Ovarieforyngelse ved hjælp af blodpladerigt plasma (PRP) og autolog vævsstromal vaskulær fraktion (tSVF) og celleberiget tSVF (OVAR-REJUV)

Intraovarieplacering af blodpladerigt plasma (PRP) er allerede blevet påvist i adskillige serier at vende tilbage peri-menopausale og tidlige postmenopausale hormonniveauer mod præmenopausale niveauer og præmenopausal cyklisk adfærd, hvilket endda resulterer i graviditeter og fødsler af raske spædbørn. Hensigten med dette forsøg er at evaluere nytten af ​​PRP til at forbedre hormonstatus og klinisk symptomatologi hos kvinder i peri-menopausale og tidlige postmenopausale kvinder og hos kvinder med ikke-Turners for tidlige ovariesvigt ved at dokumentere forbedringerne i biokemiske/hormonelle parametre. , knogletæthed og fysisk og mental sundhedsrelateret livskvalitet, samt sammenligning af varigheden og effektiviteten af ​​denne PRP-procedure med den intra-ovarieplacering af biocellulære fysiologisk aktive cellulære og cytokinelementer indeholdt i den fedtvævs-afledte Stromal Vascular Fraction (tSVF).

Det skal bemærkes, at hastigheden for tab af knogletæthed hos kvinder er maksimal i de 12 måneder før og 24 måneder efter overgangsalderen. De absolutte og relative procentvise mængder af kropsfedt og muskler ændrer sig på ugunstige måder - med stigende fedt og faldende muskelmasse, hvor de mest dramatiske ændringer også forekommer i overgangsalderen. Denne undersøgelse giver derfor potentialet til at dokumentere et målbart ophør af knogletæthedstab eller reduktion i hastigheden af ​​knogletæthedstab sammenlignet med veletablerede kendte mønstre og historiske kontroller som et resultat af de foreslåede relativt uskadelige indgreb. Den samme teknologi, der skal bruges til knogletæthedsevaluering, single photon absorptiometri, vil også blive brugt til at kvantificere fedt versus muskel kropssammensætning ved baseline og 18 måneder.

SVF kan yderligere karakteriseres som enten cellulær SVF eller vævs-SVF (cSVF eller tSVF). Vævs-SVF (tSVF) opnås ved en lille volumen manuel lukket sprøjte-mikrokanyle-aspiration af subkutant fedtvæv (ca. 10+ teskefulde), efterfulgt af lukket system-dekantering for at fjerne infranatante væsker efterfulgt af emulgering af remanensen til den nødvendige grad af homogenitet og reduceret partikelstørrelse for at tillade injektion gennem en konventionel nåleboring. Vævs-SVF er karakteriseret ved tilbageholdelse af en del af den ikke-cellulære matrix af kollagene og fine vaskulære rester, som tilsammen danner en matrix, der bevarer og giver struktur til de biocellulære elementer, der er indlejret i. Cellulær SVF (cSVF) begynder med den samme mini-aspiration, men er karakteriseret ved lukket system centrifugering, efterfulgt af enzymatisk fordøjelse for at isolere./koncentrere den cellulære SVF (cSVF). Efter enzymneutralisering og skylning forberedes det resulterende koncentrat af levedygtige stam-/stromale nukleerede celler til styret placering i ovarieparenkymvævet. En prøve af hvert injektat testes og kvantificeres ved hjælp af standard laserflowcytometri, herunder levedygtighed og antal celler i hver prøve.

Undersøgelsen inkluderer brug af PRP (Emcyte II Pure PRP, Florida, USA) PRP ifølge producentens instruktioner) alene som kontrol i første behandlingslem (ARM), som volumetrisk vil være det samme som de andre injektater, til guidet placering dokumenteret i æggestokkene . En sammenlignende anden ARM bestående af PRP vil blive kombineret med emulgeret tSVF (Sterile Tulip Nanofat Disposable, San Diego, Californien (CA), USA). I en tredje ARM vil PRP plus emulgeret tSVF blive kombineret med både koncentreret cSVF. Denne arm skal bestemme virkningerne af højere cellulær koncentration end opnået i anden ARM ved hjælp af de cellulære koncentrater opnået ved brug af Centricyte 1000 (Healeon Medical Inc, Newbury Park, CA, USA). De primære resultater for hver af disse valgfrie procedurer vil blive sammenlignet og evalueret med hensyn til sikkerhed, klinisk effektivitet til at forbedre tilbagevenden af ​​ovariefunktion for at bestemme den foretrukne metode til at opnå maksimale resultater.

Baseline og overvågede patientkarakteristika er som følger:

• Baselinestatus for alle patienter vil blive bestemt ved at bruge relevante biokemiske indekser, herunder serumniveauer af follikelstimulerende hormon (FSH), anti-mullerian hormon (AMH), luteiniserende hormon (LH), østradiol (E2) og progesteron (PRG). Disse vil blive gentaget efter 30 og 90 dage, og derefter hver 3. måned i yderligere 15 måneder, samlet opfølgning 18 måneder. Omfattende blodpanel (SMA 12), fuldstændig blodtælling (CBC), lipidprofiler og koagulationsindeks vil blive opnået ved baseline og gentaget (uden koagulationsindeks) efter 12 måneder.
• Efterhånden som knogletætheden begynder at falde med en signifikant hastighed i den peri-menopausale periode, opnås en knogletæthedsbestemmelse med enkeltfotonabsorptiometri ved baseline og igen efter 12 og/eller 18 måneder. Kropssammensætning fedt/muskel proportioner vil blive evalueret med den samme teknologi ved samme møde.
• Fysisk og mental sundhedsrelateret livskvalitet vil blive evalueret med livskvalitetsundersøgelser ved baseline, 6 og 12 måneder.
• Ovarievolumen vil blive vurderet ved baseline ved endovaginal sonografi sammen med størrelsen og antallet af tilstedeværende follikler og derefter hver 6. måned.
• Journalregistrering af menstruationscyklusser - hyppighed/interval, dage og varighed.

