Анализ Cf-ДНК во время лечения острого отторжения

Значение вопроса/цели исследования:

Биопсия почечного трансплантата является золотым стандартом для постановки диагноза во время дисфункции трансплантата. Однако существуют риски, связанные с биопсией трансплантата (например, гематурия, сгустки в чашечно-лоханочной системе, кровотечение, гематома в почке, подтекание мочи и, в редких случаях, ОПП и/или потеря трансплантата). Недавно был разработан анализ крови, который различает циркулирующую вк-ДНК донора и реципиента. С помощью этой методики амплифицируют циркулирующую вк-ДНК, затем с помощью панели маркеров можно наблюдать 2 пика ДНК - высокий пик ДНК реципиента и очень низкий пик ДНК донора (важно, что это не генетическое тестирование, а только выделяются высокие и низкие пики). Когда вк-ДНК измеряют во время биопсии почки на предмет дисфункции трансплантата, у реципиентов с эпизодом острого отторжения (АР) можно увидеть повышенный уровень вк-ДНК донора по сравнению с таковым в когорте без воспаления. Имеющиеся на сегодняшний день данные свидетельствуют о том, что если > 1% вк-ДНК происходит от донора, вероятно воспаление трансплантата.

В настоящее время продолжаются исследования, чтобы определить, будет ли последовательное измерение вк-ДНК у одного и того же реципиента показывать повышенные уровни вк-ДНК донора раньше, чем повышение сывороточного креатинина, что потенциально позволит более раннее выявление и лечение эпизодов АР.

Уровень креатинина в сыворотке используется в качестве маркера успешного лечения эпизода острого отторжения. Однако уровень креатинина является нечувствительным маркером ответа на лечение как клеточного, так и антитело-опосредованного отторжения. Исследования, в которых биопсия проводится в конце «предположительно» успешного лечения отторжения, показывают, что у некоторых пациентов, у которых уровень креатинина вернулся к исходному уровню, наблюдается продолжающееся воспаление. Если не проводится дополнительное лечение против отторжения, это неполное лечение приводит к повышенному риску образования донор-специфических антител и отторжения трансплантата.

Как следствие, исследователи (Программа трансплантации почки Университета штата Миннесота) в настоящее время проводят рутинную «выходную» биопсию у пациентов, получавших лечение по поводу эпизодов острого отторжения и у которых уровень креатинина в сыворотке возвращается к исходному уровню. Исследователи всегда проводили биопсию у пациентов, у которых уровень креатинина не возвращался к исходному уровню. «Выходная» биопсия проводится примерно через 6 недель после завершения лечения отторжения. Если биопсия на выходе показывает продолжающееся воспаление, рассматривается возможность дополнительного лечения отторжения.

Было бы идеально иметь неинвазивный маркер для успешного лечения отторжения. Целью данного исследования является определение того, можно ли использовать измерение внеклеточной ДНК (вк-ДНК) в качестве биомаркера для успешного лечения эпизода острого отторжения (ОР) после трансплантации почки.

Добавление тестирования cf-ДНК может иметь два потенциальных преимущества:

1. Креатинин сыворотки может вернуться к исходному уровню (уровень до отторжения), но может иметь место продолжающееся повреждение аллотрансплантата, поскольку креатинин является нечувствительным маркером тонкой дисфункции аллотрансплантата. Известно, что это воспаление создает антигенную презентацию, что приводит к продукции DSA, что является основной причиной долгосрочной потери аллотрансплантата.
2. Креатинин сыворотки может не вернуться к исходному уровню из-за необратимой потери аллотрансплантата или интенсификации дозировки ИКН. Это приведет к биопсии, которая не изменит тактики лечения, но подвергнет пациента ненужной и потенциально опасной процедуре. Если неинвазивный маркер снижается по мере лечения и коррелирует с полным разрешением эпизода отторжения, это может быть полезно для целей мониторинга.

Предварительные данные:

1. Программа трансплантации Университета штата Миннесота участвовала в оригинальных исследованиях, показывающих связь между вк-ДНК и острым отторжением. Исследователи имеют опыт работы с методологией и работы с компанией, которая проводит анализ вк-ДНК.
2. С тех пор, как исследователи начали проводить биопсию на выходе, исследователи, как и другие, обнаружили, что у некоторых пациентов с предположительно успешным лечением отторжения в биоптатах обнаруживаются признаки продолжающегося воспаления.