체외 성숙 전후의 유리화 효과 비교
2018년 1월 31일 업데이트: University Hospital, Clermont-Ferrand
암 진단을 받은 환자의 가임력 보존 방법의 특성 규명
인간 난자 동결 보존은 암 치료의 성선 독성 효과에 노출될 여성의 생식력 보존을 위해 일상적으로 사용됩니다. 난소 자극 후 성숙한 난모세포는 유리화됩니다. 그러나 이 전략은 특히 호르몬에 민감한 암이나 난소 자극이 가능하지 않은 경우 항상 사용할 수 있는 것은 아닙니다. 이러한 경우 미성숙 난모세포 및 체외 성숙(IVM)을 포함한 접근 방식을 고려할 수 있습니다. IVM 전후에 유리화된 난모세포의 일부 정성 분석은 유리화가 IVM 후에 수행되어야 한다고 제안하지만 액틴 및 튜불린 세포골격에 대한 유리화 효과와 인간 난자 성숙의 동역학에 대해서는 거의 알려져 있지 않습니다.
이 질문에 답하기 위해 연구원은 IVM 전 또는 IVM 후 유리화된 난모세포와 유리화되지 않은 난모세포의 세 가지 다른 그룹의 성숙한 난모세포를 비교하는 정량 분석을 수행했습니다. 비유리화 성숙 난모세포를 대조군으로 사용하였다. 성숙 동안 및 성숙한 난모세포에서 다양한 매개변수가 분석되었습니다.
연구 개요
상세 설명
ICSI를 받은 환자(자궁내막증, 다낭성 증후군 또는 기타 배란성 질환이 없는 37세 이하)로부터 미성숙 난모세포를 채취했습니다.
또한, 암 진단을 받은 환자로부터 채취한 미성숙 난자도 본 연구에 포함될 예정입니다.
난모세포는 IVM 배지로 시험관 내에서 성숙되었고 폐쇄 시스템("Vitrolife")에서 유리화되었습니다.
성숙의 동역학은 Primovision("Vitrolife") 및 액틴으로 분석하였고, 스핀들 조직은 현미경, 면역염색 기술 및 정량 분석으로 연구하였다.
연구 유형
관찰
등록 (예상)
100
연락처 및 위치
이 섹션에서는 연구를 수행하는 사람들의 연락처 정보와 이 연구가 수행되는 장소에 대한 정보를 제공합니다.
연구 장소
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Clermont-Ferrand, 프랑스, 63003
- 모병
- Chu Clermont-Ferrand
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부수사관:
- Aïcha METCHAT
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참여기준
연구원은 적격성 기준이라는 특정 설명에 맞는 사람을 찾습니다. 이러한 기준의 몇 가지 예는 개인의 일반적인 건강 상태 또는 이전 치료입니다.
자격 기준
공부할 수 있는 나이
18년 (성인)
건강한 자원 봉사자를 받아들입니다
예
연구 대상 성별
여성
샘플링 방법
비확률 샘플
연구 인구
여성
설명
포함 기준:
- - ICSI 처리
- 미성숙 난모세포
- 37세 미만
제외 기준:
- - 다발성 난소 증후군
- 자궁내막증
- 배란기 질환
공부 계획
이 섹션에서는 연구 설계 방법과 연구가 측정하는 내용을 포함하여 연구 계획에 대한 세부 정보를 제공합니다.
연구는 어떻게 설계됩니까?
디자인 세부사항
코호트 및 개입
그룹/코호트 |
개입 / 치료 |
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체외 성숙 전에 유리화된 미성숙 난모세포
미성숙 난모세포는 폐쇄 시스템 유리화를 사용하여 유리화되었습니다.
가온 후 IVM 배지에서 36시간 동안 배양하고 세포 분석을 위해 고정
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ICSI를 받은 환자(자궁내막증, 다낭성 증후군 또는 기타 배란성 질환이 없는 37세 이하)로부터 미성숙 난모세포를 채취했습니다.
또한, 암 진단을 받은 환자로부터 채취한 미성숙 난자도 본 연구에 포함될 예정입니다.
난모세포는 IVM 배지로 체외에서 성숙되었고 폐쇄 시스템(Vitrolife)에서 유리화되었습니다.
성숙의 동역학은 Primovision(Vitrolife)과 액틴으로 분석하였고 방추 조직은 현미경, 면역염색법 및 정량분석으로 연구하였다.
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유리화 전에 체외에서 배양된 미성숙 난모세포
미성숙 난모세포를 IVM 배지에서 36시간 동안 체외 배양하였다.
IVM 후 유리화되었습니다.
가온 후 세포 분석을 위해 고정되었습니다.
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ICSI를 받은 환자(자궁내막증, 다낭성 증후군 또는 기타 배란성 질환이 없는 37세 이하)로부터 미성숙 난모세포를 채취했습니다.
또한, 암 진단을 받은 환자로부터 채취한 미성숙 난자도 본 연구에 포함될 예정입니다.
난모세포는 IVM 배지로 체외에서 성숙되었고 폐쇄 시스템(Vitrolife)에서 유리화되었습니다.