I ARM 1 vil PRP alene blive placeret i æggestokkene. I ARM 2 vil PRP blive kombineret med tSVF. I ARM 3 vil tSVF blive kombineret med både cSVF og PRP. Matchede mængder af injektat vil blive brugt i hver ARM for at undgå spørgsmålet om potentiel interferens med ovarieparenkym, der påvirker resultatet på grund af volumenvariable effekter. De primære resultater for hver af disse arme vil blive sammenlignet, hvilket informerer os om en foretrukken metode til yderligere evaluering og i sidste ende klinisk praksis.

Autologt blodpladerigt plasma er en etableret behandlingsmodalitet, som anvender FDA-godkendte metoder og kits, og har udviklet sig til en moden behandlingsmodalitet for en række ortopædiske og bløddelspatologier. Som nævnt er dets sikkerhed og anvendelighed ved ovarieforyngelse og reversering af infertilitet allerede blevet fastslået i peer reviewed case-serier.

Sikkerhed ved brug af visse allogene humane mesenchymale stamceller (hMSC) er blevet foreslået og begrænset testet for effektivitet i nogle tidligere undersøgelser. De testede produkter har variable protokoller til at isolere og dokumentere indhold og cellulære levedygtighed.

Autologe stam-stromale celler (indeholdt i cSVF) er blevet rapporteret sikre og effektive i mange applikationer/undersøgelser og i kliniske forsøg, der i øjeblikket er i gang med andre kropssystemer og patologier. Disse celler opnås let og isoleres/koncentreres i et lukket system fra patientens fedtafledte stromale vaskulære fraktion (tSVF). Dette er vigtigt, da sådanne væv er patientens egne, genetisk unikke celler og i teorien potentielt sikrere end de allogene humane mesenkymale stamceller (hMSC'er), som er potentielt genetisk fremmede og bærer risikoen for kontaminering ved behandling og levering.

En kombineret tilgang kan tillade implementering af et passende større antal celler, vækstfaktorer, exosomer/mikrovesikler uden behov for kulturudvidelse.

Indholdet af cSVF'et indeholder en heterogen population af udesignede (stamlignende) og støttende celler (stromale). Denne kombination af voksne, autologe celler, sammen med stromale celler, menes at tilbyde vigtige terapeutiske og regenerative kvaliteter baseret på cellulære differentieringsfunktioner og parakrine (sekretoriske kommunikationssignaler og reaktioner på niche) i varierende grader. Det menes, at sådan signalering kan udgøre kroppens egen mekanisme for homeostase og regenerering. Interaktion mellem disse komplekse biokemiske signaler foreslås for yderligere at rekruttere eller aktivere reparative processer med interaktion med de native værtsceller og væv. Desuden kan denne reparative proces blive vigtige specifikke værtsaktiviteter og behov på det sted, hvor den terapeutiske kombination er placeret. De præcise mekanismer, der ligger til grund for disse reparative processer, er under intensive undersøgelser.

I alle tilfælde vil blodpladerne og det biocellulære materiale til intraovarieinjektion blive placeret under konventionel billeddiagnostisk vejledning ved hjælp af endovaginal sonografi. Specielt designede modificerede nåle vil blive brugt til nøjagtig levering af de biologiske produkter til det målrettede intra-ovarie parenkymale væv. Den krævede metodik er overordnet meget lig med oocytudvinding i infertilitetsbehandlinger, som udføres over hele verden med minimal risiko for bivirkninger millioner af gange hvert år.

Procedurerne er kendt for at resultere i minimalt ubehag, idet patientens forberedelse varierer fra ingen til mild understøttende anxiolyse. Smerter efter proceduren, hvis nogen, kan behandles effektivt med acetaminophen. Patienterne observeres efter proceduren i 60-120 minutter og udskrives derefter med passende skriftlige instruktioner efter proceduren for periodisk at vende tilbage til klinisk og laboratorieopfølgning i henhold til protokol skitseret i resultatanalysen. Målet med denne undersøgelse søger at sammenligne varigheden af ​​hormonel, klinisk og livskvalitetsforbedringer blandt undersøgelsens 3 arme.

For mindretallet af undersøgelsesdeltagere, hvor æggestokkene ikke er let tilgængelige ved endovaginal ultralyd, kan en undergruppe af patienter kræve brug af laparoskopisk vejledning. I alle sådanne tilfælde vil indgrebene finde sted på hospitalsmiljøer, hvor investigatoren forbereder injektatet, og gynækologiske eller andre egnede specialistkirurger udfører den laparoskopiske procedure ved at bruge standardprocedurer som vejledning.