Munasarjojen nuorentaminen käyttämällä verihiutalerikasta plasmaa (PRP) ja autologista kudosta stromaalista vaskulaarista fraktiota (tSVF) ja solurikastettua tSVF:ää (OVAR-REJUV)

Verihiutalerikkaan plasman (PRP) munasarjansisäisen sijoittamisen on jo osoitettu useissa sarjoissa palauttavan vaihdevuosien ja varhaisen vaihdevuosien jälkeiset hormonitasot kohti vaihdevuodet edeltävää tasoa ja premenopausaalista syklistä käyttäytymistä, mikä johtaa jopa raskauksiin ja terveen synnytykseen. pikkulapsille. Tämän kokeen tarkoituksena on arvioida PRP:n hyödyllisyyttä hormonaalisen tilan ja kliinisten oireiden parantamisessa perimenopausaalisilla ja varhain postmenopausaalisilla naisilla sekä naisilla, joilla ei ole Turnerin ennenaikainen munasarjojen vajaatoiminta dokumentoimalla biokemiallisten/hormonaalisten parametrien parannukset. luun tiheydestä sekä fyysiseen ja henkiseen terveyteen liittyvästä elämänlaadusta sekä vertaamalla tämän PRP-toimenpiteen kestoa ja tehokkuutta rasvakudoksesta peräisin olevan stromaalisen vaskulaarifraktion sisältämien biosolujen fysiologisesti aktiivisten solu- ja sytokiinielementtien munasarjoihin. (tSVF).

On huomattava, että naisten luutiheyden vähenemisnopeus on suurin 12 kuukautta ennen vaihdevuosia ja 24 kuukautta sen jälkeen. Kehon rasvan ja lihasten absoluuttiset ja suhteelliset prosentuaaliset määrät muuttuvat haitallisilla tavoilla - rasvan lisääntyessä ja lihasmassan pienentyessä, ja dramaattisimmat muutokset tapahtuvat myös vaihdevuosien siirtymävaiheessa. Tämä tutkimus tarjoaa siksi mahdollisuuden dokumentoida mitattavissa oleva luun tiheyden väheneminen tai luun tiheyden vähenemisen nopeuden väheneminen verrattuna hyvin vakiintuneisiin tunnettuihin malleihin ja historiallisiin kontrolleihin ehdotettujen suhteellisen vaarattomien toimenpiteiden seurauksena. Samaa tekniikkaa, jota käytetään luun tiheyden arvioinnissa, yhden fotonin absorptiometriaa, käytetään myös rasvan ja lihasten kehon koostumuksen kvantifiointiin lähtötilanteessa ja 18 kuukauden kuluttua.

SVF voidaan edelleen luonnehtia joko solujen SVF:ksi tai kudos-SVF:ksi (cSVF tai tSVF). Kudos SVF (tSVF) saadaan pienen tilavuuden manuaalisella suljetulla ruiskulla mikrokanyylillä imemällä ihonalaista rasvakudosta (noin 10+ tl), mitä seuraa suljetussa järjestelmässä oleva dekantointi infranatanttinesteiden poistamiseksi, minkä jälkeen jäännös emulgoidaan vaadittuun homogeenisuusasteeseen ja pienempi hiukkaskoko mahdollistaakseen ruiskutuksen tavanomaisten neulanreikien läpi. Kudoksen SVF:lle on tunnusomaista, että osa ei-sellulaarisesta matriisista jää kollageenisista ja hienoista verisuonijäännöksistä, jotka yhdessä muodostavat matriisin, joka säilyttää ja muodostaa rakenteen sisälle upotetut biosoluelementit. Solujen SVF (cSVF) alkaa samalla miniimulla, mutta sille on ominaista suljetun järjestelmän sentrifugointi, jota seuraa entsymaattinen pilkkominen solun SVF:n (cSVF) eristämiseksi/konsentroimiseksi. Entsyymineutraloinnin ja huuhtelun jälkeen tuloksena oleva elävien kantasolujen/stromaalisolujen konsentraatti valmistetaan ohjattua sijoittamista varten munasarjan parenkymaaliskudokseen. Näyte kustakin injektiosta testataan ja kvantifioidaan käyttämällä standardia laservirtaussytometriaa, mukaan lukien elinkelpoisuus ja solujen lukumäärä kussakin näytteessä.

