Ovarieforyngelse ved bruk av blodplaterik plasma (PRP) og autolog vevsstromal vaskulær fraksjon (tSVF) og celleanriket tSVF (OVAR-REJUV)

Intra-ovarieplassering av blodplaterikt plasma (PRP) har allerede blitt vist i flere serier for å returnere peri-menopausale og tidlige postmenopausale hormonnivåer mot premenopausale nivåer og premenopausal syklisk atferd, til og med resulterer i graviditeter og leveringer av friske spedbarn. Hensikten med denne studien er å evaluere nytten av PRP for å forbedre hormonell status og klinisk symptomatologi hos peri-menopausale og tidlig postmenopausale kvinner, og hos kvinner med ikke-Turners for tidlig ovariesvikt, ved å dokumentere forbedringene i biokjemiske/hormonelle parametere , bentetthet og fysisk og mental helserelatert livskvalitet, samt å sammenligne varigheten og effektiviteten til denne PRP-prosedyren med intra-ovarieplassering av biocellulære fysiologisk aktive cellulære og cytokinelementer inneholdt i den fettvevsavledede Stromal Vascular Fraction (tSVF).

Det bør bemerkes at frekvensen av tap av bentetthet hos kvinner er maksimal i 12 måneder før og 24 måneder etter overgangsalderen. De absolutte og relative prosentvise mengder kroppsfett og muskler endres på ugunstige måter - med økende fett og fallende muskelmasse, med de mest dramatiske endringene også i overgangsperioden. Denne studien gir derfor potensialet til å dokumentere målbart opphør av bentetthetstap eller reduksjon i frekvens av bentetthetstap sammenlignet med veletablerte kjente mønstre og historiske kontroller som et resultat av de foreslåtte relativt ufarlige intervensjonene. Den samme teknologien som skal brukes for bentetthetsevaluering, enkeltfotonabsorptiometri, vil også bli brukt til å kvantifisere fett versus muskelkroppssammensetning ved baseline og 18 måneder.

SVF kan videre karakteriseres som enten cellulær SVF eller vevs-SVF (cSVF eller tSVF). Vevs-SVF (tSVF) oppnås ved et lite volum manuell lukket sprøyte-mikrokanyle-aspirasjon av subkutant fettvev (ca. 10+ teskjeer), etterfulgt av dekantering av lukket system for å fjerne infranatantvæskene etterfulgt av emulgering av resten til nødvendig grad av homogenitet og redusert partikkelstørrelse for å tillate injeksjon gjennom en konvensjonell nåleboring. Vevs-SVF er preget av retensjon av en andel av den ikke-cellulære matrisen av kollagene og fine vaskulære rester, som sammen danner en matrise som beholder og gir struktur til de biocellulære elementene som er innebygd i. Cellulær SVF (cSVF) begynner med samme mini-aspirasjon, men er preget av sentrifugering i lukket system, etterfulgt av enzymatisk fordøyelse for å isolere./konsentrere den cellulære SVF (cSVF). Etter enzymnøytralisering og skylling klargjøres det resulterende konsentratet av levedyktige stamceller/stromale kjerneceller for veiledet plassering i det ovarieparenkymale vevet. En prøve av hvert injektat testes og kvantifiseres ved bruk av standard laserstrømcytometri, inkludert levedyktighet og antall celler i hver prøve.

Studien inkluderer bruk av PRP (Emcyte II Pure PRP, Florida, USA) PRP i henhold til produsentens instruksjoner) alene som kontroll i første behandlingslem (ARM), som volumetrisk vil være det samme som de andre injiserte, for veiledet plassering dokumentert i eggstokkene . En sammenlignende andre ARM bestående av PRP vil bli kombinert med emulgert tSVF (Sterile Tulip Nanofat Disposable, San Diego, California (CA), USA). I en tredje ARM vil PRP pluss emulgert tSVF kombineres med både konsentrert cSVF. Denne armen skal bestemme effekten av høyere cellulær konsentrasjon enn oppnådd i andre ARM ved å bruke cellekonsentratene som oppnås ved bruk av Centricyte 1000 (Healeon Medical Inc, Newbury Park, CA, USA). De primære resultatene for hver av disse valgfrie prosedyrene vil bli sammenlignet og evaluert med hensyn til sikkerhet, klinisk effekt for å forbedre tilbakeføringen av ovariefunksjon for å bestemme den foretrukne metodikken for å oppnå maksimale resultater.

Baseline og overvåkede pasientkarakteristikker er som følger:

• Baseline status for alle pasienter vil bestemmes ved bruk av relevante biokjemiske indekser, inkludert serumnivåer av follikkelstimulerende hormon (FSH), anti-mullerian hormon (AMH), luteiniserende hormon (LH), østradiol (E2) og progesteron (PRG). Disse vil bli gjentatt etter 30 og 90 dager, og deretter hver 3. måned i ytterligere 15 måneder, totalt oppfølging 18 måneder. Omfattende blodpanel (SMA 12), fullstendig blodtelling (CBC), lipidprofiler og koagulasjonsindekser vil bli oppnådd ved baseline og gjentatt (uten koagulasjonsindekser) etter 12 måneder.
• Ettersom bentettheten begynner å avta med en betydelig hastighet i den peri-menopausale perioden, vil en bentetthetsbestemmelse med enkeltfotonabsorptiometri oppnås ved baseline, og igjen ved 12 og/eller 18 måneder. Kroppssammensetning fett/muskelproporsjoner vil bli evaluert med samme teknologi ved samme sitting.
• Fysisk og psykisk helserelatert livskvalitet vil bli evaluert med livskvalitetsundersøkelser ved baseline, 6 og 12 måneder.
• Ovarievolum vil bli vurdert ved baseline ved endovaginal sonografi, sammen med størrelsen og antall follikler som er tilstede, og deretter hver 6. måned.
• Journalregistrering av menstruasjonssykluser - frekvens/intervall, dager, og varighet.

