Test Cf-DNA podczas leczenia ostrego odrzucenia

Znaczenie pytania badawczego/celu:

Biopsja przeszczepu nerki jest złotym standardem w stawianiu diagnozy w momencie dysfunkcji przeszczepu. Istnieje jednak ryzyko związane z biopsją przeszczepu (np. krwiomocz, zakrzepy w układzie zbiorczym, krwawienie, krwiak w nerce, wyciek moczu i rzadko AKI i/lub utrata przeszczepu). Niedawno opracowano badanie krwi, które rozróżnia krążące cf-DNA dawcy i biorcy. Stosując tę ​​metodologię amplifikuje się krążące cf-DNA, a następnie za pomocą panelu markerów można zaobserwować 2 piki DNA – wysoki pik dla DNA biorcy i bardzo niski pik dla dawcy (co ważne, nie jest to badanie genetyczne; tylko identyfikuje się wysokie i niskie szczyty). Gdy mierzy się cf-DNA w czasie biopsji nerki pod kątem dysfunkcji przeszczepu, u biorców z epizodem ostrego odrzucenia (AR) można zaobserwować podwyższony poziom cf-DNA dawcy – w porównaniu z obserwowanym w kohorcie bez stanu zapalnego. Dotychczasowe dane sugerują, że jeśli >1% cf-DNA pochodzi od dawcy, prawdopodobnie występuje zapalenie przeszczepu.

Obecnie trwają badania mające na celu ustalenie, czy sekwencyjny pomiar cf-DNA u tego samego biorcy wykaże podwyższony poziom cf-DNA dawcy wcześniej niż wzrost kreatyniny w surowicy, co potencjalnie umożliwi wcześniejsze wykrycie i leczenie epizodów ANN.

Stężenie kreatyniny w surowicy jest stosowane jako wskaźnik skutecznego leczenia epizodu ostrego odrzucania przeszczepu. Jednak poziom kreatyniny jest nieczułym wskaźnikiem odpowiedzi na leczenie odrzucania, w którym pośredniczy zarówno komórka, jak i przeciwciała. Badania, w których biopsje są wykonywane pod koniec „zakładanego” pomyślnego leczenia odrzucania, pokazują, że niektórzy pacjenci, u których poziom kreatyniny powrócił do wartości wyjściowych, mają trwający stan zapalny. O ile nie zostanie zastosowane dodatkowe leczenie zapobiegające odrzuceniu przeszczepu, to niekompletne leczenie prowadzi do zwiększonego ryzyka powstania przeciwciał swoistych dla dawcy i niepowodzenia przeszczepu.

W rezultacie badacze (Program przeszczepu nerki U of MN) wykonują obecnie rutynowe biopsje „wyjściowe” u pacjentów leczonych z powodu epizodów ostrego odrzucenia przeszczepu, u których poziom kreatyniny w surowicy powraca do wartości wyjściowych. Badacze zawsze wykonywali biopsje u pacjentów, u których poziom kreatyniny nie powrócił do wartości wyjściowych. Biopsja „wyjściowa” jest wykonywana po około 6 tygodniach od zakończenia leczenia odrzucania. Jeśli biopsja wyjściowa wykaże trwający stan zapalny, rozważa się dodatkowe leczenie odrzucenia.

Idealnie byłoby mieć nieinwazyjny marker do skutecznego leczenia odrzucania. Celem tego badania jest ustalenie, czy pomiar DNA bezkomórkowego (cf-DNA) może być wykorzystany jako biomarker do skutecznego leczenia epizodu ostrego odrzucenia (AR) po przeszczepie nerki.

Dodanie testów cf-DNA przyniosłoby dwie potencjalne korzyści:

1. Stężenie kreatyniny w surowicy może powrócić do wartości wyjściowych (poziom sprzed odrzucenia), ale może dojść do trwającego uszkodzenia alloprzeszczepu, ponieważ kreatynina jest nieczułym markerem subtelnej dysfunkcji alloprzeszczepu. Wiadomo, że to zapalenie tworzy prezentację antygenową, która powoduje wytwarzanie DSA, co jest główną przyczyną długoterminowej utraty alloprzeszczepu
2. Stężenie kreatyniny w surowicy może nie powrócić do wartości wyjściowych z powodu nieodwracalnej utraty alloprzeszczepu lub intensyfikacji dawkowania CNI. Skutkowałoby to wykonaniem biopsji, która nie zmienia postępowania, ale naraziłaby pacjenta na niepotrzebną i potencjalnie szkodliwą procedurę. Jeśli nieinwazyjny marker zmniejsza się wraz z leczeniem i koreluje z całkowitym ustąpieniem epizodu odrzucenia, byłoby to przydatne do celów monitorowania.

Wstępne dane:

1. University of MN Transplant Program uczestniczył w oryginalnych badaniach wykazujących związek między cf-DNA a ostrym odrzuceniem. Badacze mają doświadczenie w zakresie metodologii i współpracy z firmą wykonującą test cf-DNA
2. Od czasu rozpoczęcia wykonywania biopsji wyjściowych, badacze, podobnie jak inni, stwierdzili, że u niektórych pacjentów z przypuszczalnie pomyślnym leczeniem odrzucania, w biopsji widoczne są dowody trwającego stanu zapalnego.