多血小板血漿 (PRP) と自己組織間質血管画分 (tSVF) および細胞濃縮 tSVF を使用した卵巣の若返り (OVAR-REJUV)

多血小板血漿（PRP）を卵巣内に配置すると、閉経前および閉経前の周期的行動に向けて、閉経前後および閉経後早期のホルモンレベルを戻すことがすでにいくつかのシリーズで実証されています。幼児。 この試験の目的は、生化学的/ホルモンパラメータの改善を記録することにより、閉経周辺期および閉経後早期の女性、および非ターナー早期卵巣不全の女性のホルモン状態および臨床症状を改善するための PRP の有用性を評価することです。 、骨密度、身体的および精神的健康に関連する生活の質、ならびにこの PRP 手順の持続時間と有効性を、脂肪組織由来の間質血管画分に含まれる生体細胞の生理学的に活性な細胞およびサイトカイン要素の卵巣内配置と比較します。 (tSVF)。

女性の骨密度の減少率は、閉経前の 12 か月と閉経後の 24 か月で最大になることに注意してください。 体脂肪と筋肉の絶対的および相対的なパーセンテージ量は、逆方向に変化します。脂肪の増加と筋肉量の減少に伴い、閉経期の移行期にも最も劇的な変化が起こります. したがって、この研究は、提案された比較的無害な介入の結果として、十分に確立された既知のパターンおよび歴史的対照と比較して、骨密度損失の測定可能な停止または骨密度損失率の低下を記録する可能性を提供します。 骨密度の評価に使用されるのと同じ技術である単一光子吸収測定法も、ベースライン時および 18 か月時の筋肉体組成に対する脂肪の定量化に使用されます。

SVF は、細胞 SVF または組織 SVF (cSVF または tSVF) としてさらに特徴付けることができます。 組織 SVF (tSVF) は、皮下脂肪組織 (約 10 + ティースプーン) の少量の手動閉鎖シリンジ マイクロカニューレ吸引によって得られ、続いて閉鎖システムをデカントしてインフラナタント液を除去し、続いて残留物を必要な程度の均一性に乳化し、従来のゲージニードルボアからの注入を可能にするために粒子サイズを小さくしました。 組織 SVF は、コラーゲンと微細な血管の残骸の非細胞マトリックスの一部の保持によって特徴付けられます。これらは一緒になって、内部に埋め込まれた生体細胞要素に構造を保持および提供するマトリックスを形成します。 細胞ＳＶＦ（ｃＳＶＦ）は同じミニ吸引から始まるが、クローズドシステムの遠心分離、その後の酵素消化による細胞ＳＶＦ（ｃＳＶＦ）の分離／濃縮が特徴である。 酵素の中和とすすぎの後、結果として得られる生存可能な幹/間質有核細胞の濃縮物は、卵巣実質組織への誘導配置のために調製されます。 各注入液のサンプルは、各サンプル内の細胞の生存率と数を含む、標準的なレーザーフローサイトメトリーを使用してテストおよび定量化されます。

この研究には、PRP (Emcyte II Pure PRP、フロリダ州、米国) を最初の治療肢 (ARM) のコントロールとして単独で使用することが含まれます。これは、卵巣内に文書化されたガイド付き配置のために、体積的に他の注入物と同じになります。 . ＰＲＰから構成される比較用の第２のＡＲＭは、乳化ｔＳＶＦ（Ｓｔｅｒｉｌｅ Ｔｕｌｉｐ Ｎａｎｏｆａｔ Ｄｉｓｐｏｓａｂｌｅ、サンディエゴ、カリフォルニア（ＣＡ）、米国）と組み合わされる。 3 番目の ARM では、PRP と乳化した tSVF を両方の濃縮 cSVF と組み合わせます。 このアームは、Centricyte 1000 (Healeon Medical Inc, Newbury Park, CA, USA) を使用して達成された細胞濃縮物を使用して、2 番目の ARM で達成されたよりも高い細胞濃度の効果を決定するものです。 これらのオプションの手順のそれぞれの主要な結果を比較し、安全性、卵巣機能の回復を促進する臨床的有効性について評価して、最大の結果を達成するための好ましい方法を決定します。

