Ovarieföryngring med hjälp av trombocytrik plasma (PRP) och autolog vävnadsstromal vaskulär fraktion (tSVF) och cellberikad tSVF (OVAR-REJUV)

Intraovarieplacering av blodplättsrik plasma (PRP) har redan visat sig i flera serier för att återställa peri-menopausala och tidiga postmenopausala hormonnivåer mot premenopausala nivåer och premenopausalt cykliskt beteende, till och med resulterat i graviditeter och förlossningar av friska spädbarn. Syftet med denna studie är att utvärdera användbarheten av PRP för att förbättra hormonell status och klinisk symptomatologi hos kvinnor i peri-menopausala och tidiga postmenopausala kvinnor, och hos kvinnor med icke-Turners för tidig ovariesvikt, genom att dokumentera förbättringarna i biokemiska/hormonella parametrar , bentäthet och fysisk och mental hälsorelaterad livskvalitet, samt att jämföra varaktigheten och effektiviteten av denna PRP-procedur med den intraovarieplacering av biocellulära fysiologiskt aktiva cellulära och cytokinelement som finns i den fettvävnadshärledda Stromal Vascular Fraction (tSVF).

Det bör noteras att graden av förlust av bentäthet hos kvinnor är maximal under de 12 månaderna före och 24 månaderna efter klimakteriet. De absoluta och relativa procentuella mängderna kroppsfett och muskler förändras på negativa sätt - med ökande fett och minskande muskelmassa, med de mest dramatiska förändringarna som också inträffar under klimakteriets övergångsperiod. Denna studie ger därför potential att dokumentera mätbart upphörande av bentäthetsförlust eller minskning av graden av bentäthetsförlust jämfört med väletablerade kända mönster och historiska kontroller som ett resultat av de föreslagna relativt ofarliga ingreppen. Samma teknik som ska användas för bentäthetsutvärdering, singelfotonabsorptiometri, kommer också att användas för att kvantifiera fett kontra muskelkroppssammansättning vid baslinjen och 18 månader.

SVF kan vidare karakteriseras som antingen cellulär SVF eller vävnads-SVF (cSVF eller tSVF). Vävnads-SVF (tSVF) erhålls genom en liten volym manuell stängd spruta mikrokanylaspiration av subkutan fettvävnad (cirka 10+ teskedar), följt av dekantering i slutet system för att avlägsna infranantvätskorna följt av emulgering av resterna till den erforderliga graden av homogenitet och reducerad partikelstorlek för att tillåta injektion genom konventionella nålhål. Vävnads-SVF kännetecknas av kvarhållande av en del av den icke-cellulära matrisen av kollagen- och fina vaskulära rester, som tillsammans bildar en matris som behåller och ger struktur åt de biocellulära elementen som är inbäddade i. Cellulär SVF (cSVF) börjar med samma mini-aspiration, men kännetecknas av centrifugering i slutet system, följt av enzymatisk digestion för att isolera./koncentrera den cellulära SVF (cSVF). Efter enzymneutralisering och sköljning förbereds det resulterande koncentratet av livskraftiga stamceller/stromala kärnceller för guidad placering i äggstocksparenkymvävnaden. Ett prov av varje injektat testas och kvantifieras med hjälp av standard laserflödescytometri, inklusive livsduglighet och antal celler i varje prov.

Studien inkluderar användning av PRP (Emcyte II Pure PRP, Florida, USA) PRP enligt tillverkarens instruktioner) enbart som kontroll i första behandlingslem (ARM), vilket kommer att volymmässigt vara detsamma som de andra injektaten, för guidad placering dokumenterad i äggstockarna . En jämförande andra ARM bestående av PRP kommer att kombineras med emulgerad tSVF (Sterile Tulip Nanofat Disposable, San Diego, Kalifornien (CA), USA). I en tredje ARM kommer PRP plus emulgerad tSVF att kombineras med både koncentrerad cSVF. Denna arm ska bestämma effekter av högre cellkoncentration än vad som uppnås i andra ARM med användning av cellulära koncentrat som uppnås med Centricyte 1000 (Healeon Medical Inc, Newbury Park, CA, USA). De primära resultaten för var och en av dessa valfria procedurer kommer att jämföras och utvärderas med avseende på säkerhet, klinisk effekt för att förbättra återgången av ovariefunktion för att bestämma den föredragna metoden för att uppnå maximala resultat.

Baslinje och övervakade patientegenskaper är som följer:

• Baslinjestatus för alla patienter kommer att fastställas med hjälp av relevanta biokemiska index, inklusive serumnivåer av follikelstimulerande hormon (FSH), anti-mullerian hormon (AMH), luteiniserande hormon (LH), estradiol (E2) och progesteron (PRG). Dessa kommer att upprepas efter 30 och 90 dagar, och sedan var tredje månad i ytterligare 15 månader, totalt uppföljning 18 månader. Omfattande blodpanel (SMA 12), fullständigt blodvärde (CBC), lipidprofiler och koagulationsindex kommer att erhållas vid baslinjen och upprepas (utan koaguleringsindex) efter 12 månader.
• När bentätheten börjar sjunka med en signifikant hastighet under den peri-menopausala perioden, kommer en bentäthetsbestämning med singelfotonabsorptiometri att erhållas vid baslinjen och igen vid 12 och/eller 18 månader. Kroppssammansättning fett/muskel proportioner kommer att utvärderas med samma teknik vid samma sittning.
• Fysisk och psykisk hälsorelaterad livskvalitet kommer att utvärderas med livskvalitetsundersökningar vid baslinjen, 6 och 12 månader.
• Ovarialvolymen kommer att bedömas vid baslinjen genom endovaginal sonografi, tillsammans med storleken och antalet folliklar som finns närvarande, och sedan var sjätte månad.
• Journalregistrering av menstruationscykler - frekvens/intervall, dagar och varaktighet.

