Rejuvenecimiento ovárico con plasma rico en plaquetas (PRP) y fracción vascular del estroma de tejido autólogo (tSVF) y tSVF enriquecido con células (OVAR-REJUV)

Ya se ha demostrado en varias series que la colocación intraovárica de plasma rico en plaquetas (PRP) devuelve los niveles de hormonas perimenopáusicas y posmenopáusicas tempranas a los niveles premenopáusicos y al comportamiento cíclico premenopáusico, incluso dando como resultado embarazos y partos saludables. infantes La intención de este ensayo es evaluar la utilidad del PRP para mejorar el estado hormonal y la sintomatología clínica en mujeres perimenopáusicas y posmenopáusicas tempranas, y en mujeres con insuficiencia ovárica prematura no Turner, mediante la documentación de las mejoras en los parámetros bioquímicos/hormonales. , la densidad ósea y la calidad de vida relacionada con la salud física y mental, además de comparar la duración y la eficacia de este procedimiento de PRP con la colocación intraovárica de elementos celulares y citocinas biocelulares fisiológicamente activos contenidos en la Fracción Vascular Estromal derivada del tejido adiposo (tSVF).

Cabe señalar que la tasa de pérdida de densidad ósea en las mujeres es máxima en los 12 meses anteriores y 24 meses posteriores a la menopausia. Las cantidades porcentuales absolutas y relativas de grasa corporal y músculo cambian de manera adversa: aumenta la grasa y disminuye la masa muscular, y los cambios más dramáticos también ocurren en el período de transición a la menopausia. Por lo tanto, este estudio ofrece la posibilidad de documentar el cese medible de la pérdida de densidad ósea o la reducción de la tasa de pérdida de densidad ósea en comparación con patrones conocidos bien establecidos y controles históricos como resultado de las intervenciones relativamente inocuas propuestas. La misma tecnología que se usará para la evaluación de la densidad ósea, la absorciometría de fotón único, también se usará para cuantificar la composición corporal de grasa versus músculo al inicio ya los 18 meses.

La SVF se puede caracterizar además como SVF celular o SVF tisular (cSVF o tSVF). La SVF tisular (tSVF) se obtiene mediante una aspiración manual de microcánula con jeringa cerrada de pequeño volumen de tejido adiposo subcutáneo (aproximadamente 10+ cucharaditas), seguido de un sistema cerrado de decantación para eliminar los fluidos infranadantes seguido de la emulsificación del remanente hasta el grado requerido de homogeneidad y tamaño de partículas reducido para permitir la inyección a través de orificios de aguja de calibre convencional. La SVF tisular se caracteriza por la retención de una proporción de la matriz no celular de colágeno y restos vasculares finos, que juntos forman una matriz que retiene y proporciona estructura a los elementos biocelulares que están incrustados en su interior. El SVF celular (cSVF) comienza con la misma miniaspiración, pero se caracteriza por una centrifugación en sistema cerrado, seguida de digestión enzimática para aislar/concentrar el SVF celular (cSVF). Después de la neutralización enzimática y el enjuague, el concentrado resultante de células nucleadas estromales/troncales viables se prepara para su colocación guiada en el tejido del parénquima ovárico. Se analiza y cuantifica una muestra de cada inyectado mediante citometría de flujo láser estándar, incluida la viabilidad y el número de células dentro de cada muestra.

El estudio incluye el uso de PRP (Emcyte II Pure PRP, Florida, EE. UU.) PRP según las instrucciones del fabricante) solo como control en el primer segmento de tratamiento (ARM), que volumétricamente será igual que los otros inyectados, para la colocación guiada documentada dentro de los ovarios . Un segundo ARM comparativo compuesto por PRP se combinará con tSVF emulsionado (Sterile Tulip Nanofat desechable, San Diego, California (CA), EE. UU.). En un tercer ARM, se combinará PRP más tSVF emulsionado con ambos cSVF concentrados. Este brazo es para determinar los efectos de una concentración celular más alta que la lograda en el segundo ARM usando los concentrados celulares logrados usando Centricyte 1000 (Healeon Medical Inc, Newbury Park, CA, EE. UU.). Los resultados primarios de cada uno de estos procedimientos opcionales se compararán y evaluarán en cuanto a seguridad y eficacia clínica para mejorar el retorno de la función ovárica para determinar la metodología preferida para lograr los máximos resultados.

Las características basales y monitoreadas de los pacientes son las siguientes:

• El estado inicial de todos los pacientes se determinará utilizando índices bioquímicos relevantes, incluidos los niveles séricos de hormona estimulante del folículo (FSH), hormona antimülleriana (AMH), hormona luteinizante (LH), estradiol (E2) y progesterona (PRG). Estos se repetirán a los 30 y 90 días, y luego cada 3 meses durante 15 meses adicionales, con un seguimiento total de 18 meses. El panel completo de sangre (SMA 12), el conteo sanguíneo completo (CBC), los perfiles de lípidos y los índices de coagulación se obtendrán al inicio y se repetirán (sin índices de coagulación) a los 12 meses.
• A medida que la densidad ósea comienza a disminuir a un ritmo significativo en el período perimenopáusico, se obtendrá una determinación de la densidad ósea con absorciometría de fotón único al inicio y nuevamente a los 12 y/o 18 meses. Las proporciones de grasa/músculo de la composición corporal se evaluarán con la misma tecnología en la misma sesión.
• La calidad de vida relacionada con la salud física y mental se evaluará con las encuestas de calidad de vida al inicio, a los 6 y 12 meses.
• El volumen ovárico se evaluará al inicio mediante ecografía endovaginal, junto con el tamaño y la cantidad de folículos presentes, y luego cada 6 meses.
• Registro diario de ciclos menstruales: frecuencia/intervalo, días y duración.

