Tilnærminger til full munnbehandling ved alvorlig kronisk periodontitt.

Studiepopulasjon og klinisk undersøkelse

60 påfølgende pasienter med alvorlig kronisk periodontitt ble rekruttert til studien.

Den kliniske periodontale undersøkelsen av hele munnen inkluderte måling av sonderingsdybde, klinisk festenivå og plakkindeks på 6 steder per tann, bortsett fra de tredje molarene. Den papillære blødningsindeksen ble registrert for hele munnhulen. Kliniske periodontale parametere ble registrert ved baseline og 1 måned, 3 måneder og 6 måneder etter behandlingen. Alveolært bentap ble vurdert ved hjelp av et digitalt panoramisk røntgenbilde hos hver deltaker.

Diagnosen alvorlig kronisk periodontitt var basert på kliniske og radiografiske diagnostiske kriterier foreslått av 1999 International Workshop for a Classification of Periodontal Diseases and Conditions. Disse personene hadde minimum fire ikke-tilstøtende tenner med steder med PD ≥6 mm og CAL ≥5 mm. De hadde også ≥50 % alveolart bentap i minst to kvadranter som var i samsvar med mengden plakkakkumulering.

Alle kliniske målinger, GCF og plakkprøvetaking og også alle behandlinger ble utført av den samme kalibrerte og trente etterforskeren (B.A.) på en standardisert måte (enkeltblindet forsøk).

Behandling

Ved baseline-besøket, rett før ikke-kirurgisk periodontal behandling, ble GCF- og subgingivale plakkprøver samlet per pasient og kliniske periodontale målinger ble registrert i alle grupper.

I Q-SRP-gruppen ble SRP startet med øvre høyre kvadrant, og fortsatte med klokken over fire besøk med 1-ukens mellomrom. SRP ble utført ved bruk av et utvalg manuelle periodontale kyretter. Tannoverflatene ble instrumentert til den var visuelt og taktil fri for alle avleiringer. Nye undersøkelser ble utført 1, 3 og 6 måneder etter fullføring av SRP i nedre høyre kvadrant.

I FMUD-gruppen ble det utført subgingival debridement i overkjeven ved morgenøkten og i underkjeven ved ettermiddagsøkten. Prosedyren ble gjennomført i to besøk (med 45 minutters intervall) samme dag. Alle periodontale steder ble debridert av et piezokeramisk ultralydinstrument med umodifiserte og modifiserte innlegg. Hver tann ble instrumentert til rotoverflaten var visuelt og taktil ren og glatt. Re-undersøkelser ble utført 1, 3 og 6 måneder etter fullføring av full-mouth subgingival debridman.

I MKS-gruppen ble ultralyd subgingival debridman kombinert med et intensivt antimikrobielt regime med klorheksidin. Ryggen på tungen ble børstet med en 1% klorheksidingel i 1 minutt. Pasientene ble bedt om å skylle to ganger i 1 minutt med 0,2 % klorheksidinløsning. Hver mandel ble sprayet fire ganger med 0,2% klorheksidinspray. Gjentatt subgingival vanning med 1 % klorheksidingel av alle lommene med en sløv nål. Denne subgingivalapplikasjonen ble gjentatt på dag 8. I 14 dager etter behandlingen ble pasientene instruert om å skylle to ganger daglig i 1 min med 0,2 % klorheksidinløsning og spraye mandlene to ganger daglig med en 0,2 % klorheksidinspray. Reundersøkelser ble utført etter 1, 3 og 6 måneder etter 14 dagers utvaskingsperiode.

Standard munnhygieneinstruksjoner ble gitt alle pasienter umiddelbart etter den første økten med Q-SRP-gruppen og fullføringen av ultralyddebrideringen i FMD- og FMUD-gruppene.

GCF prøvetaking

GCF ble tatt fra de bukkale aspektene av to ikke-tilstøtende interproksimale steder i enkeltrotede tenner med PD ≥6 mm, CAL ≥5 mm og synlige tegn på betennelse ved baseline. Ny prøvetaking ble gjentatt 1 måned, 3 måneder og 6 måneder etter behandling. Standardiserte filterpapirstrimler ble brukt til GCF-prøvetaking. Det absorberte væskevolumet ble målt med en forhåndskalibrert elektronisk enhet. Papirstrimlene ble lagret ved -40◦C for videre analyse.

Subgingival plakkprøvetaking

Etter GCF-samling ble de subgingivale plakkprøvene samlet fra ett sted per kvadrant med den dypeste PD (≥5 mm) av enkeltrotede tenner ved baseline og 1 måned, 3 måneder og 6 måneder etter behandling med to standardiserte no.30 sterilt papir poeng. Samlede prøver ble lagret ved -40◦C for videre analyse.

Måling av calprotectin, osteocalcin og NTx nivåer i GCF.

To papirstrimler ble slått sammen, plassert i 300 mikroliter fosfatbufret saltvann inneholdende 0,05% polysorbat 20 og inkubert i 20 minutter ved romtemperatur på en orbital shaker. Væsken fra papirstrimlene ble gjenvunnet ved sentrifugering ved 13 000 rpm i 5 minutter ved +4◦C. Kalprotektin-, osteokalsin- og NTx-nivåer i GCF-prøver ble målt med ELISA ved bruk av kommersielle sett i tråd med produsentens retningslinjer. Platene ble målt ved 450 nm med 650 nm som referansebølgelengde ved å bruke en ELISA-leser. Cytokinkonsentrasjoner ble beregnet fra standardkurven. GCF-resultater ble uttrykt som totale mengder på to steder per prøvetakingstid.

Molekylær påvisning av målbakterier i subgingival plakk.

Den kvantitative sanntids PCR (qPCR) metoden ble brukt for kvantitativ påvisning av de utvalgte periodontale patogenene i subgingival plakk. Totalt mikrobiell DNA på paperpoints ble ekstrahert ved bruk av High Pure PCR Template Preparation Kit i henhold til produsentens instruksjoner. LightCycler FastStart DNA Master SYBR Green I Kit ble brukt til påvisning av måloligonukleotider i henhold til produsentens instruksjoner. Sanntids PCR-protokoller ble konstruert med tanke på spesifikke primersett. Standardkurver ble konstruert for beregning av måloligonukleotider i prøvene.

Statistisk analyse

Variansanalyse av gjentatte mål (ANOVA) ble brukt for å oppdage intra- og intergruppeforskjeller i kliniske, mikrobiologiske og biokjemiske parametere. Analyse av kovarians ble brukt for å sammenligne forbedringene i parametere mellom de tre behandlingsgruppene, justering for potensiell forskjell i baseline-dataene, og Bonferroni-testen ble utført post-hoc. Signifikansnivået ble satt til p <0,05.