I ARM 1 kommer enbart PRP att placeras i äggstockarna. I ARM 2 kommer PRP att kombineras med tSVF. I ARM 3 kommer tSVF att kombineras med både cSVF och PRP. Matchade volymer av injektat kommer att användas i varje ARM för att undvika frågan om potentiell interferens på äggstocksparenkym som påverkar resultatet på grund av volymvarierande effekter. De primära resultaten för var och en av dessa armar kommer att jämföras, vilket informerar oss om en föredragen metod för vidare utvärdering, och i slutändan, klinisk praxis.

Autologous Platelet Rich Plasma är en etablerad behandlingsmodalitet som använder FDA-godkända metoder och kit, och har utvecklats till en mogen behandlingsmodalitet för en mängd olika ortopediska och mjukdelspatologier. Som nämnts har dess säkerhet och användbarhet vid äggstocksföryngring och reversering av infertilitet redan fastställts i peer reviewed, fallserier.

Säkerhet vid användning av vissa allogena humana mesenkymala stamceller (hMSC) har föreslagits och i begränsad omfattning testats med avseende på effekt i vissa tidigare studier. De testade produkterna har variabla protokoll för att isolera och dokumentera innehåll och cellulär livskraft.

Autologa stam-stromaceller (som finns i cSVF) har rapporterats säkra och effektiva i många tillämpningar/studier och i kliniska prövningar som för närvarande pågår i andra kroppssystem och patologier. Dessa celler kan lätt erhållas och isoleras/koncentreras i ett slutet system från patientens fetthärledda stromala vaskulära fraktion (tSVF). Detta är viktigt eftersom sådana vävnader är patientens egna, genetiskt unika celler och, i teorin, potentiellt säkrare än de allogena mänskliga mesenkymala stamcellerna (hMSC) som är potentiellt genetiskt främmande och bär risken för kontaminering vid bearbetning och leverans.

Ett kombinerat tillvägagångssätt kan möjliggöra implementeringen av ett lämpligt större antal celler, tillväxtfaktorer, exosomer/mikrovesiklar utan behov av odlingsexpansion.

Innehållet i cSVF innehåller en heterogen population av odesignade (stamliknande) och stödjande celler (stromala). Denna kombination av vuxna, autologa celler, tillsammans med stromaceller, anses erbjuda viktiga terapeutiska och regenerativa egenskaper baserade på cellulära differentieringsegenskaper och parakrina (sekretoriska kommunikationssignaler och svar på nisch) i varierande grad. Man tror att sådan signalering kan utgöra kroppens egen mekanism för homeostas och regenerering. Interaktion mellan dessa komplexa biokemiska signaler föreslås för att ytterligare rekrytera eller aktivera reparativa processer med interaktion med de naturliga värdcellerna och vävnaderna. Dessutom kan denna reparativa process bli viktiga specifika värdaktiviteter och behov på den plats där den terapeutiska kombinationen placeras. De exakta mekanismerna bakom dessa reparativa processer är under intensiva utredningar.

I alla fall kommer blodplättarna och biocellulärt material för intraovarieinjektion att placeras under konventionell avbildningsvägledning med användning av endovaginal sonografi. Speciellt utformade modifierade nålar kommer att användas för att korrekt leverera de biologiska produkterna till de riktade intraovarie parenkymvävnaderna. Metodiken som krävs är överlag mycket lik uttag av oocyter vid infertilitetsbehandlingar, som utförs över hela världen, med minimal risk för negativa effekter miljontals gånger varje år.

Procedurerna är kända för att resultera i minimalt obehag, med patientförberedelser som varierar från ingen till mild stödjande anxiolys. Smärta efter ingreppet, om någon, kan hanteras effektivt med paracetamol. Patienterna observeras efter proceduren i 60-120 minuter och skrivs sedan ut med lämpliga skriftliga instruktioner efter proceduren för att periodiskt återkomma för klinisk uppföljning och laboratorieuppföljning enligt protokoll som beskrivs i resultatanalysen. Målet med denna studie syftar till att jämföra varaktigheten av hormonell, klinisk och livskvalitetsförbättring mellan studiens tre armar.

För den minoritet av studiedeltagare där äggstockarna inte är lättillgängliga med endovaginalt ultraljud, kan en delmängd av patienter behöva använda laparoskopisk vägledning. I alla sådana fall kommer ingreppen att äga rum på sjukhus, med utredaren som förbereder injektaten och gynekologiska eller andra lämpliga specialistkirurger utför det laparoskopiska ingreppet med hjälp av standardprocedurer som vägledning.