Abordagens de tratamento de boca cheia na periodontite crônica severa.

População do estudo e exame clínico

60 pacientes consecutivos com periodontite crônica grave foram recrutados para o estudo.

O exame periodontal clínico de toda a boca incluiu a medição da profundidade de sondagem, nível de inserção clínica e índice de placa em 6 locais por dente, exceto os terceiros molares. O índice de sangramento papilar foi registrado para toda a cavidade oral. Parâmetros clínicos periodontais foram registrados no início e 1 mês, 3 meses e 6 meses após os tratamentos. A perda óssea alveolar foi avaliada usando uma radiografia panorâmica digital em cada participante.

O diagnóstico de periodontite crônica grave foi baseado em critérios diagnósticos clínicos e radiográficos propostos pelo International Workshop for a Classification of Periodontal Diseases and Conditions de 1999. Esses indivíduos tinham no mínimo quatro dentes não adjacentes com locais com PD ≥6 mm e CAL ≥5 mm. Eles também tiveram ≥ 50% de perda óssea alveolar em pelo menos dois quadrantes que foi compatível com a quantidade de acúmulo de placa.

Todas as medições clínicas, GCF e amostragem de placa e também todos os tratamentos foram realizados pelo mesmo investigador calibrado e treinado (B.A.) de maneira padronizada (ensaio simples-cego).

Tratamento

Na visita inicial, imediatamente antes do tratamento periodontal não cirúrgico, amostras de placa GCF e subgengival foram coletadas por paciente e medidas periodontais clínicas foram registradas em todos os grupos.

No grupo Q-SRP, os SRP foram iniciados com o quadrante superior direito e continuaram no sentido horário durante quatro visitas em intervalos de 1 semana. A SRP foi realizada usando uma variedade de curetas periodontais manuais. As superfícies dentárias foram instrumentadas até que estivessem visual e tátilmente livres de todos os depósitos. Reexames foram realizados em 1, 3 e 6 meses após a conclusão do SRP no quadrante inferior direito.

No grupo FMUD, o desbridamento subgengival foi realizado no maxilar superior na sessão da manhã e no maxilar inferior na sessão da tarde. O procedimento foi realizado em duas visitas (com intervalo de 45 minutos) no mesmo dia. Todos os sítios periodontais foram desbridados por um instrumento ultrassônico piezocerâmico com inserções não modificadas e modificadas. Cada dente foi instrumentado até que a superfície radicular estivesse visualmente e tatilmente limpa e lisa. Reexames foram realizados 1, 3 e 6 meses após a conclusão do desbridamento subgengival de boca inteira.

No grupo FMD, debridman subgengival ultrassônico foi combinado com um regime antimicrobiano intensivo com clorexidina. O dorso da língua foi escovado com gel de clorexidina 1% por 1 minuto. Os pacientes foram instruídos a enxaguar duas vezes por 1 minuto com solução de clorexidina 0,2%. Cada amígdala foi pulverizada quatro vezes com spray de clorexidina a 0,2%. Irrigação subgengival repetida com gel de clorexidina a 1% de todas as bolsas por uma agulha romba. Esta aplicação subgengival foi repetida no dia 8. Durante 14 dias após o tratamento, os pacientes foram instruídos a enxaguar duas vezes ao dia por 1 minuto com solução de clorexidina a 0,2% e a borrifar as amígdalas duas vezes ao dia com spray de clorexidina a 0,2%. Reexames foram realizados em 1, 3 e 6 meses após um período de washout de 14 dias.

Instruções padrão de higiene oral foram dadas a todos os pacientes imediatamente após a primeira sessão do grupo Q-SRP e a conclusão do desbridamento ultrassônico nos grupos FMD e FMUD.

amostragem GCF

GCF foi amostrado dos aspectos vestibulares de dois sítios interproximais não adjacentes em dentes unitários com PD ≥6 mm, CAL ≥5 mm e sinais visíveis de inflamação na linha de base. A reamostragem foi repetida em 1 mês, 3 meses e 6 meses após o tratamento. Tiras de papel de filtro padronizadas foram usadas para amostragem GCF. O volume de fluido absorvido foi medido com um dispositivo eletrônico pré-calibrado. As tiras de papel foram armazenadas a -40◦C para posterior análise.

Amostragem de placa subgengival

Após a coleta do GCF, as amostras de placa subgengival foram coletadas de um local por quadrante com o PD mais profundo (≥5 mm) de dentes unitários na linha de base e 1 mês, 3 meses e 6 meses após o tratamento usando dois papéis estéreis padronizados nº 30 pontos. As amostras agrupadas foram armazenadas a -40◦C para análise posterior.

Medição dos níveis de calprotectina, osteocalcina e NTx no GCF.

Duas tiras de papel foram reunidas, colocadas em 300 microlitros de solução salina tamponada com fosfato contendo 0,05% de polissorbato 20 e incubadas por 20 minutos à temperatura ambiente em um agitador orbital. O fluido das tiras de papel foi recuperado por centrifugação a 13.000 rpm por 5 minutos a +4◦C. Os níveis de calprotectina, osteocalcina e NTx em amostras de GCF foram medidos por ELISA usando kits comerciais de acordo com as diretrizes do fabricante. As placas foram medidas a 450 nm com 650 nm como comprimento de onda de referência usando um leitor de ELISA. As concentrações de citocinas foram calculadas a partir da curva padrão. Os resultados GCF foram expressos como quantidades totais em dois locais por tempo de amostragem.

Detecção molecular de bactérias alvo na placa subgengival.

O método quantitativo de PCR em tempo real (qPCR) foi utilizado para a detecção quantitativa dos patógenos periodontais selecionados na placa subgengival. O DNA microbiano total em paperpoints foi extraído usando o kit de preparação de modelo de PCR de alta pureza de acordo com as instruções do fabricante. LightCycler FastStart DNA Master SYBR Green I Kit foi usado para a detecção de oligonucleotídeos alvo de acordo com as instruções do fabricante. Protocolos de PCR em tempo real foram construídos considerando conjuntos específicos de primers. Curvas padrão foram construídas para o cálculo de oligonucleotídeos alvo nas amostras.

Análise estatística

Análise de variância de medidas repetidas (ANOVA) foi usada para detectar diferenças intra e intergrupos em parâmetros clínicos, microbiológicos e bioquímicos. A análise de covariância foi usada para comparação das melhorias nos parâmetros entre os três grupos de tratamento, ajustando para a diferença de potencial nos dados da linha de base e o teste de Bonferroni foi realizado post-hoc. O nível de significância foi estabelecido em p < 0,05.