Cf-DNA-analys under behandling av akut avstötning

Betydelsen av forskningsfrågan/syftet:

En njurtransplantationsbiopsi är guldstandarden för att ställa en diagnos vid tidpunkten för transplantatdysfunktion. Det finns dock risker förknippade med en transplantationsbiopsi (t.ex. hematuri, blodproppar i uppsamlingssystemet, blödning, hematom i njuren, urinläckage och sällan förlust av AKI och/eller transplantat). Nyligen har ett blodprov tagits fram som särskiljer donator och mottagare cirkulerande cf-DNA. Med denna metod förstärks cirkulerande cf-DNA, och sedan med en panel av markörer kan 2 DNA-toppar observeras - en hög topp för mottagar-DNA och en mycket låg topp för givaren (viktigt, detta är inte genetisk testning; endast höga och låga toppar identifieras). När cf-DNA mäts vid tidpunkten för en njurbiopsi för transplantatdysfunktion, kan en förhöjd donator cf-DNA-nivå - jämfört med den som ses i en kohort utan inflammation - ses hos mottagare med en akut avstötningsepisod (AR). Data, hittills, tyder på att om >1% av cf-DNA härrör från donator, finns det sannolikt transplantatinflammation.

För närvarande pågår studier för att avgöra om sekventiell mätning av cf-DNA hos samma mottagare kommer att visa förhöjda donator-cf-DNA-nivåer tidigare än en serumkreatininhöjning, vilket potentiellt möjliggör tidigare upptäckt och behandling av AR-episoder.

Serumkreatininnivå används som en markör för framgångsrik behandling av en akut avstötningsepisod. Kreatininnivån är emellertid en okänslig markör för svar på behandling av både cellulär och antikroppsmedierad avstötning. Studier där biopsier görs i slutet av "förmodat" framgångsrik avstötningsbehandling visar att vissa patienter vars kreatininnivå återgått till baslinjen har pågående inflammation. Om inte ytterligare behandling mot avstötning ges leder denna ofullständiga behandling till ökad risk för donatorspecifik antikroppsbildning och transplantatsvikt.

Som en konsekvens gör utredarna (U of MN Kidney Transplant Program) nu rutinmässiga "exit"-biopsier för patienter som behandlas för akuta avstötningsepisoder och vars serumkreatininnivå återgår till baslinjen. Utredarna har alltid gjort biopsier på patienter vars kreatininnivåer inte återgick till baslinjen. "Exit"-biopsien görs vid ~6 veckor efter avslutad avstötningsbehandling. Om exitbiopsi visar pågående inflammation övervägs ytterligare avstötningsbehandling.

Det skulle vara idealiskt att ha en icke-invasiv markör för framgångsrik avstötningsbehandling. Syftet med denna studie är att avgöra om mätning av cellfritt DNA (cf-DNA) kan användas som en biomarkör för framgångsrik behandling av en akut avstötningsepisod (AR) efter njurtransplantation.

Tillägget av cf-DNA-testning skulle ha två potentiella fördelar:

1. Serumkreatinin kan återgå till baslinjen (nivå före avstötning), men pågående allotransplantatskada kan inträffa eftersom kreatinin är en okänslig markör för subtil allotransplantatdysfunktion. Denna inflammation är känd för att skapa antigenisk presentation som resulterar i DSA-produktion som är huvudorsaken till långvarig förlust av allotransplantat
2. Serumkreatinin kanske inte återgår till baslinjen eftersom det finns irreparabel förlust av allotransplantat eller intensifiering av CNI-dosering. Detta skulle resultera i en biopsi som inte förändrar hanteringen, men som skulle försätta patienten genom ett onödigt och potentiellt skadligt ingrepp. Om en icke-invasiv markör minskar med behandlingen och korrelerar med fullständig upplösning av avstötningsepisoden, skulle detta vara användbart för övervakningsändamål.

Preliminär information:

1. University of MN Transplant Program deltog i de ursprungliga studierna som visade ett samband mellan cf-DNA och akut avstötning. Utredarna har erfarenhet av metodiken och av att arbeta med företaget som gör cf-DNA-analysen
2. Sedan de började göra exitbiopsier har utredarna, liksom andra, funnit att vissa patienter med förmodad framgångsrik avstötningsbehandling har bevis på pågående inflammation i biopsien.