
1 lutego 2018
Ostatnia przesłana aktualizacja, która spełniała kryteria kontroli jakości
31 stycznia 2018
Ostatnia weryfikacja
1 stycznia 2018
Więcej informacji
Terminy związane z tym badaniem
Słowa kluczowe
Inne numery identyfikacyjne badania
- CHU-372
Informacje o lekach i urządzeniach, dokumenty badawcze
Bada produkt leczniczy regulowany przez amerykańską FDA
Nie
Bada produkt urządzenia regulowany przez amerykańską FDA
Nie
Te informacje zostały pobrane bezpośrednio ze strony internetowej clinicaltrials.gov bez żadnych zmian. Jeśli chcesz zmienić, usunąć lub zaktualizować dane swojego badania, skontaktuj się z register@clinicaltrials.gov. Gdy tylko zmiana zostanie wprowadzona na stronie clinicaltrials.gov, zostanie ona automatycznie zaktualizowana również na naszej stronie internetowej .