Volledige mondbehandelingsbenaderingen bij ernstige chronische parodontitis.

Studiepopulatie en klinisch onderzoek

Voor het onderzoek werden 60 opeenvolgende patiënten met ernstige chronische parodontitis gerekruteerd.

Het klinisch parodontaal onderzoek van de gehele mond omvatte meting van de sondediepte, het klinische hechtingsniveau en de plaque-index op 6 plaatsen per tand, behalve de derde molaren. De papillaire bloedingsindex werd geregistreerd voor de gehele mondholte. Klinische parodontale parameters werden geregistreerd bij baseline en 1 maand, 3 maanden en 6 maanden na behandelingen. Alveolair botverlies werd beoordeeld met behulp van een digitale panoramische röntgenfoto bij elke deelnemer.

De diagnose van ernstige chronische parodontitis was gebaseerd op klinische en radiografische diagnostische criteria, voorgesteld door de International Workshop for a Classification of Parodontal Diseases and Conditions uit 1999. Deze personen hadden minimaal vier niet-aangrenzende tanden met locaties met PD ≥6 mm en CAL ≥5 mm. Ze hadden ook ≥50% alveolair botverlies in ten minste twee kwadranten dat evenredig was met de hoeveelheid plaque-ophoping.

Alle klinische metingen, GCF en plaque sampling en ook alle behandelingen werden uitgevoerd door dezelfde gekalibreerde en getrainde onderzoeker (B.A.) op een gestandaardiseerde manier (enkelblind onderzoek).

Behandeling

Bij het basisbezoek, onmiddellijk vóór de niet-chirurgische parodontale behandeling, werden GCF- en subgingivale plaquemonsters per patiënt verzameld en werden klinische parodontale metingen geregistreerd in alle groepen.

In de Q-SRP-groep werd SRP gestart met het kwadrant rechtsboven en met de klok mee voortgezet gedurende vier bezoeken met tussenpozen van 1 week. SRP werd uitgevoerd met behulp van een assortiment handmatige parodontale curettes. De tandoppervlakken werden geïnstrumenteerd totdat deze visueel en tactiel vrij was van alle afzettingen. Heronderzoeken werden uitgevoerd op 1, 3 en 6 maanden na voltooiing van de SRP in het kwadrant rechtsonder.

In de FMUD-groep werd subgingivaal debridement uitgevoerd in de bovenkaak tijdens de ochtendsessie en in de onderkaak tijdens de middagsessie. De procedure werd voltooid in twee bezoeken (met een interval van 45 minuten) op dezelfde dag. Alle parodontale sites werden gedebrideerd door een piëzokeramisch ultrasoon instrument met ongewijzigde en gemodificeerde inserts. Elke tand werd geïnstrumenteerd totdat het worteloppervlak visueel en tactiel schoon en glad was. Heronderzoeken werden uitgevoerd op 1, 3 en 6 maanden na voltooiing van de volledige mond subgingivale debridman.

In de MKZ-groep werd ultrasone subgingivale debridman gecombineerd met een intensief antimicrobieel regime met chloorhexidine. De achterkant van de tong werd gedurende 1 minuut geborsteld met een 1% chloorhexidinegel. De patiënten kregen de instructie om tweemaal gedurende 1 minuut te spoelen met 0,2% chloorhexidine-oplossing. Elke amandel werd vier keer besproeid met 0,2% chloorhexidinespray. Herhaalde subgingivale irrigatie met 1% chloorhexidinegel van alle pockets met een stompe naald. Deze subgingivale toepassing werd herhaald op dag 8. Gedurende 14 dagen na de behandeling kregen de patiënten de instructie om tweemaal daags gedurende 1 minuut te spoelen met 0,2% chloorhexidine-oplossing en om de amandelen tweemaal daags te besproeien met een 0,2% chloorhexidine-spray. Heronderzoeken werden uitgevoerd na 1, 3 en 6 maanden na een uitwasperiode van 14 dagen.

Standaard instructies voor mondhygiëne werden aan alle patiënten gegeven onmiddellijk na de eerste sessie van de Q-SRP-groep en de voltooiing van het ultrasone debridement in FMD- en FMUD-groepen.

GCF-bemonstering

GCF werd bemonsterd uit de buccale aspecten van twee niet-aangrenzende interproximale plaatsen in tanden met één wortel met PD ≥6 mm, CAL ≥5 mm en zichtbare tekenen van ontsteking bij baseline. Opnieuw bemonsteren werd 1 maand, 3 maanden en 6 maanden na de behandeling herhaald. Gestandaardiseerde filterpapierstroken werden gebruikt voor GCF-bemonstering. Het geabsorbeerde vloeistofvolume werd gemeten met een vooraf gekalibreerd elektronisch apparaat. De papieren stroken werden bewaard bij -40◦C voor verdere analyse.

Subgingivale plaquesampling

Na GCF-verzameling werden de subgingivale plaquemonsters verzameld van één plaats per kwadrant met de diepste PD (≥ 5 mm) van tanden met één wortel bij aanvang en 1 maand, 3 maanden en 6 maanden na de behandeling met behulp van twee gestandaardiseerde nr. 30 steriele papieren punten. Gepoolde monsters werden bewaard bij -40◦C voor verdere analyse.

Meting van calprotectine-, osteocalcine- en NTx-waarden in GCF.

Twee papierstroken werden samengevoegd, in 300 microliter fosfaatgebufferde zoutoplossing met 0,05% polysorbaat 20 geplaatst en gedurende 20 minuten bij kamertemperatuur op een rondschudapparaat geïncubeerd. De vloeistof uit de papierstroken werd gewonnen door 5 minuten centrifugeren bij 13.000 rpm bij +4◦C. Calprotectine-, osteocalcine- en NTx-niveaus in GCF-monsters werden gemeten door ELISA met behulp van commerciële kits in overeenstemming met de richtlijnen van de fabrikant. Platen werden gemeten bij 450 nm met 650 nm als referentiegolflengte met behulp van een ELISA-lezer. Cytokineconcentraties werden berekend uit de standaardcurve. GCF-resultaten werden uitgedrukt als totale hoeveelheden op twee locaties per bemonsteringstijdstip.

Moleculaire detectie van doelbacteriën in subgingivale plaque.

De kwantitatieve real-time PCR (qPCR) methode werd gebruikt voor de kwantitatieve detectie van de geselecteerde parodontale pathogenen in subgingivale plaque. Totaal microbieel DNA op paperpoints werd geëxtraheerd met behulp van High Pure PCR Template Preparation Kit volgens de instructies van de fabrikant. LightCycler FastStart DNA Master SYBR Green I Kit werd gebruikt voor de detectie van doeloligonucleotiden volgens de instructies van de fabrikant. Realtime PCR-protocollen werden geconstrueerd rekening houdend met specifieke primersets. Er werden standaardkrommen geconstrueerd voor de berekening van doeloligonucleotiden in de monsters.

Statistische analyse

Variantieanalyse met herhaalde metingen (ANOVA) werd gebruikt om intra- en intergroepsverschillen in klinische, microbiologische en biochemische parameters te detecteren. Analyse van covariantie werd gebruikt voor vergelijking van de verbeteringen in parameters tussen de drie behandelingsgroepen, waarbij werd gecorrigeerd voor het potentiële verschil in de uitgangsgegevens en de Bonferroni-test werd post-hoc uitgevoerd. Het significantieniveau werd vastgesteld op p <0,05.