Saggio Cf-DNA durante il trattamento del rigetto acuto

Significato della domanda/scopo della ricerca:

Una biopsia del trapianto di rene è il gold standard per fare una diagnosi al momento della disfunzione del trapianto. Tuttavia, ci sono rischi associati a una biopsia del trapianto (ad esempio, ematuria, coaguli all'interno del sistema collettore, sanguinamento, ematoma all'interno del rene, perdita di urina e raramente AKI e/o perdita del trapianto). Recentemente è stato sviluppato un esame del sangue che distingue il cf-DNA circolante tra donatore e ricevente. Usando questa metodologia, il cf-DNA circolante viene amplificato, quindi usando un pannello di marcatori, si possono osservare 2 picchi di DNA - un picco alto per il DNA del ricevente e un picco molto basso per il donatore (cosa importante, questo non è un test genetico; solo vengono identificati i picchi alti e bassi). Quando il cf-DNA viene misurato al momento di una biopsia renale per la disfunzione del trapianto, nei riceventi con un episodio di rigetto acuto (AR) si può osservare un livello elevato di cf-DNA del donatore rispetto a quello osservato in una coorte senza infiammazione. I dati, fino ad oggi, suggeriscono che se> 1% di cf-DNA è derivato da donatore, è probabile che vi sia un'infiammazione dell'innesto.

Attualmente, sono in corso studi per determinare se la misurazione sequenziale del cf-DNA nello stesso ricevente mostrerà livelli elevati di cf-DNA del donatore prima di un aumento della creatinina sierica, consentendo così potenzialmente il rilevamento e il trattamento precedenti degli episodi AR.

Il livello di creatinina sierica viene utilizzato come marker per il trattamento efficace di un episodio di rigetto acuto. Tuttavia, il livello di creatinina è un marker insensibile di risposta al trattamento del rigetto mediato sia cellulare che anticorpale. Gli studi in cui le biopsie vengono eseguite alla fine del "presunto" trattamento di rigetto riuscito mostrano che alcuni pazienti il ​​cui livello di creatinina è tornato al basale hanno un'infiammazione in corso. A meno che non venga somministrato un ulteriore trattamento anti-rigetto, questo trattamento incompleto comporta un aumento del rischio di formazione di anticorpi specifici del donatore e fallimento del trapianto.

Di conseguenza, i ricercatori (l'U of MN Kidney Transplant Program) stanno ora eseguendo biopsie di "uscita" di routine per i pazienti trattati per episodi di rigetto acuto e il cui livello di creatinina sierica ritorna al basale. I ricercatori hanno sempre eseguito biopsie in pazienti il ​​​​cui livello di creatinina non è tornato al basale. La biopsia di "uscita" viene eseguita circa 6 settimane dopo il completamento del trattamento del rigetto. Se la biopsia d'uscita mostra un'infiammazione in corso, viene preso in considerazione un ulteriore trattamento di rigetto.

L'ideale sarebbe avere un marcatore non invasivo per il successo del trattamento del rigetto. L'obiettivo di questo studio è determinare se la misurazione del DNA libero da cellule (cf-DNA) può essere utilizzata come biomarcatore per il trattamento efficace di un episodio di rigetto acuto (AR) dopo il trapianto di rene.

L'aggiunta del test cf-DNA avrebbe due potenziali vantaggi:

1. La creatinina sierica può tornare al basale (livello pre-rigetto), ma può verificarsi un danno dell'allotrapianto in corso poiché la creatinina è un marker insensibile della disfunzione sottile dell'allotrapianto. È noto che questa infiammazione crea una presentazione antigenica che si traduce nella produzione di DSA, che è la causa principale della perdita di allotrapianto a lungo termine
2. La creatinina sierica potrebbe non tornare al valore basale in quanto vi è una perdita irreparabile dell'allotrapianto o un'intensificazione del dosaggio di CNI. Ciò si tradurrebbe in una biopsia che non cambia la gestione, ma sottoporrebbe il paziente a una procedura non necessaria e potenzialmente dannosa. Se un marker non invasivo diminuisce con il trattamento e si correla con la completa risoluzione dell'episodio di rigetto, ciò sarebbe utile ai fini del monitoraggio.

Dati preliminari:

1. Il programma di trapianto dell'Università di MN ha partecipato agli studi originali che mostrano un'associazione tra cf-DNA e rigetto acuto. Gli investigatori hanno esperienza con la metodologia e con la collaborazione con la società che esegue il test cf-DNA
2. Da quando hanno iniziato a eseguire le biopsie di uscita, i ricercatori, come altri, hanno scoperto che alcuni pazienti con presunto successo del trattamento di rigetto hanno evidenza di infiammazione in corso osservata nella biopsia.