Ovariële verjonging met behulp van bloedplaatjesrijk plasma (PRP) & autoloog weefsel Stromale vasculaire fractie (tSVF) en celverrijkte tSVF (OVAR-REJUV)

Het is al in verschillende series aangetoond dat intra-ovariële plaatsing van bloedplaatjesrijk plasma (PRP) de peri-menopauzale en vroege postmenopauzale hormoonspiegels terugbrengt naar premenopauzale niveaus en premenopauzaal cyclisch gedrag, zelfs resulterend in zwangerschappen en bevallingen van gezonde zuigelingen. De bedoeling van deze studie is om het nut van PRP te evalueren om de hormonale status en klinische symptomatologie te verbeteren bij vrouwen in de peri-menopauzale en vroege postmenopauze, en bij vrouwen met niet-Turner's premature ovariële insufficiëntie, door de verbeteringen in biochemische/hormonale parameters te documenteren. , botdichtheid en fysieke en mentale gezondheidsgerelateerde kwaliteit van leven, evenals het vergelijken van de duur en effectiviteit van deze PRP-procedure met de intra-ovariële plaatsing van biocellulaire fysiologisch actieve cellulaire en cytokine-elementen in de van vetweefsel afgeleide stromale vasculaire fractie (tSVF).

Opgemerkt moet worden dat het verlies aan botdichtheid bij vrouwen maximaal is in de 12 maanden voorafgaand aan en 24 maanden na de menopauze. De absolute en relatieve procentuele hoeveelheden lichaamsvet en spieren veranderen op een ongunstige manier - met toenemend vet en afnemende spiermassa, waarbij de meest dramatische veranderingen ook optreden in de overgangsperiode van de menopauze. Deze studie biedt daarom de mogelijkheid om meetbare stopzetting van botdichtheidsverlies of vermindering van botdichtheidsverlies te documenteren in vergelijking met gevestigde bekende patronen en historische controles als resultaat van de voorgestelde relatief onschadelijke interventies. Dezelfde technologie die wordt gebruikt voor de evaluatie van de botdichtheid, single photon absorptiometry, zal ook worden gebruikt om de samenstelling van het vet versus de spiermassa te kwantificeren bij baseline en na 18 maanden.

SVF kan verder worden gekarakteriseerd als ofwel cellulaire SVF ofwel weefsel-SVF (cSVF of tSVF). Weefsel-SVF (tSVF) wordt verkregen door een manueel gesloten injectiespuit met een klein volume, microcanule-aspiratie van onderhuids vetweefsel (ongeveer 10+ theelepels), gevolgd door decanteren in een gesloten systeem om de infraantante vloeistoffen te verwijderen, gevolgd door emulgering van het overblijfsel tot de vereiste mate van homogeniteit en verkleinde deeltjesgrootte om injectie mogelijk te maken via naaldboringen met een conventionele meter. Weefsel-SVF wordt gekenmerkt door het vasthouden van een deel van de niet-cellulaire matrix van collagene en fijne vasculaire overblijfselen, die samen een matrix vormen die de biocellulaire elementen die erin zijn ingebed vasthoudt en structuur geeft. Cellulaire SVF (cSVF) begint met dezelfde mini-aspiratie, maar wordt gekenmerkt door centrifugatie in een gesloten systeem, gevolgd door enzymatische digestie om de cellulaire SVF (cSVF) te isoleren/concentreren. Na enzymneutralisatie en spoelen wordt het resulterende concentraat van levensvatbare stam-/stromakerncellen voorbereid voor geleide plaatsing in het parenchymale weefsel van de eierstokken. Een monster van elk injectaat wordt getest en gekwantificeerd met behulp van standaard laserflowcytometrie, inclusief levensvatbaarheid en aantal cellen in elk monster.

