Vergelijking van vitrificatie-effect voor of na in vitro rijping
31 januari 2018 bijgewerkt door: University Hospital, Clermont-Ferrand
Karakterisering van een methode voor vruchtbaarheidsbehoud voor patiënten bij wie kanker is vastgesteld
Cryopreservatie van menselijke eicellen wordt routinematig gebruikt voor het behoud van de vruchtbaarheid van vrouwen die zullen worden blootgesteld aan het gonadotoxische effect van kankerbehandeling. Na ovariële stimulatie worden gerijpte eicellen verglaasd. Deze strategie kan echter niet altijd worden gebruikt, met name bij hormoongevoelige kanker of wanneer stimulatie van de eierstokken niet mogelijk is. In deze gevallen kan een aanpak met onrijpe eicellen en in vitro rijping (IVM) worden overwogen. Hoewel sommige kwalitatieve analyses van oöcyten die vóór of na IVM zijn verglaasd, suggereren dat vitrificatie na IVM moet worden uitgevoerd, is er weinig bekend over vitrificatie-effecten op het actine- en tubulinecytoskelet en de kinetiek van rijping van menselijke eicellen.
Om deze vraag te beantwoorden voerde Investigator kwantitatieve analyses uit waarbij gerijpte eicellen uit drie verschillende groepen werden vergeleken: verglaasde eicellen vóór IVM of na IVM en niet-verglaasde eicellen. Niet-verglaasde gerijpte oöcyten werden als controle gebruikt. Verschillende parameters zijn geanalyseerd tijdens rijping en in gerijpte oöcyten.
Studie Overzicht
Toestand
Onbekend
Interventie / Behandeling
Gedetailleerde beschrijving
Onrijpe eicellen werden verzameld van patiënten (≤37 jaar oud, zonder endometriose, polycysteus syndroom of andere ovulatoire ziekte) die ICSI ondergingen.
Bovendien zullen onrijpe eicellen die zijn verzameld van patiënten met de diagnose kanker, in deze studie worden opgenomen.
Eicellen werden in vitro gerijpt met IVM-medium en verglaasd in een gesloten systeem ("Vitrolife").
Kinetiek van rijping werd geanalyseerd door Primovision ("Vitrolife") en actine, en spilorganisatie werden bestudeerd door microscopie, immunokleuringstechnieken en kwantitatieve analyse.
Studietype
Observationeel
Inschrijving (Verwacht)
100
Contacten en locaties
In dit gedeelte vindt u de contactgegevens van degenen die het onderzoek uitvoeren en informatie over waar dit onderzoek wordt uitgevoerd.
Studie Locaties
-
-
-
Clermont-Ferrand, Frankrijk, 63003
- Werving
- Chu Clermont-Ferrand
-
Onderonderzoeker:
- Aïcha METCHAT
-
-
Deelname Criteria
Onderzoekers zoeken naar mensen die aan een bepaalde beschrijving voldoen, de zogenaamde geschiktheidscriteria. Enkele voorbeelden van deze criteria zijn iemands algemene gezondheidstoestand of eerdere behandelingen.
Geschiktheidscriteria
Leeftijden die in aanmerking komen voor studie
18 jaar tot 37 jaar (Volwassen)
Accepteert gezonde vrijwilligers
Ja
Geslachten die in aanmerking komen voor studie
Vrouw
Bemonsteringsmethode
Niet-waarschijnlijkheidssteekproef
Studie Bevolking
vrouwelijk
Beschrijving
Inclusiecriteria:
- - ICSI-behandeling
- Onrijpe eicellen
- < 37 jaar oud
Uitsluitingscriteria:
- - Polyckistisch ovariumsyndroom
- Endometriose
- Ovulatoire ziekte
Studie plan
Dit gedeelte bevat details van het studieplan, inclusief hoe de studie is opgezet en wat de studie meet.
Hoe is de studie opgezet?
Ontwerpdetails
Cohorten en interventies
Groep / Cohort |
Interventie / Behandeling |
|---|---|
|
Onrijpe eicellen verglaasd vóór in vitro rijping
Onrijpe oöcyten werden verglaasd met behulp van vitrificatie in een gesloten systeem.