I ARM 1 vil PRP alene plasseres i eggstokkene. I ARM 2 vil PRP bli kombinert med tSVF. I ARM 3 vil tSVF kombineres med både cSVF og PRP. Matchende volumer av injeksjonsvæske vil bli brukt i hver ARM for å unngå spørsmål om potensiell interferens til ovarieparenkym som påvirker resultatet på grunn av volumvariable effekter. De primære resultatene for hver av disse armene vil bli sammenlignet, og informere oss om en foretrukket metodikk for videre evaluering, og til slutt, klinisk praksis.

Autologous Platelet Rich Plasma er en etablert behandlingsmodalitet som bruker FDA-godkjente metoder og sett, og har utviklet seg til en moden behandlingsmodalitet for en rekke ortopediske og bløtvevspatologier. Som nevnt er dets sikkerhet og nytte ved foryngelse av eggstokkene og reversering av infertilitet allerede blitt etablert i fagfellevurderinger, saksserier.

Sikkerhet ved bruk av visse allogene humane mesenkymale stamceller (hMSC) har blitt foreslått og begrenset testet for effekt i noen tidligere studier. Produktene som er testet har variable protokoller for å isolere og dokumentere innhold og cellulære levedyktighet.

Autologe stam-stromale celler (inneholdt i cSVF) har blitt rapportert trygge og effektive i mange applikasjoner/studier og i kliniske studier som for tiden pågår i andre kroppssystemer og patologier. Disse cellene kan enkelt oppnås og isoleres/konsentreres i et lukket system fra pasientens fettavledede stromale vaskulære fraksjon (tSVF). Dette er viktig ettersom slikt vev er pasientens egne, genetisk unike celler og, i teorien, potensielt sikrere enn de allogene humane mesenkymale stamcellene (hMSCs) som potensielt er genetisk fremmede og bærer risikoen for kontaminering i prosessering og levering.

En kombinert tilnærming kan tillate implementering av et passende større antall celler, vekstfaktorer, eksosomer/mikrovesikler uten behov for kulturutvidelse.

Innholdet i cSVF inneholder en heterogen populasjon av ikke-utpekte (stammelignende) og støttende celler (stromal). Denne kombinasjonen av voksne, autologe celler, sammen med stromale celler, antas å tilby viktige terapeutiske og regenerative kvaliteter basert på cellulære differensieringsfunksjoner og parakrine (sekretoriske kommunikasjonssignaler og responser på nisje) i varierende grad. Det antas at slik signalering kan utgjøre kroppens egen mekanisme for homeostase og regenerering. Interaksjon av disse komplekse biokjemiske signalene foreslås for ytterligere å rekruttere eller aktivere reparative prosesser med interaksjon med de native vertscellene og vev. Videre kan denne reparative prosessen bli viktige spesifikke vertsaktiviteter og behov på stedet der den terapeutiske kombinasjonen er plassert. De nøyaktige mekanismene som ligger til grunn for disse reparative prosessene er under intensive undersøkelser.

I alle tilfeller vil blodplater og biocellulære materialer for intra-ovarieinjeksjon bli plassert under konvensjonell avbildningsveiledning ved bruk av endovaginal sonografi. Spesialdesignede modifiserte nåler vil bli brukt for å nøyaktig levere de biologiske produktene til det målrettede intra-ovarie parenkymale vevet. Metoden som kreves er totalt sett veldig lik uthenting av oocytter i infertilitetsbehandlinger, som utføres over hele verden, med minimal risiko for uønskede effekter millioner av ganger hvert år.

Prosedyrene er kjent for å resultere i minimalt ubehag, med pasientforberedelser som varierer fra ingen til mild støttende anxiolyse. Eventuelle smerter etter prosedyren kan behandles effektivt med acetaminophen. Pasientene observeres etter prosedyren i 60-120 minutter, og utskrives deretter med passende skriftlige instruksjoner etter prosedyren for å periodisk returnere for klinisk oppfølging og laboratorieoppfølging i henhold til protokollen skissert i resultatanalysen. Målet med denne studien søker å sammenligne varigheten av hormonell, klinisk og livskvalitetsforbedring blant de tre delene av studien.

For minoriteten av studiedeltakerne hvor eggstokkene ikke er lett tilgjengelige med endovaginal ultralyd, kan en undergruppe av pasienter kreve bruk av laparoskopisk veiledning. I alle slike tilfeller vil intervensjonene finne sted i sykehusmiljøer, med etterforskeren som forbereder injeksjonen og gynekologiske eller andre egnede spesialistkirurger som utfører den laparoskopiske prosedyren ved å bruke standardprosedyrer som veiledning.