Enfoques de tratamiento de boca completa en periodontitis crónica severa.

Estudio de población y examen clínico

Se reclutaron para el estudio 60 pacientes consecutivos con periodontitis crónica grave.

El examen periodontal clínico de toda la boca incluyó la medición de la profundidad de sondaje, el nivel de inserción clínica y el índice de placa en 6 sitios por diente, excepto los terceros molares. El índice de sangrado papilar se registró para toda la cavidad oral. Los parámetros periodontales clínicos se registraron al inicio y 1 mes, 3 meses y 6 meses después de los tratamientos. La pérdida de hueso alveolar se evaluó mediante una radiografía panorámica digital en cada participante.

El diagnóstico de la periodontitis crónica grave se basó en los criterios diagnósticos clínicos y radiográficos propuestos por el Taller Internacional para la Clasificación de las Enfermedades y Condiciones Periodontales de 1999. Estos individuos tenían un mínimo de cuatro dientes no adyacentes con sitios con PD ≥6 mm y CAL ≥5 mm. También tenían una pérdida de hueso alveolar ≥50 % en al menos dos cuadrantes que era proporcional a la cantidad de placa acumulada.

Todas las mediciones clínicas, el GCF y el muestreo de placa y también todos los tratamientos fueron realizados por el mismo investigador calibrado y capacitado (B.A.) de manera estandarizada (ensayo simple ciego).

Tratamiento

En la visita inicial, inmediatamente antes del tratamiento periodontal no quirúrgico, se recolectaron muestras de placa subgingival y GCF por paciente y se registraron las mediciones periodontales clínicas en todos los grupos.

En el grupo Q-SRP, SRP se inició con el cuadrante superior derecho y continuó en el sentido de las agujas del reloj durante cuatro visitas a intervalos de 1 semana. La SRP se realizó utilizando una variedad de curetas periodontales manuales. Las superficies dentales se instrumentaron hasta que visual y táctilmente quedaron libres de todos los depósitos. Se realizaron reevaluaciones a los 1, 3 y 6 meses después de completar el SRP en el cuadrante inferior derecho.

En el grupo FMUD, el desbridamiento subgingival se realizó en el maxilar superior en la sesión de la mañana y en el maxilar inferior en la sesión de la tarde. El procedimiento se completó en dos visitas (con intervalo de 45 minutos) del mismo día. Todos los sitios periodontales fueron desbridados por un instrumento ultrasónico piezocerámico con insertos no modificados y modificados. Cada diente fue instrumentado hasta que la superficie de la raíz estuvo visual y táctilmente limpia y lisa. Se realizaron reexaminaciones 1, 3 y 6 meses después de completar el desbridamiento subgingival de boca completa.

En el grupo de FMD, el desbridamiento subgingival ultrasónico se combinó con un régimen antimicrobiano intensivo con clorhexidina. El dorso de la lengua se cepilla con gel de clorhexidina al 1% durante 1 minuto. Se indicó a los pacientes que se enjuagaran dos veces durante 1 minuto con una solución de clorhexidina al 0,2 %. Cada amígdala se pulverizó cuatro veces con clorhexidina al 0,2 %. Irrigación subgingival repetida con gel de clorhexidina al 1% de todas las bolsas con aguja roma. Esta aplicación subgingival se repitió el día 8. Durante 14 días después del tratamiento, se indicó a los pacientes que se enjuagaran dos veces al día durante 1 minuto con una solución de clorhexidina al 0,2 % y que rociaran las amígdalas dos veces al día con un spray de clorhexidina al 0,2 %. Se realizaron nuevos exámenes a los 1, 3 y 6 meses después del período de lavado de 14 días.

Se dieron instrucciones estándar de higiene bucal a todos los pacientes inmediatamente después de la primera sesión del grupo Q-SRP y de la finalización del desbridamiento ultrasónico en los grupos FMD y FMUD.

Muestreo de FVC

Se tomaron muestras de GCF de las caras bucales de dos sitios interproximales no adyacentes en dientes de una sola raíz con PD ≥6 mm, CAL ≥5 mm y signos visibles de inflamación al inicio del estudio. El nuevo muestreo se repitió 1 mes, 3 meses y 6 meses después del tratamiento. Se utilizaron tiras de papel de filtro estandarizadas para el muestreo de GCF. El volumen de líquido absorbido se midió con un dispositivo electrónico precalibrado. Las tiras de papel se almacenaron a -40◦C para su posterior análisis.

Muestreo de placa subgingival

Después de la recolección de GCF, las muestras de placa subgingival se recolectaron de un sitio por cuadrante con el DP más profundo (≥5 mm) de dientes de una sola raíz al inicio del estudio y 1 mes, 3 meses y 6 meses después del tratamiento utilizando dos papel estéril estándar n.° 30. puntos. Las muestras agrupadas se almacenaron a -40 ◦C para su posterior análisis.

Medición de los niveles de calprotectina, osteocalcina y NTx en GCF.

Se combinaron dos tiras de papel, se colocaron en 300 microlitros de solución salina tamponada con fosfato que contenía polisorbato 20 al 0,05% y se incubaron durante 20 minutos a temperatura ambiente en un agitador orbital. El fluido de las tiras de papel se recuperó por centrifugación a 13 000 rpm durante 5 minutos a +4◦C. Los niveles de calprotectina, osteocalcina y NTx en muestras de GCF se midieron mediante ELISA utilizando kits comerciales de acuerdo con las directrices del fabricante. Las placas se midieron a 450 nm con 650 nm como longitud de onda de referencia usando un lector ELISA. Las concentraciones de citoquinas se calcularon a partir de la curva estándar. Los resultados del GCF se expresaron como cantidades totales en dos sitios por tiempo de muestreo.

Detección molecular de bacterias diana en placa subgingival.

Se utilizó el método de PCR cuantitativa en tiempo real (qPCR) para la detección cuantitativa de los patógenos periodontales seleccionados en la placa subgingival. El ADN microbiano total de las puntas de papel se extrajo con el kit de preparación de plantillas de PCR High Pure de acuerdo con las instrucciones del fabricante. Se utilizó el kit LightCycler FastStart DNA Master SYBR Green I para la detección de oligonucleótidos objetivo de acuerdo con las instrucciones del fabricante. Los protocolos de PCR en tiempo real se construyeron considerando conjuntos de cebadores específicos. Se construyeron curvas estándar para el cálculo de los oligonucleótidos diana en las muestras.

Análisis estadístico

Se utilizó el análisis de varianza de medidas repetidas (ANOVA) para detectar diferencias intra e intergrupales en parámetros clínicos, microbiológicos y bioquímicos. Se utilizó el análisis de covarianza para comparar las mejoras en los parámetros entre los tres grupos de tratamiento ajustando la diferencia de potencial en los datos de referencia y se realizó la prueba de Bonferroni post-hoc. El nivel de significación se fijó en p <0,05.