Na opwarming werden ze gedurende 36 uur gekweekt in IVM-medium en gefixeerd voor cellulaire analyse
|
Onrijpe eicellen werden verzameld van patiënten (≤37 jaar oud, zonder endometriose, polycysteus syndroom of andere ovulatoire ziekte) die ICSI ondergingen.
Bovendien zullen onrijpe eicellen die zijn verzameld van patiënten met de diagnose kanker, in deze studie worden opgenomen.
Eicellen werden in vitro gerijpt met IVM-medium en verglaasd in een gesloten systeem (Vitrolife).
Kinetiek van rijping werd geanalyseerd door Primovision (Vitrolife) en actine, en spindelorganisatie werd bestudeerd door microscopie, immunokleuringstechnieken en kwantitatieve analyse.
|
|
Onrijpe oöcyten in vitro gekweekt vóór vitrificatie
Onrijpe oöcyten werden gedurende 36 uur in vitro in IVM-medium gekweekt.
Na IVM werden ze verglaasd.
Na opwarming werden ze gefixeerd voor cellulaire analyse.
|
Onrijpe eicellen werden verzameld van patiënten (≤37 jaar oud, zonder endometriose, polycysteus syndroom of andere ovulatoire ziekte) die ICSI ondergingen.
Bovendien zullen onrijpe eicellen die zijn verzameld van patiënten met de diagnose kanker, in deze studie worden opgenomen.
Eicellen werden in vitro gerijpt met IVM-medium en verglaasd in een gesloten systeem (Vitrolife).
Kinetiek van rijping werd geanalyseerd door Primovision (Vitrolife) en actine, en spindelorganisatie werd bestudeerd door microscopie, immunokleuringstechnieken en kwantitatieve analyse.
|
|
Verse eicellen
Onrijpe oöcyten werden gedurende 36 uur in vitro in IVM-medium gekweekt en vervolgens gefixeerd voor cellulaire analyse.
|
Onrijpe eicellen werden verzameld van patiënten (≤37 jaar oud, zonder endometriose, polycysteus syndroom of andere ovulatoire ziekte) die ICSI ondergingen.
Bovendien zullen onrijpe eicellen die zijn verzameld van patiënten met de diagnose kanker, in deze studie worden opgenomen.
Eicellen werden in vitro gerijpt met IVM-medium en verglaasd in een gesloten systeem (Vitrolife).
Kinetiek van rijping werd geanalyseerd door Primovision (Vitrolife) en actine, en spindelorganisatie werd bestudeerd door microscopie, immunokleuringstechnieken en kwantitatieve analyse.
|
Wat meet het onderzoek?
Primaire uitkomstmaten
Uitkomstmaat |
Maatregel Beschrijving |
Tijdsspanne |
|---|---|---|
|
Analyse van de rijpingskinetiek van eicellen verglaasd in het Profase-I-stadium in vergelijking met verse eicellen
Tijdsspanne: op dag 1
|
Na het ophalen van de eicellen worden onrijpe eicellen verglaasd (Rapid Vit Ovocyte®, Vitrolife) in een gesloten systeem (Rapid-I®, Vitrolife) en enkele dagen daarna ontdooid voor in vitro rijping.
Het meiotische proces zal worden geanalyseerd door middel van time-lapse-technologie (Primovision®, Vitrolife).
Dit zal het mogelijk maken om de tijd van rijping te scoren vanaf hervatting tot extrusie van eicellen in het poollichaam.
|
op dag 1
|
Secundaire uitkomstmaten
Uitkomstmaat |
Maatregel Beschrijving |
Tijdsspanne |
|---|---|---|
|
Analyse van actine en tubuline cytoskelet in het metafase-II-stadium
Tijdsspanne: op dag 1
|
Eicellen in het metafase-II-stadium van beide protocollen zullen worden gebruikt voor immunofluorescentie-experimenten om actine, tubuline en chromosomen te kleuren.
