Rajeunissement ovarien à l'aide de plasma riche en plaquettes (PRP) et de fraction vasculaire stromale de tissu autologue (tSVF) et de tSVF enrichi en cellules (OVAR-REJUV)

Le placement intra-ovarien de plasma riche en plaquettes (PRP) a déjà été démontré dans plusieurs séries pour ramener les niveaux d'hormones péri-ménopausiques et post-ménopausiques précoces vers les niveaux pré-ménopausiques et le comportement cyclique pré-ménopausique, entraînant même des grossesses et des accouchements sains. nourrissons. Le but de cet essai est d'évaluer l'utilité du PRP pour améliorer le statut hormonal et la symptomatologie clinique chez les femmes en péri-ménopause et en début de post-ménopause, et chez les femmes atteintes d'insuffisance ovarienne prématurée autre que Turner, en documentant les améliorations des paramètres biochimiques/hormonaux , la densité osseuse et la qualité de vie liée à la santé physique et mentale, ainsi que la comparaison de la durée et de l'efficacité de cette procédure PRP avec le placement intra-ovarien d'éléments cellulaires et de cytokines biocellulaires physiologiquement actifs contenus dans la fraction vasculaire stromale dérivée du tissu adipeux (tSVF).

Il convient de noter que le taux de perte de densité osseuse chez les femmes est maximal dans les 12 mois précédant et 24 mois après la ménopause. Les pourcentages absolus et relatifs de graisse corporelle et de muscle changent de manière défavorable - avec l'augmentation de la graisse et la chute de la masse musculaire, les changements les plus spectaculaires se produisant également pendant la période de transition ménopausique. Cette étude offre donc la possibilité de documenter l'arrêt mesurable de la perte de densité osseuse ou la réduction du taux de perte de densité osseuse par rapport aux modèles connus bien établis et aux contrôles historiques à la suite des interventions proposées relativement inoffensives. La même technologie qui sera utilisée pour l'évaluation de la densité osseuse, l'absorptiométrie à photon unique, sera également utilisée pour quantifier la graisse par rapport à la composition corporelle musculaire au départ et à 18 mois.

Le SVF peut en outre être caractérisé comme SVF cellulaire ou SVF tissulaire (cSVF ou tSVF). Le tissu SVF (tSVF) est obtenu par une microcanule d'aspiration manuelle à seringue fermée de petit volume de tissu adipeux sous-cutané (environ 10 cuillères à café), suivie d'une décantation en système fermé pour éliminer les fluides infranatants, suivie d'une émulsification du reste au degré d'homogénéité requis et taille de particules réduite pour permettre l'injection à travers des alésages d'aiguille de jauge conventionnels. Le SVF tissulaire est caractérisé par la rétention d'une proportion de la matrice non cellulaire de restes vasculaires collagéniques et fins, qui forment ensemble une matrice qui retient et structure les éléments biocellulaires qui y sont intégrés. Le SVF cellulaire (cSVF) commence par la même mini-aspiration, mais se caractérise par une centrifugation en système fermé, suivie d'une digestion enzymatique pour isoler/concentrer le SVF cellulaire (cSVF). Suite à la neutralisation enzymatique et au rinçage, le concentré résultant de cellules nucléées souches/stromales viables est préparé pour un placement guidé dans le tissu parenchymateux ovarien. Un échantillon de chaque injectat est testé et quantifié à l'aide de la cytométrie en flux laser standard, y compris la viabilité et le nombre de cellules dans chaque échantillon.

L'étude comprend l'utilisation de PRP (Emcyte II Pure PRP, Floride, États-Unis) PRP selon les instructions du fabricant) seul comme contrôle dans le premier membre de traitement (ARM), qui sera volumétriquement le même que les autres injectats, pour un placement guidé documenté dans les ovaires . Un deuxième ARM comparatif composé de PRP sera associé à du tSVF émulsionné (Sterile Tulip Nanofat Disposable, San Diego, Californie (CA), USA). Dans un troisième ARM, le PRP plus le tSVF émulsifié seront combinés avec les deux cSVF concentrés. Ce bras doit déterminer les effets d'une concentration cellulaire plus élevée que celle obtenue dans le deuxième ARM en utilisant les concentrés cellulaires obtenus en utilisant le Centricyte 1000 (Healeon Medical Inc, Newbury Park, CA, USA). Les principaux résultats pour chacune de ces procédures facultatives seront comparés et évalués quant à la sécurité, l'efficacité clinique dans l'amélioration du retour de la fonction ovarienne afin de déterminer la méthodologie préférée pour obtenir des résultats maximaux.

Les caractéristiques initiales et surveillées des patients sont les suivantes :

• Le statut de base de tous les patients sera déterminé à l'aide d'indices biochimiques pertinents, y compris les taux sériques d'hormone folliculo-stimulante (FSH), d'hormone anti-mullérienne (AMH), d'hormone lutéinisante (LH), d'estradiol (E2) et de progestérone (PRG). Ceux-ci seront répétés à 30 et 90 jours, puis tous les 3 mois pendant 15 mois supplémentaires, suivi total de 18 mois. Le bilan sanguin complet (SMA 12), la formule sanguine complète (CBC), les profils lipidiques et les indices de coagulation seront obtenus au départ et répétés (sans indices de coagulation) à 12 mois.
• Comme la densité osseuse commence à diminuer à un rythme significatif dans la période péri-ménopausique, une détermination de la densité osseuse avec absorptiométrie à photon unique sera obtenue au départ, puis à nouveau à 12 et/ou 18 mois. Les proportions graisse/muscle de la composition corporelle seront évaluées avec la même technologie à la même séance.
• La qualité de vie liée à la santé physique et mentale sera évaluée avec les enquêtes de qualité de vie au départ, 6 et 12 mois.
• Le volume ovarien sera évalué au départ par échographie endovaginale, ainsi que la taille et le nombre de follicules présents, puis tous les 6 mois.
• Journal d'enregistrement des cycles menstruels - fréquence/intervalle, jours et durée.