En ARM 1, solo se colocará PRP dentro de los ovarios. En ARM 2, PRP se combinará con tSVF. En ARM 3, tSVF se combinará con cSVF y PRP. Se utilizarán volúmenes equivalentes de inyectado en cada ARM para evitar la cuestión de la posible interferencia con el parénquima ovárico que afecte el resultado debido a los efectos de la variable de volumen. Se compararán los resultados primarios de cada uno de estos brazos, lo que nos informará sobre una metodología preferida para una evaluación adicional y, en última instancia, para la práctica clínica.

El plasma rico en plaquetas autólogo es una modalidad de tratamiento establecida que utiliza metodologías y kits aprobados por la FDA, y se ha convertido en una modalidad de tratamiento madura para una variedad de patologías ortopédicas y de tejidos blandos. Como se señaló, su seguridad y utilidad en el rejuvenecimiento ovárico y la reversión de la infertilidad ya se han establecido en series de casos revisadas por pares.

Se ha propuesto la seguridad del uso de ciertas células madre mesenquimales humanas alogénicas (hMSC) y se ha probado de forma limitada su eficacia en algunos estudios anteriores. Los productos probados tienen protocolos variables para aislar y documentar el contenido y las viabilidades celulares.

Se ha informado que las células estromales autólogas (contenidas en cSVF) son seguras y eficaces en muchas aplicaciones/estudios y en ensayos clínicos actualmente en curso en otros sistemas y patologías corporales. Estas células se obtienen fácilmente y se aíslan/concentran en un sistema cerrado a partir de la fracción vascular estromal derivada de tejido adiposo (tSVF) del paciente. Esto es importante ya que tales tejidos son células genéticamente únicas del propio paciente y, en teoría, potencialmente más seguras que las células madre mesenquimales humanas alogénicas (hMSC), que son potencialmente genéticamente extrañas y conllevan el riesgo de contaminación durante el procesamiento y la entrega.

Un enfoque combinado puede permitir la implementación de un número adecuadamente mayor de células, factores de crecimiento, exosomas/microvesículas sin necesidad de expansión del cultivo.

El contenido del cSVF contiene una población heterogénea de células no designadas (tipo tallo) y de apoyo (estromal). Se considera que esta combinación de células adultas autólogas, junto con células del estroma, ofrece importantes cualidades terapéuticas y regenerativas basadas en características de diferenciación celular y paracrinas (señales de comunicación secretoras y respuestas al nicho) en diversos grados. Se cree que dicha señalización puede constituir el propio mecanismo del cuerpo para la homeostasis y la regeneración. Se propone la interacción de estas señales bioquímicas complejas para reclutar o activar más procesos reparativos con la interacción con las células y tejidos nativos del huésped. Además, este proceso reparador puede convertirse en importantes actividades y necesidades específicas del huésped en el lugar en el que se coloca la combinación terapéutica. Los mecanismos precisos que subyacen a estos procesos de reparación están bajo intensas investigaciones.

En todos los casos, las plaquetas y los materiales biocelulares para la inyección intraovárica se colocarán bajo la guía de imágenes convencionales utilizando ecografía endovaginal. Se utilizarán agujas modificadas especialmente diseñadas para administrar con precisión los productos biológicos a los tejidos parenquimatosos intraováricos objetivo. La metodología requerida es muy similar en general a la recuperación de ovocitos en los tratamientos de infertilidad, que se realizan en todo el mundo, con un riesgo mínimo de efectos adversos millones de veces al año.

Se sabe que los procedimientos provocan una incomodidad mínima, y ​​la preparación del paciente varía de ninguna a ansiolisis de apoyo leve. El dolor posterior al procedimiento, si lo hay, puede controlarse eficazmente con paracetamol. Se observa a los pacientes después del procedimiento durante 60 a 120 minutos y luego se les da de alta con instrucciones escritas adecuadas después del procedimiento para que regresen periódicamente para el seguimiento clínico y de laboratorio según el protocolo descrito en el análisis de resultados. El objetivo de este estudio busca comparar la duración de la mejora hormonal, clínica y de calidad de vida entre los 3 brazos del estudio.

Para la minoría de participantes del estudio en quienes los ovarios no son fácilmente accesibles mediante ultrasonido endovaginal, un subconjunto de pacientes puede requerir el uso de guía laparoscópica. En todos estos casos, las intervenciones se llevarán a cabo en entornos hospitalarios, con el investigador preparando el inyectado y ginecólogos u otros cirujanos especialistas adecuados realizando el procedimiento laparoscópico utilizando procedimientos estándar como guía.