Oöcyten zullen worden afgebeeld met behulp van een confocale microscoop om beeldvorming met hoge resolutie en kwantitatieve beeldanalyse uit te voeren.
De lengte, positie en oriëntatie van de tweede meiotische spil zullen worden gekwantificeerd.
Het actinenetwerk en de chromosomen zullen kwantitatief geanalyseerd worden.
Alle metingen zullen worden vergeleken met verse Metaphase-II-oöcyten die als controlegroep worden gebruikt.
|
op dag 1
|
|
Analyse van chromosoomscheiding tijdens de eerste meiotische deling.
Tijdsspanne: op dag 1
|
De eerste asymmetrische deling is zeer foutgevoelig.
Om te onderzoeken of chromosomen nauwkeurig gescheiden zijn na vitrificatie, zullen we Fluorescentie In Situ Hybridisatie uitvoeren om elk chromosoom te schilderen na chromosoomspreiding van metafase-II-stadium eicellen van beide aandoeningen
|
op dag 1
|
|
Analyse van de verdeling van corticale korrels in eicellen in het metafase-II-stadium.
Tijdsspanne: op dag 1
|
Een kleuring met lectine zal worden gebruikt om corticale korrels van gerijpte oöcyten uit beide protocollen te markeren om te observeren of de vitrificatie hun ruimtelijke verdeling verandert.
Om deze kleuring te analyseren, gebruiken we de kwantitatieve beeldanalysemethode.
|
op dag 1
|
|
Analyse van maternale factorstabiliteiten.
Tijdsspanne: op dag 1
|
Maternale factoren opgeslagen in het oöcytcytoplasma tijdens oögenese als eiwitten en transcripten zijn essentieel voor de vroege embryonale ontwikkeling.
Om te weten of de voorraad maternale factoren verminderd is door de vitrificatieprocedure, zullen we omgekeerde transcriptie uitvoeren in combinatie met real-time PCR om transcripthoeveelheden te kwantificeren van kandidaat-genen geselecteerd uit databases van menselijke eicellen.
|
op dag 1
|
Medewerkers en onderzoekers
Hier vindt u mensen en organisaties die betrokken zijn bij dit onderzoek.
Medewerkers
Studie record data
Deze datums volgen de voortgang van het onderzoeksdossier en de samenvatting van de ingediende resultaten bij ClinicalTrials.gov. Studieverslagen en gerapporteerde resultaten worden beoordeeld door de National Library of Medicine (NLM) om er zeker van te zijn dat ze voldoen aan specifieke kwaliteitscontrolenormen voordat ze op de openbare website worden geplaatst.
Bestudeer belangrijke data
Studie start (Werkelijk)
1 januari 2017
Primaire voltooiing (Werkelijk)
1 januari 2018
Studie voltooiing (Verwacht)
31 december 2019
Studieregistratiedata
Eerst ingediend
24 januari 2018
Eerst ingediend dat voldeed aan de QC-criteria
24 januari 2018
Eerst geplaatst (Werkelijk)
31 januari 2018
Updates van studierecords
Laatste update geplaatst (Werkelijk)
1 februari 2018
Laatste update ingediend die voldeed aan QC-criteria
31 januari 2018
Laatst geverifieerd
1 januari 2018
Meer informatie
Termen gerelateerd aan deze studie
Andere studie-ID-nummers
- CHU-372
Informatie over medicijnen en apparaten, studiedocumenten
Bestudeert een door de Amerikaanse FDA gereguleerd geneesmiddel
Nee
Bestudeert een door de Amerikaanse FDA gereguleerd apparaatproduct
Nee
Deze informatie is zonder wijzigingen rechtstreeks van de website clinicaltrials.gov gehaald. Als u verzoeken heeft om uw onderzoeksgegevens te wijzigen, te verwijderen of bij te werken, neem dan contact op met register@clinicaltrials.gov. Zodra er een wijziging wordt doorgevoerd op clinicaltrials.gov, wordt deze ook automatisch bijgewerkt op onze website .