Helmunsbehandlingsmetoder vid svår kronisk parodontit.

Studiepopulation och klinisk undersökning

60 på varandra följande patienter med svår kronisk parodontit rekryterades till studien.

Den kliniska parodontala undersökningen i hela munnen innefattade mätning av sonderingsdjup, klinisk fästningsnivå och plackindex vid 6 ställen per tand, förutom de tredje molarerna. Det papillära blödningsindexet registrerades för hela munhålan. Kliniska parodontala parametrar registrerades vid baslinjen och 1 månad, 3 månader och 6 månader efter behandlingar. Alveolär benförlust bedömdes med hjälp av en digital panoramaröntgenbild hos varje deltagare.

Diagnosen av svår kronisk parodontit baserades på kliniska och radiografiska diagnostiska kriterier som föreslagits av 1999 International Workshop for a Classification of Periodontal Diseases and Conditions. Dessa individer hade minst fyra icke-intilliggande tänder med platser med PD ≥6 mm och CAL ≥5 mm. De hade också ≥50 % alveolär benförlust i minst två kvadranter som stod i proportion till mängden plackackumulering.

Alla kliniska mätningar, GCF och plackprovtagning och även alla behandlingar utfördes av samma kalibrerade och utbildade utredare (B.A.) på ett standardiserat sätt (enkelblindad studie).

Behandling

Vid baslinjebesöket, omedelbart före icke-kirurgisk periodontal behandling, togs GCF- och subgingivala plackprover per patient och kliniska parodontala mätningar registrerades i alla grupper.

I Q-SRP-gruppen startades SRP med den övre högra kvadranten och fortsatte medurs under fyra besök med 1-veckors intervall. SRP utfördes med användning av ett sortiment av manuella parodontala kyretter. Tandytorna instrumenterades tills den var visuellt och taktil fri från alla avlagringar. Omprövningar utfördes 1, 3 och 6 månader efter slutförandet av SRP i den nedre högra kvadranten.

I FMUD-gruppen utfördes subgingival debridering i överkäken vid morgonpasset och i underkäken vid eftermiddagspasset. Proceduren avslutades i två besök (med 45 minuters intervall) samma dag. Alla parodontala ställen debriderades med ett piezokeramiskt ultraljudsinstrument med omodifierade och modifierade inlägg. Varje tand instrumenterades tills rotytan var visuellt och taktil ren och slät. Omundersökningar utfördes 1, 3 och 6 månader efter avslutad full-mouth subgingival debridman.

I MKS-gruppen kombinerades ultraljudssubgingival debridman med en intensiv antimikrobiell behandling med klorhexidin. Ryggen på tungan borstades med en 1% klorhexidingel under 1 minut. Patienterna instruerades att skölja två gånger under 1 minut med 0,2 % klorhexidinlösning. Varje tonsill sprayades fyra gånger med 0,2% klorhexidinspray. Upprepad subgingival spolning med 1% klorhexidingel av alla fickor med en trubbig nål. Denna subgingivala applicering upprepades på dag 8. Under 14 dagar efter behandlingen instruerades patienterna att skölja två gånger dagligen i 1 min med 0,2% klorhexidinlösning och att spraya tonsillerna två gånger dagligen med en 0,2% klorhexidinspray. Omundersökningar utfördes vid 1, 3 och 6 månader efter 14 dagars tvättperiod.

Standard munhygieninstruktioner gavs till alla patienter omedelbart efter den första sessionen i Q-SRP-gruppen och slutförandet av ultraljudsdebrideringen i FMD- och FMUD-grupper.

GCF-provtagning

GCF togs från de buckala aspekterna av två icke-angränsande interproximala platser i enkelrotade tänder med PD ≥6 mm, CAL ≥5 mm och synliga tecken på inflammation vid baslinjen. Omprovtagningen upprepades 1 månad, 3 månader och 6 månader efter behandling. Standardiserade filterpappersremsor användes för GCF-provtagning. Den absorberade vätskevolymen mättes med en förkalibrerad elektronisk anordning. Pappersremsorna förvarades vid -40◦C för vidare analys.

Subgingival plackprovtagning

Efter GCF-insamling samlades de subgingivala plackproverna från ett ställe per kvadrant med den djupaste PD (≥5 mm) av enkelrotade tänder vid baslinjen och 1 månad, 3 månader och 6 månader efter behandling med två standardiserade no.30 sterilt papper poäng. Samlade prover lagrades vid -40◦C för vidare analys.

Mätning av kalprotektin-, osteokalcin- och NTx-nivåer i GCF.

Två pappersremsor slogs samman, placerades i 300 mikroliter fosfatbuffrad koksaltlösning innehållande 0,05 % polysorbat 20 och inkuberades under 20 minuter vid rumstemperatur på en orbital skakapparat. Vätskan från pappersremsorna återvanns genom centrifugering vid 13 000 rpm under 5 minuter vid +4◦C. Kalprotektin-, osteokalcin- och NTx-nivåer i GCF-prover mättes med ELISA med användning av kommersiella kit i linje med tillverkarens riktlinjer. Plattorna mättes vid 450 nm med 650 nm som referensvåglängd med användning av en ELISA-läsare. Cytokinkoncentrationer beräknades från standardkurvan. GCF-resultat uttrycktes som totala mängder vid två ställen per provtagningstid.

Molekylär detektion av målbakterier i subgingivalt plack.

Den kvantitativa realtids-PCR-metoden (qPCR) användes för kvantitativ detektion av de utvalda parodontala patogenerna i subgingivalt plack. Totalt mikrobiellt DNA på paperpoints extraherades med användning av High Pure PCR Template Preparation Kit enligt tillverkarens instruktioner. LightCycler FastStart DNA Master SYBR Green I Kit användes för detektering av måloligonukleotider enligt tillverkarens instruktioner. Realtids-PCR-protokoll konstruerades med hänsyn till specifika primeruppsättningar. Standardkurvor konstruerades för beräkning av måloligonukleotider i proverna.

Statistisk analys

Variansanalys av upprepade mått (ANOVA) användes för att detektera skillnader inom och mellan grupper i kliniska, mikrobiologiska och biokemiska parametrar. Analys av kovarians användes för att jämföra förbättringarna i parametrar mellan de tre behandlingsgrupperna med justering för den potentiella skillnaden i baslinjedata och Bonferroni-testet utfördes post-hoc. Signifikansnivån sattes till p <0,05.