ベースラインおよび監視対象の患者の特徴は次のとおりです。

• すべての患者のベースライン状態は、卵胞刺激ホルモン（FSH）、抗ミュラー管ホルモン（AMH）、黄体形成ホルモン（LH）、エストラジオール（E2）、およびプロゲステロン（PRG）の血清レベルを含む関連する生化学的指標を利用して決定されます。 これらは 30 日と 90 日で繰り返され、その後 3 か月ごとにさらに 15 か月、合計 18 か月のフォローアップが行われます。 総合血液パネル（SMA 12）、全血球計算（CBC）、脂質プロファイル、および凝固指数がベースラインで得られ、12か月で（凝固指数なしで）繰り返されます。
• 骨密度は閉経期にかなりの割合で低下し始めるため、単一光子吸収法による骨密度の測定は、ベースラインで得られ、12 および/または 18 か月で再び得られます。 体組成の脂肪/筋肉の割合は、同じ座り方で同じ技術で評価されます。
• 身体的および精神的健康に関連する生活の質は、ベースライン、6か月および12か月での生活の質調査で評価されます。
• 卵巣容積は、存在する卵胞のサイズと数とともに、膣内超音波検査によってベースラインで評価され、その後6か月ごとに評価されます。
• 月経周期のジャーナル記録 - 頻度/間隔、日数、期間。

ARM 1 では、PRP のみが卵巣内に配置されます。 ARM 2 では、PRP は tSVF と組み合わされます。 ARM 3 では、tSVF は cSVF と PRP の両方と組み合わされます。 一致した容量の注入物を各 ARM で使用して、容量変数の影響により結果に影響を与える卵巣実質への潜在的な干渉の問題を回避します。 これらの各アームの主要な結果が比較され、さらなる評価、そして最終的には臨床実践のための好ましい方法論が示されます。

自家多血小板血漿は、FDA 承認の方法論とキットを利用する確立された治療法であり、さまざまな整形外科および軟部組織の病理に対する成熟した治療法に発展しました。 前述のように、卵巣の若返りと不妊症の逆転におけるその安全性と有用性は、ピアレビューされたケースシリーズですでに確立されています.

特定の同種異系ヒト間葉系幹細胞 (hMSC) の使用の安全性が提案されており、以前のいくつかの研究で有効性が限定的にテストされています。 テストされた製品には、コンテンツと細胞生存率を分離して文書化するためのさまざまなプロトコルがあります。

自家幹細胞 (cSVF に含まれる) は、多くのアプリケーション/研究、および他の身体システムや病状で現在進行中の臨床試験において、安全で効果的であることが報告されています。 これらの細胞は、患者の脂肪由来間質血管画分 (tSVF) から容易に取得され、閉鎖系で分離/濃縮されます。 このような組織は患者自身の遺伝的にユニークな細胞であり、理論的には、遺伝的に異質である可能性があり、処理および送達における汚染のリスクを負う同種異系のヒト間葉系幹細胞 (hMSC) よりも潜在的に安全であるため、これは重要です。

組み合わせたアプローチにより、培養拡張を必要とせずに、適切に多数の細胞、成長因子、エキソソーム/マイクロベシクルを実装できる可能性があります。

cSVF の内容には、指定されていない (幹のような) 細胞と支持細胞 (間質) の不均一な集団が含まれています。 成人の自家細胞と間質細胞のこの組み合わせは、さまざまな程度で、細胞分化機能とパラクリン (分泌通信シグナルとニッチへの応答) に基づく重要な治療および再生品質を提供すると考えられています。 このようなシグナル伝達は、恒常性と再生のための身体独自のメカニズムを構成している可能性があると考えられています。 これらの複雑な生化学的シグナルの相互作用は、ネイティブの宿主細胞および組織との相互作用により、修復プロセスをさらに動員または活性化することが提案されています。 さらに、この修復プロセスは、治療的組み合わせが配置される場所で重要な特定の宿主の活動とニーズになる可能性があります。 これらの修復プロセスの根底にある正確なメカニズムは、集中的な調査中です。

すべての場合において、卵巣内注射用の血小板および生体細胞材料は、膣内超音波検査を利用した従来の画像誘導下に置かれます。 特別に設計された修正された針を使用して、生物学的産物を標的の卵巣実質組織に正確に送達します。 必要な方法論は、世界中で行われている不妊治療における卵母細胞の回収と全体的に非常に似ており、毎年何百万回も悪影響のリスクが最小限に抑えられています.

この手順は、不快感を最小限に抑えることが知られています。患者の準備は、なしから軽度の支持的不安解消までさまざまです。 術後の痛みがある場合は、アセトアミノフェンで効果的に管理できます。 患者は処置後60〜120分間観察され、その後、結果分析で概説されているプロトコルに従って、臨床および検査室のフォローアップのために定期的に戻るための適切な処置後の書面による指示とともに退院します。 この研究の目的は、研究の 3 つのアーム間で、ホルモン、臨床、および生活の質の改善の期間を比較することです。

膣内超音波で卵巣に容易にアクセスできない少数の研究参加者の場合、患者のサブセットは腹腔鏡ガイダンスの使用を必要とする場合があります。 そのようなすべての場合において、介入は病院の環境で行われ、治験責任医師が注射液を準備し、婦人科またはその他の適切な専門外科医が標準的な手順をガイダンスとして利用して腹腔鏡手術を行います。