严重慢性牙周炎的全口治疗方法。

研究人群和临床检查

该研究招募了 60 名连续的严重慢性牙周炎患者。

全口临床牙周检查包括测量每颗牙齿6个部位的探诊深度、临床附着水平和菌斑指数，除第三磨牙外，记录整个口腔的乳头状出血指数。 在基线和治疗后 1 个月、3 个月和 6 个月时记录临床牙周参数。 使用每位参与者的数字全景 X 光片评估牙槽骨丢失。

重度慢性牙周炎的诊断基于 1999 年国际牙周病分类研讨会提出的临床和影像学诊断标准。 这些人至少有四颗不相邻的牙齿，其位置 PD ≥ 6 mm 且 CAL ≥ 5 mm。 他们在至少两个象限中也有 ≥ 50% 的牙槽骨丢失，这与斑块积聚的数量相称。

所有临床测量、GCF 和斑块取样以及所有治疗均由同一位经过校准和培训的研究者 (B.A.) 以标准化方式（单盲试验）进行。

治疗

在基线访问时，即刻在非手术牙周治疗之前，收集每位患者的 GCF 和龈下菌斑样本，并记录所有组的临床牙周测量值。

在 Q-SRP 组中，SRP 从右上象限开始，并以 1 周为间隔顺时针持续进行四次就诊。 SRP 使用各种手动牙周刮匙进行。 对牙齿表面进行检测，直到它在视觉上和触觉上都没有任何沉积物。 在右下象限的 SRP 完成后的 1、3 和 6 个月进行了重新检查。

在 FMUD 组中，上午在上颌进行龈下清创术，下午在下颌进行龈下清创术。 该程序在同一天的两次访问（间隔 45 分钟）中完成。 所有牙周部位均由带有未修改和修改过的插入物的压电陶瓷超声仪器清创。 对每颗牙齿进行器械检查，直到牙根表面在视觉和触觉上都清洁光滑。 全口龈下清创术完成后1、3、6个月复查。

在 FMD 组中，超声龈下清创术与洗必泰强化抗菌方案相结合。 用1%洗必泰凝胶刷洗舌背1分钟。 指示患者用 0.2% 氯己定溶液冲洗两次，每次 1 分钟。 每个扁桃体用 0.2% 氯己定喷雾剂喷洒四次。 用钝针用 1% 洗必泰凝胶反复龈下冲洗所有囊袋。 第 8 天重复此龈下应用。 治疗后 14 天，指导患者每天用 0.2% 洗必泰溶液冲洗两次，每次 1 分钟，并每天用 0.2% 洗必泰喷雾剂喷洒扁桃体两次。 在 14 天清除期后的第 1、3 和 6 个月进行复查。

在 Q-SRP 组的第一次治疗以及 FMD 和 FMUD 组的超声清创术完成后，立即对所有患者进行标准口腔卫生指导。

GCF抽样

GCF 从单根牙齿的两个不相邻邻间部位的颊侧取样，PD ≥ 6 毫米，CAL ≥ 5 毫米，基线时有明显的炎症迹象。 在治疗后 1 个月、3 个月和 6 个月重复重新取样。 标准化滤纸条用于 GCF 采样。 使用预先校准的电子设备测量吸收的液体体积。 纸条储存在 -40°C 以供进一步分析。

龈下菌斑取样

GCF收集后，在基线和治疗后1个月、3个月和6个月时，使用两张标准化的30号无菌纸从单根牙最深PD（≥5mm）的每个象限一个部位收集龈下菌斑样本点。 合并的样品储存在 -40°C 以供进一步分析。

GCF 中钙卫蛋白、骨钙素和 NTx 水平的测量。

合并两个试纸条，放入 300 微升含有 0.05% 聚山梨醇酯 20 的磷酸盐缓冲盐水中，并在室温下在定轨振荡器上孵育 20 分钟。 通过在 +4°C 下以 13000 rpm 离心 5 分钟从纸条中回收液体。 GCF 样品中的钙卫蛋白、骨钙素和 NTx 水平使用符合制造商指南的商业试剂盒通过 ELISA 测量。 使用 ELISA 读取器在 450 nm 下以 650 nm 作为参考波长测量板。 从标准曲线计算细胞因子浓度。 GCF 结果表示为每个采样时间两个站点的总量。

龈下菌斑中目标细菌的分子检测。

定量实时PCR（qPCR）方法用于定量检测龈下菌斑中选定的牙周病原体。 根据制造商的说明，使用高纯 PCR 模板制备试剂盒提取纸尖上的总微生物 DNA。 根据制造商的说明，使用 LightCycler FastStart DNA Master SYBR Green I Kit 检测目标寡核苷酸。 实时 PCR 协​​议是在考虑特定引物组的情况下构建的。 构建标准曲线用于计算样品中的目标寡核苷酸。

统计分析

重复测量方差分析 (ANOVA) 用于检测临床、微生物学和生化参数的组内和组间差异。 协方差分析用于比较三个治疗组之间参数的改善，调整基线数据中的潜在差异，并事后进行 Bonferroni 检验。 显着性水平设定为 p <0.05。