성숙의 동역학은 Primovision(Vitrolife)과 액틴으로 분석하였고 방추 조직은 현미경, 면역염색법 및 정량분석으로 연구하였다.
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신선한 난자
미성숙 난모세포를 IVM 배지에서 36시간 동안 체외 배양한 후 세포 분석을 위해 고정하였다.
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ICSI를 받은 환자(자궁내막증, 다낭성 증후군 또는 기타 배란성 질환이 없는 37세 이하)로부터 미성숙 난모세포를 채취했습니다.
또한, 암 진단을 받은 환자로부터 채취한 미성숙 난자도 본 연구에 포함될 예정입니다.
난모세포는 IVM 배지로 체외에서 성숙되었고 폐쇄 시스템(Vitrolife)에서 유리화되었습니다.
성숙의 동역학은 Primovision(Vitrolife)과 액틴으로 분석하였고 방추 조직은 현미경, 면역염색법 및 정량분석으로 연구하였다.
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연구는 무엇을 측정합니까?
주요 결과 측정
결과 측정 |
측정값 설명 |
기간 |
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신선한 난모세포와 비교하여 Prophase-I 단계에서 유리화된 난모세포의 성숙 동역학 분석
기간: 1일차에
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난모세포 회수 후, 미성숙 난모세포는 폐쇄 시스템(Rapid-I®, Vitrolife)에서 유리화되고(Rapid Vit Ovocyte®, Vitrolife) 며칠 후 체외 성숙을 위해 해동됩니다.
감수 분열 과정은 시간 경과 기술(Primovision®, Vitrolife)로 분석됩니다.
이것은 재개에서 난모세포의 극체 압출까지의 성숙 시간을 점수화하는 것을 허용할 것입니다.
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1일차에
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2차 결과 측정
결과 측정 |
측정값 설명 |
기간 |
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중기-II 단계에서의 액틴 및 튜불린 세포골격 분석
기간: 1일차에
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두 프로토콜의 중기-II 단계 난모세포는 액틴, 튜불린 및 염색체를 염색하기 위한 면역 형광 실험에 사용됩니다.
난모세포는 고해상도 이미징 및 정량적 이미지 분석을 수행하기 위해 공초점 현미경을 사용하여 이미지화됩니다.
두 번째 감수 분열 방추의 길이, 위치 및 방향이 정량화됩니다.
액틴 네트워크와 염색체를 정량적으로 분석합니다.
모든 측정값은 대조군으로 사용되는 신선한 Metaphase-II 난모세포와 비교됩니다.
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1일차에
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제1감수분열 동안의 염색체 분리 분석.
기간: 1일차에
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첫 번째 비대칭 분할은 오류가 발생하기 쉽습니다.
유리화 후 염색체가 정확하게 분리되는지 조사하기 위해 두 조건 모두에서 Metaphase-II stage oocytes에서 염색체 확산 후 Fluorescence In Situ Hybridization을 수행하여 각 염색체를 칠합니다.
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1일차에
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중기 2기 난모세포의 피질과립 분포 분석.
기간: 1일차에
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Lectin을 사용한 염색은 유리화가 공간 분포를 수정하는지 여부를 관찰하기 위해 두 프로토콜 모두에서 성숙한 난모세포의 피질 과립을 표시하는 데 사용됩니다.
이 염색을 분석하기 위해 정량적 이미지 분석 방법을 사용합니다.
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1일차에
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모성 요인 안정성 분석.
기간: 1일차에
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단백질 및 전사물로서 난자 형성 동안 난자 세포질에 저장된 모성 인자는 초기 배아 발달에 필수적입니다.
모계 요인의 스톡이 유리화 절차에 의해 감소되는지 알기 위해 Real Time PCR과 결합된 역전사를 수행하여 인간 난모세포 데이터베이스에서 선택된 후보 유전자의 전사량을 정량화합니다.
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1일차에
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공동 작업자 및 조사자
여기에서 이 연구와 관련된 사람과 조직을 찾을 수 있습니다.
연구 기록 날짜
이 날짜는 ClinicalTrials.gov에 대한 연구 기록 및 요약 결과 제출의 진행 상황을 추적합니다. 연구 기록 및 보고된 결과는 공개 웹사이트에 게시되기 전에 특정 품질 관리 기준을 충족하는지 확인하기 위해 국립 의학 도서관(NLM)에서 검토합니다.
연구 주요 날짜
연구 시작 (실제)
2017년 1월 1일
기본 완료 (실제)
2018년 1월 1일
연구 완료 (예상)
2019년 12월 31일
연구 등록 날짜
최초 제출
2018년 1월 24일
QC 기준을 충족하는 최초 제출
2018년 1월 24일
처음 게시됨 (실제)
2018년 1월 31일
연구 기록 업데이트
마지막 업데이트 게시됨 (실제)
2018년 2월 1일
QC 기준을 충족하는 마지막 업데이트 제출
2018년 1월 31일
마지막으로 확인됨
2018년 1월 1일
추가 정보
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