Cf-DNA test během léčby akutní rejekce

Význam výzkumné otázky/účel:

Biopsie transplantované ledviny je zlatým standardem pro stanovení diagnózy v době dysfunkce štěpu. Existují však rizika spojená s biopsií transplantátu (např. hematurie, sraženiny v sběrném systému, krvácení, hematom v ledvině, únik moči a vzácně AKI a/nebo ztráta štěpu). Nedávno byl vyvinut krevní test, který rozlišuje cirkulující cf-DNA dárce a příjemce. Pomocí této metodiky je cirkulující cf-DNA amplifikována, pak pomocí panelu markerů lze pozorovat 2 DNA píky - vysoký pík pro DNA příjemce a velmi nízký pík pro dárce (důležité, nejedná se o genetické testování, pouze jsou identifikovány vysoké a nízké vrcholy). Když je cf-DNA měřena v době biopsie ledviny na dysfunkci štěpu, lze u příjemců s epizodou akutní rejekce (AR) pozorovat zvýšenou hladinu cf-DNA dárce – ve srovnání s hladinou pozorovanou v kohortě bez zánětu. Dosavadní údaje naznačují, že pokud > 1 % cf-DNA pochází od dárce, pravděpodobně se jedná o zánět štěpu.

V současné době probíhají studie, které mají určit, zda sekvenční měření cf-DNA u stejného příjemce ukáže zvýšené hladiny cf-DNA dárce dříve než vzestup sérového kreatininu, což potenciálně umožní dřívější detekci a léčbu epizod AR.

Hladina kreatininu v séru se používá jako marker pro úspěšnou léčbu epizody akutní rejekce. Hladina kreatininu je však necitlivým markerem odpovědi na léčbu rejekce zprostředkované buněčnou i protilátkou. Studie, ve kterých se na konci „předpokládané“ úspěšné rejekce provádějí biopsie, ukazují, že někteří pacienti, jejichž hladina kreatininu se vrátila na výchozí hodnotu, mají pokračující zánět. Pokud není podána další léčba proti rejekci, tato neúplná léčba vede ke zvýšenému riziku tvorby protilátek specifických pro dárce a selhání štěpu.

V důsledku toho vyšetřovatelé (U of MN Kidney Transplant Programme) nyní provádějí rutinní „výstupní“ biopsie u pacientů léčených pro epizody akutní rejekce a jejichž hladina kreatininu v séru se vrací na výchozí hodnotu. Výzkumníci vždy prováděli biopsie u pacientů, jejichž hladina kreatininu se nevrátila na výchozí hodnotu. "Výstupní" biopsie se provádí přibližně 6 týdnů po dokončení léčby odmítnutím. Pokud výstupní biopsie prokáže pokračující zánět, zvažuje se další léčba rejekce.

Ideální by bylo mít neinvazivní marker pro úspěšnou léčbu rejekce. Cílem této studie je zjistit, zda měření bezbuněčné DNA (cf-DNA) lze použít jako biomarker pro úspěšnou léčbu epizody akutní rejekce (AR) po transplantaci ledviny.

Přidání testování cf-DNA by mělo dvě potenciální výhody:

1. Sérový kreatinin se může vrátit na výchozí hodnotu (úroveň před odmítnutím), ale může dojít k pokračujícímu poškození aloštěpu, protože kreatinin je necitlivý marker jemné dysfunkce aloštěpu. Je známo, že tento zánět vytváří antigenní prezentaci, která vede k produkci DSA, což je hlavní příčinou dlouhodobé ztráty aloštěpu
2. Sérový kreatinin se nemusí vrátit na výchozí hodnoty, protože dochází k nenapravitelné ztrátě aloštěpu nebo intenzifikaci dávkování CNI. To by vedlo k biopsii, která by nezměnila léčbu, ale pacienta by podrobila zbytečnému a potenciálně škodlivému postupu. Pokud se neinvazivní marker s léčbou snižuje a koreluje s úplným vymizením epizody rejekce, bylo by to užitečné pro účely monitorování.

Předběžné údaje:

1. Transplantační program University of MN se podílel na původních studiích ukazujících souvislost mezi cf-DNA a akutní rejekcí. Vyšetřovatelé mají zkušenosti s metodikou a se spoluprací se společností, která provádí analýzu cf-DNA
2. Od zahájení výstupních biopsií vyšetřovatelé, stejně jako jiní, zjistili, že někteří pacienti s předpokládanou úspěšnou rejekcí mají důkazy o probíhajícím zánětu pozorovaném v biopsii.