Омоложение яичников с использованием обогащенной тромбоцитами плазмы (PRP) и аутологичной тканевой стромально-сосудистой фракции (tSVF) и обогащенной клетками tSVF (OVAR-REJUV)

Внутрияичниковое введение богатой тромбоцитами плазмы (PRP) уже было продемонстрировано в нескольких сериях, чтобы вернуть уровни гормонов перименопаузы и ранней постменопаузы к пременопаузальным уровням и пременопаузальному циклическому поведению, даже приводя к беременности и родам здоровых женщин. младенцы. Целью этого исследования является оценка полезности PRP для улучшения гормонального статуса и клинической симптоматики у женщин в перименопаузе и ранней постменопаузе, а также у женщин с преждевременной недостаточностью яичников не по Тернеру, путем документирования улучшения биохимических / гормональных параметров. , плотность костной ткани и качество жизни, связанное с физическим и психическим здоровьем, а также сравнение продолжительности и эффективности этой процедуры PRP с внутрияичниковым размещением биоклеточных физиологически активных клеточных и цитокиновых элементов, содержащихся в стромально-сосудистой фракции, полученной из жировой ткани. (тСВФ).

Следует отметить, что скорость потери плотности костной ткани у женщин максимальна в течение 12 мес до и 24 мес после менопаузы. Абсолютные и относительные процентные количества жира и мышц изменяются неблагоприятно - с увеличением жира и падением мышечной массы, причем наиболее резкие изменения происходят также в менопаузальном переходном периоде. Таким образом, это исследование дает возможность задокументировать измеримое прекращение потери плотности костной ткани или снижение скорости потери плотности костной ткани по сравнению с хорошо установленными известными моделями и историческими контролями в результате предложенных относительно безвредных вмешательств. Та же технология, которая будет использоваться для оценки плотности костей, — однофотонная абсорбциометрия — будет также использоваться для количественного определения состава жира и мышц в исходном состоянии и через 18 месяцев.

СВФ можно дополнительно охарактеризовать как клеточный СВФ или тканевый СВФ (цСКВ или тСКВ). Тканевую СВФ (тЗВФ) получают путем аспирации подкожной жировой клетчатки (примерно 10+ чайных ложек) ручным закрытым шприцем малого объема с помощью микроканюли с последующим декантированием в закрытой системе для удаления инфранантных жидкостей с последующим эмульгированием остатка до необходимой степени гомогенности и уменьшенный размер частиц для обеспечения возможности впрыска через обычные игольчатые отверстия манометра. Тканевой СВФ характеризуется сохранением части неклеточного матрикса коллагеновых и тонких сосудистых остатков, которые вместе образуют матрикс, сохраняющий и обеспечивающий структуру биоклеточных элементов, встроенных внутрь. Клеточный SVF (cSVF) начинается с той же мини-аспирации, но характеризуется центрифугированием в закрытой системе с последующим ферментативным расщеплением для выделения/концентрации клеточного SVF (cSVF). После ферментативной нейтрализации и промывки полученный концентрат жизнеспособных стволовых/стромальных ядерных клеток подготавливают для управляемого размещения в паренхиматозной ткани яичника. Образец каждого инъектируемого вещества тестируют и количественно определяют с помощью стандартной лазерной проточной цитометрии, включая жизнеспособность и количество клеток в каждом образце.

Исследование включает использование PRP (Emcyte II Pure PRP, Флорида, США) PRP в соответствии с инструкциями производителя) отдельно в качестве контроля в конечности первого лечения (ARM), объем которой будет таким же, как и у других инъекций, для управляемого размещения, документированного в яичниках. . Сравнительный второй ARM, состоящий из PRP, будет объединен с эмульгированным tSVF (Sterile Tulip Nanofat Disposable, Сан-Диего, Калифорния (Калифорния), США). В третьем ARM PRP плюс эмульгированный tSVF будут комбинировать с обоими концентрированными cSVF. Эта группа предназначена для определения эффектов более высокой клеточной концентрации, чем достигнутая во второй ARM, с использованием клеточных концентратов, достигаемых с помощью Centricyte 1000 (Healeon Medical Inc, Ньюбери-Парк, Калифорния, США). Первичные результаты для каждой из этих дополнительных процедур будут сравниваться и оцениваться с точки зрения безопасности, клинической эффективности в улучшении восстановления функции яичников, чтобы определить предпочтительную методологию для достижения максимальных результатов.

Исходные и контролируемые характеристики пациентов следующие:

• Исходный статус всех пациентов будет определяться с использованием соответствующих биохимических показателей, включая сывороточные уровни фолликулостимулирующего гормона (ФСГ), антимюллерова гормона (АМГ), лютеинизирующего гормона (ЛГ), эстрадиола (Е2) и прогестерона (ПРГ). Они будут повторяться через 30 и 90 дней, а затем каждые 3 месяца в течение дополнительных 15 месяцев, всего последующие 18 месяцев. Комплексный анализ крови (SMA 12), общий анализ крови (CBC), липидный профиль и показатели свертывания крови будут получены в начале исследования и повторены (без показателей свертывания крови) через 12 месяцев.
• Поскольку плотность костной ткани начинает снижаться со значительной скоростью в перименопаузальный период, определение плотности костной ткани с помощью однофотонной абсорбциометрии будет проводиться в начале исследования и повторно через 12 и/или 18 месяцев. Соотношение жира и мышц в составе тела будет оцениваться с помощью той же технологии на одном и том же сеансе.
• Качество жизни, связанное с физическим и психическим здоровьем, будет оцениваться с помощью обследований качества жизни на исходном уровне, через 6 и 12 месяцев.
• Объем яичников будет оцениваться на исходном уровне с помощью эндовагинальной сонографии, наряду с размером и количеством присутствующих фолликулов, а затем каждые 6 месяцев.
• Журнал регистрации менструальных циклов - частота/интервал, дни и продолжительность.