Dans ARM 1, le PRP seul sera placé dans les ovaires. Dans ARM 2, le PRP sera combiné avec le tSVF. Dans ARM 3, le tSVF sera combiné avec le cSVF et le PRP. Des volumes correspondants d'injectat seront utilisés dans chaque ARM pour éviter toute question d'interférence potentielle avec le parenchyme ovarien ayant un impact sur le résultat en raison d'effets variables de volume. Les principaux résultats pour chacun de ces bras seront comparés, nous informant d'une méthodologie préférée pour une évaluation plus approfondie et, finalement, la pratique clinique.

Le plasma riche en plaquettes autologue est une modalité de traitement établie qui utilise des méthodologies et des kits approuvés par la FDA, et s'est développée en une modalité de traitement mature pour une variété de pathologies orthopédiques et des tissus mous. Comme indiqué, sa sécurité et son utilité dans le rajeunissement ovarien et l'inversion de l'infertilité ont déjà été établies dans des séries de cas évaluées par des pairs.

La sécurité d'utilisation de certaines cellules souches mésenchymateuses humaines allogéniques (CSMh) a été proposée et testée de manière limitée pour l'efficacité dans certaines études antérieures. Les produits testés ont des protocoles variables pour isoler et documenter le contenu et les viabilités cellulaires.

Les cellules souches stromales autologues (contenues dans le cSVF) ont été signalées comme sûres et efficaces dans de nombreuses applications/études et dans des essais cliniques actuellement en cours dans d'autres systèmes et pathologies de l'organisme. Ces cellules sont facilement obtenues et isolées/concentrées dans un système fermé à partir de la fraction vasculaire stromale dérivée du tissu adipeux (tSVF) du patient. Ceci est important car ces tissus sont les propres cellules génétiquement uniques du patient et, en théorie, potentiellement plus sûrs que les cellules souches mésenchymateuses humaines allogéniques (CSMh) qui sont potentiellement génétiquement étrangères et présentent un risque de contamination lors du traitement et de la livraison.

Une approche combinée peut permettre la mise en œuvre d'un nombre convenablement plus grand de cellules, de facteurs de croissance, d'exosomes/microvésicules sans avoir besoin d'expansion de culture.

Le contenu du cSVF contient une population hétérogène de cellules non désignées (souches) et de soutien (stromales). Cette combinaison de cellules adultes autologues, ainsi que de cellules stromales, semble offrir d'importantes qualités thérapeutiques et régénératives basées sur les caractéristiques de différenciation cellulaire et la paracrine (signaux de communication sécrétoires et réponses à la niche) à des degrés divers. On pense qu'une telle signalisation peut constituer le propre mécanisme de l'organisme pour l'homéostasie et la régénération. L'interaction de ces signaux biochimiques complexes est proposée pour recruter ou activer davantage les processus de réparation avec interaction avec les cellules et tissus hôtes natifs. De plus, ce processus réparateur peut devenir des activités et des besoins spécifiques importants de l'hôte à l'endroit où la combinaison thérapeutique est placée. Les mécanismes précis qui sous-tendent ces processus de réparation font l'objet d'investigations intensives.

Dans tous les cas, les matériaux plaquettaires et biocellulaires pour l'injection intra-ovarienne seront placés sous guidage d'imagerie conventionnelle utilisant l'échographie endovaginale. Des aiguilles modifiées spécialement conçues seront utilisées pour administrer avec précision les produits biologiques aux tissus parenchymateux intra-ovariens ciblés. La méthodologie requise est globalement très similaire à la récupération des ovocytes dans les traitements de l'infertilité, qui sont pratiqués dans le monde entier, avec un risque minimal d'effets indésirables des millions de fois chaque année.

Les procédures sont connues pour entraîner un minimum d'inconfort, la préparation du patient variant d'aucune à une légère anxiolyse de soutien. La douleur post-intervention, le cas échéant, peut être efficacement gérée avec de l'acétaminophène. Les patients sont observés après la procédure pendant 60 à 120 minutes, puis renvoyés avec des instructions écrites post-procédure appropriées pour revenir périodiquement pour un suivi clinique et de laboratoire conformément au protocole décrit dans l'analyse des résultats. L'objectif de cette étude vise à comparer la durée de l'amélioration hormonale, clinique et de la qualité de vie entre les 3 bras de l'étude.

Pour la minorité de participantes à l'étude chez qui les ovaires ne sont pas facilement accessibles par échographie endovaginale, un sous-ensemble de patientes peut nécessiter l'utilisation d'un guidage laparoscopique. Dans tous ces cas, les interventions auront lieu en milieu hospitalier, l'enquêteur préparant l'injectat et les chirurgiens gynécologiques ou autres spécialistes appropriés effectuant la procédure laparoscopique en utilisant les procédures standard comme guide.