De studie omvat het gebruik van alleen PRP (Emcyte II Pure PRP, Florida, VS) PRP volgens de instructies van de fabrikant als controle in de eerste behandelingsledemaat (ARM), die volumetrisch hetzelfde zal zijn als de andere injecties, voor geleide plaatsing gedocumenteerd in de eierstokken . Een vergelijkende tweede ARM bestaande uit PRP zal worden gecombineerd met geëmulgeerd tSVF (Sterile Tulip Nanofat Disposable, San Diego, Californië (CA), VS). In een derde ARM wordt PRP plus geëmulgeerd tSVF gecombineerd met beide geconcentreerde cSVF. Deze arm is bedoeld om effecten te bepalen van een hogere cellulaire concentratie dan bereikt in de tweede ARM met behulp van de cellulaire concentraten die worden bereikt met behulp van de Centricyte 1000 (Healeon Medical Inc, Newbury Park, CA, VS). De primaire resultaten voor elk van deze optionele procedures zullen worden vergeleken en geëvalueerd wat betreft veiligheid, klinische werkzaamheid bij het verbeteren van het herstel van de ovariële functie om de geprefereerde methodologie te bepalen om maximale resultaten te bereiken.

Basislijn en bewaakte patiëntkenmerken zijn als volgt:

• De basislijnstatus van alle patiënten wordt bepaald aan de hand van relevante biochemische indices, waaronder serumspiegels van follikelstimulerend hormoon (FSH), antimulleriaans hormoon (AMH), luteïniserend hormoon (LH), estradiol (E2) en progesteron (PRG). Deze worden na 30 en 90 dagen herhaald, en vervolgens elke 3 maanden gedurende nog eens 15 maanden, totale follow-up 18 maanden. Uitgebreid bloedpanel (SMA 12), compleet bloedbeeld (CBC), lipidenprofielen en stollingsindices worden verkregen bij baseline en herhaald (zonder stollingsindices) na 12 maanden.
• Aangezien de botdichtheid aanzienlijk begint af te nemen in de peri-menopauzale periode, zal een bepaling van de botdichtheid met enkelvoudige fotonenabsorptiometrie worden verkregen bij aanvang en opnieuw na 12 en/of 18 maanden. Lichaamssamenstelling vet/spierverhoudingen worden geëvalueerd met dezelfde technologie tijdens dezelfde zitting.
• Aan de lichamelijke en geestelijke gezondheid gerelateerde kwaliteit van leven zal worden geëvalueerd met de kwaliteit van leven-enquêtes bij baseline, 6 en 12 maanden.
• Het ovariumvolume zal bij baseline worden beoordeeld door middel van endovaginale echografie, samen met de grootte en het aantal aanwezige follikels, en vervolgens elke 6 maanden.
• Journaalregistratie van menstruatiecycli - frequentie/interval, dagen en duur.

In ARM 1 wordt alleen PRP in de eierstokken geplaatst. In ARM 2 wordt PRP gecombineerd met tSVF. In ARM 3 wordt tSVF gecombineerd met zowel cSVF als PRP. In elke ARM zullen overeenkomende volumes van het injectaat worden gebruikt om te voorkomen dat mogelijke interferentie met het ovariumparenchym het resultaat beïnvloedt als gevolg van volumevariabele effecten. De primaire uitkomsten voor elk van deze armen zullen worden vergeleken, wat ons informeert over een geprefereerde methodologie voor verdere evaluatie, en uiteindelijk de klinische praktijk.

Autoloog bloedplaatjesrijk plasma is een gevestigde behandelingsmodaliteit die gebruikmaakt van door de FDA goedgekeurde methodologieën en kits, en heeft zich ontwikkeld tot een volwassen behandelingsmodaliteit voor een verscheidenheid aan orthopedische en weke delen pathologieën. Zoals opgemerkt, is de veiligheid en het nut ervan bij ovariële verjonging en omkering van onvruchtbaarheid al vastgesteld in door collega's beoordeelde casusreeksen.

De veiligheid van het gebruik van bepaalde allogene menselijke mesenchymale stamcellen (hMSC) is in sommige eerdere onderzoeken voorgesteld en beperkt getest op werkzaamheid. De geteste producten hebben variabele protocollen voor het isoleren en documenteren van inhoud en cellulaire levensvatbaarheid.