В ARM 1 только PRP будет помещен в яичники. В ARM 2 PRP будет сочетаться с tSVF. В ARM 3 tSVF будет сочетаться как с cSVF, так и с PRP. Соответствующие объемы инъекций будут использоваться в каждом ARM, чтобы избежать вопроса о потенциальном воздействии на паренхиму яичников, влияющем на результат из-за переменных эффектов объема. Первичные исходы для каждой из этих групп будут сравниваться, что информирует нас о предпочтительной методологии для дальнейшей оценки и, в конечном итоге, клинической практики.

Аутологичная обогащенная тромбоцитами плазма — это общепризнанный метод лечения, в котором используются методологии и наборы, одобренные FDA, и который превратился в зрелый метод лечения различных ортопедических патологий и патологий мягких тканей. Как уже отмечалось, его безопасность и полезность для омоложения яичников и устранения бесплодия уже подтверждены в рецензируемых сериях случаев.

Безопасность использования некоторых аллогенных мезенхимальных стволовых клеток человека (hMSC) была предложена и ограниченно проверена на эффективность в некоторых предыдущих исследованиях. Тестируемые продукты имеют различные протоколы для выделения и документирования содержимого и жизнеспособности клеток.

Сообщалось, что аутологичные стволовые стромальные клетки (содержащиеся в cSVF) безопасны и эффективны во многих применениях/исследованиях и в клинических испытаниях, проводимых в настоящее время при других системах организма и патологиях. Эти клетки легко получить и выделить/концентрировать в закрытой системе из жировой стромальной сосудистой фракции пациента (tSVF). Это важно, поскольку такие ткани являются собственными, генетически уникальными клетками пациента и, теоретически, потенциально более безопасны, чем аллогенные мезенхимальные стволовые клетки человека (чМСК), которые потенциально являются генетически чужеродными и несут риск заражения при обработке и доставке.

Комбинированный подход может позволить реализовать подходящее большее количество клеток, факторов роста, экзосом/микровезикул без необходимости расширения культуры.

Содержимое cSVF содержит гетерогенную популяцию необозначенных (стволовых) и поддерживающих клеток (стромальных). Считается, что эта комбинация взрослых аутологичных клеток вместе со стромальными клетками обладает важными терапевтическими и регенеративными свойствами, основанными на особенностях клеточной дифференцировки и паракринных (секреторных коммуникационных сигналах и реакциях на ниши) в различной степени. Считается, что такая передача сигналов может представлять собой собственный механизм организма для гомеостаза и регенерации. Предполагается, что взаимодействие этих сложных биохимических сигналов дополнительно рекрутирует или активирует репаративные процессы при взаимодействии с нативными клетками и тканями хозяина. Кроме того, этот репаративный процесс может стать важным для специфических действий и потребностей хозяина в том месте, куда помещается терапевтическая комбинация. Точные механизмы, лежащие в основе этих репаративных процессов, интенсивно изучаются.

Во всех случаях тромбоциты и биоклеточные материалы для интраовариальной инъекции будут помещаться под обычным визуализирующим контролем с использованием эндовагинальной сонографии. Специально разработанные модифицированные иглы будут использоваться для точной доставки биологических продуктов к целевым внутрияичниковым паренхиматозным тканям. Требуемая методология в целом очень похожа на извлечение ооцитов при лечении бесплодия, которое проводится во всем мире с минимальным риском побочных эффектов миллионы раз в год.

Известно, что процедуры вызывают минимальный дискомфорт, а подготовка пациентов варьируется от нулевой до умеренного поддерживающего анксиолиза. Боль после процедуры, если она есть, может быть эффективно устранена с помощью ацетаминофена. Пациентов наблюдают после процедуры в течение 60-120 минут, а затем выписывают с соответствующими письменными инструкциями после процедуры, чтобы они периодически возвращались для клинического и лабораторного наблюдения в соответствии с протоколом, изложенным в анализе результатов. Целью этого исследования является сравнение продолжительности гормонального, клинического улучшения и улучшения качества жизни среди 3 групп исследования.

Для меньшинства участников исследования, у которых яичники недоступны для эндовагинального УЗИ, часть пациентов может нуждаться в использовании лапароскопического контроля. Во всех таких случаях вмешательства будут проводиться в условиях стационара, при этом исследователь подготавливает инъекцию, а гинеколог или другие подходящие хирурги-специалисты выполняют лапароскопическую процедуру, используя стандартные процедуры в качестве руководства.