Autologe stam-stromale cellen (opgenomen in cSVF) zijn als veilig en effectief gemeld in veel toepassingen/studies en in klinische onderzoeken die momenteel worden uitgevoerd in andere lichaamssystemen en pathologieën. Deze cellen worden gemakkelijk verkregen en geïsoleerd/geconcentreerd in een gesloten systeem uit de van vetweefsel afgeleide stromale vasculaire fractie (tSVF) van de patiënt. Dit is belangrijk omdat dergelijke weefsels de eigen, genetisch unieke cellen van de patiënt zijn en in theorie potentieel veiliger zijn dan de allogene menselijke mesenchymale stamcellen (hMSC's), die potentieel genetisch vreemd zijn en het risico van besmetting bij verwerking en levering met zich meebrengen.

Een gecombineerde aanpak kan de implementatie mogelijk maken van een geschikt groter aantal cellen, groeifactoren, exosomen/microvesicles zonder dat cultuuruitbreiding nodig is.

De inhoud van de cSVF bevat een heterogene populatie van niet-aangeduide (stengelachtige) en ondersteunende cellen (stromale cellen). Er wordt aangenomen dat deze combinatie van volwassen, autologe cellen, samen met stromale cellen, in verschillende mate belangrijke therapeutische en regeneratieve eigenschappen biedt op basis van cellulaire differentiatiekenmerken en de paracriene (secretoire communicatiesignalen en reacties op niche). Er wordt aangenomen dat een dergelijke signalering het lichaamseigen mechanisme voor homeostase en regeneratie kan vormen. Interactie van deze complexe biochemische signalen wordt voorgesteld om herstelprocessen verder te rekruteren of te activeren met interactie met de natieve gastheercellen en -weefsels. Bovendien kan dit herstelproces belangrijke specifieke gastheeractiviteiten en -behoeften worden op de locatie waar de therapeutische combinatie wordt geplaatst. De precieze mechanismen die ten grondslag liggen aan deze herstelprocessen worden intensief onderzocht.

In alle gevallen zullen de bloedplaatjes en biocellulaire materialen voor intra-ovariële injectie onder conventionele beeldvormende begeleiding worden geplaatst met behulp van endovaginale echografie. Speciaal ontworpen gemodificeerde naalden zullen worden gebruikt om de biologische producten nauwkeurig af te leveren aan de beoogde intra-ovarium parenchymale weefsels. De vereiste methodologie lijkt over het algemeen sterk op het ophalen van eicellen bij onvruchtbaarheidsbehandelingen, die wereldwijd miljoenen keren per jaar worden uitgevoerd, met minimaal risico op nadelige effecten.

Het is bekend dat de procedures resulteren in minimaal ongemak, waarbij de voorbereiding van de patiënt varieert van geen tot milde ondersteunende anxiolyse. Eventuele pijn na de procedure kan effectief worden behandeld met paracetamol. Patiënten worden na de procedure gedurende 60-120 minuten geobserveerd en vervolgens ontslagen met geschikte schriftelijke instructies na de procedure om periodiek terug te keren voor klinische en laboratoriumcontrole volgens het protocol beschreven in de uitkomstenanalyse. Het doel van deze studie is om de duur van hormonale, klinische en kwaliteit van leven verbetering tussen de 3 armen van de studie te vergelijken.

Voor de minderheid van studiedeelnemers bij wie eierstokken niet gemakkelijk toegankelijk zijn met endovaginale echografie, kan een subgroep van patiënten laparoscopische begeleiding nodig hebben. In al deze gevallen vinden de ingrepen plaats in een ziekenhuisomgeving, waarbij de onderzoeker het injectaat voorbereidt en gynaecologische of andere geschikte gespecialiseerde chirurgen de laparoscopische procedure uitvoeren met standaardprocedures als leidraad.