Tutkimus sisältää PRP:n (Emcyte II Pure PRP, Florida, USA) PRP:n käytön valmistajan ohjeiden mukaan) yksinään kontrollina ensimmäisessä hoitoraajassa (ARM), joka on tilavuudeltaan sama kuin muut injektiot, ohjatussa sijoittelussa, joka dokumentoidaan munasarjoihin. . Vertaileva toinen PRP:stä koostuva ARM yhdistetään emulgoituun tSVF:ään (Sterile Tulip Nanofat Disposable, San Diego, California (CA), USA). Kolmannessa ARM:ssa PRP plus emulgoitu tSVF yhdistetään molempien tiivistetyn cSVF:n kanssa. Tämän käsivarren tarkoituksena on määrittää korkeamman solukonsentraation vaikutukset kuin saavutettiin toisessa ARM:ssa käyttämällä solukonsentraatteja, jotka saavutetaan käyttämällä Centricyte 1000 -laitetta (Healeon Medical Inc, Newbury Park, CA, USA). Jokaisen valinnaisen toimenpiteen ensisijaisia ​​tuloksia verrataan ja arvioidaan turvallisuuden ja kliinisen tehokkuuden suhteen munasarjojen toiminnan palautumisen parantamisessa, jotta voidaan määrittää paras menetelmä maksimaalisten tulosten saavuttamiseksi.

Potilaan lähtötilanne ja seuratut ominaisuudet ovat seuraavat:

• Kaikkien potilaiden perustila määritetään käyttämällä asiaankuuluvia biokemiallisia indeksejä, mukaan lukien follikkelia stimuloivan hormonin (FSH), anti-Mullerian hormonin (AMH), luteinisoivan hormonin (LH), estradiolin (E2) ja progesteronin (PRG) seerumitasot. Nämä toistetaan 30 ja 90 päivän välein ja sitten 3 kuukauden välein vielä 15 kuukauden ajan, yhteensä 18 kuukauden seuranta. Comprehensive Blood Panel (SMA 12), täydellinen verenkuva (CBC), lipidiprofiilit ja hyytymisindeksit mitataan lähtötilanteessa ja toistetaan (ilman hyytymisindeksejä) 12 kuukauden kuluttua.
• Kun luun tiheys alkaa laskea merkittävällä nopeudella perimenopausaalisella jaksolla, luun tiheyden määritys yhden fotonin absorptiometrialla saadaan lähtötasolla ja uudelleen 12 ja/tai 18 kuukauden kuluttua. Kehon koostumuksen rasva/lihassuhteet arvioidaan samalla tekniikalla samalla istumalla.
• Fyysiseen ja mielenterveyteen liittyvää elämänlaatua arvioidaan elämänlaatututkimuksilla lähtötilanteessa, 6 ja 12 kuukauden kohdalla.
• Munasarjojen tilavuus arvioidaan alussa endovaginaalisella sonografialla sekä läsnä olevien follikkelien koko ja lukumäärä, ja sen jälkeen 6 kuukauden välein.
• Kuukautiskierron päiväkirja - taajuus/väli, päivät ja kesto.

ARM 1:ssä pelkkä PRP sijoitetaan munasarjoihin. ARM 2:ssa PRP yhdistetään tSVF:ään. ARM 3:ssa tSVF yhdistetään sekä cSVF:n että PRP:n kanssa. Jokaisessa ARM:ssa käytetään sopivia injektiomääriä, jotta vältetään kysymys mahdollisista häiriöistä munasarjojen parenkyymiin, jotka vaikuttavat lopputulokseen tilavuuden vaihteluiden vuoksi. Kunkin näiden haaran ensisijaisia ​​tuloksia verrataan, jolloin meille kerrotaan suositeltava menetelmä lisäarviointia varten ja lopulta kliininen käytäntö.

Autologinen verihiutalerikas plasma on vakiintunut hoitomuoto, jossa hyödynnetään FDA:n hyväksymiä menetelmiä ja sarjoja, ja siitä on kehittynyt kypsä hoitomuoto useiden ortopedisten ja pehmytkudospatologioiden hoitoon. Kuten todettiin, sen turvallisuus ja käyttökelpoisuus munasarjojen nuorentamisessa ja hedelmättömyyden kumoamisessa on jo vahvistettu vertaisarvioituissa tapaussarjoissa.

Tiettyjen allogeenisten ihmisen mesenkymaalisten kantasolujen (hMSC) käytön turvallisuutta on ehdotettu ja niiden tehokkuutta on testattu rajoitetusti joissakin aikaisemmissa tutkimuksissa. Testatuilla tuotteilla on vaihtelevat protokollat ​​sisällön ja solujen elinkelpoisuuden eristämisessä ja dokumentoinnissa.

Autologisten kantasolujen (sisältyvät cSVF:ssä) on raportoitu olevan turvallisia ja tehokkaita monissa sovelluksissa/tutkimuksissa ja parhaillaan käynnissä olevissa kliinisissä tutkimuksissa muissa kehon järjestelmissä ja patologioissa. Nämä solut saadaan helposti ja eristetään/konsentroidaan suljetussa järjestelmässä potilaan rasvaperäisestä stromaalisesta vaskulaarisesta fraktiosta (tSVF). Tämä on tärkeää, koska tällaiset kudokset ovat potilaan omia, geneettisesti ainutlaatuisia soluja ja teoriassa mahdollisesti turvallisempia kuin allogeeniset ihmisen mesenkymaaliset kantasolut (hMSC:t), jotka ovat mahdollisesti geneettisesti vieraita ja sisältävät kontaminaatioriskin käsittelyssä ja toimituksessa.

Yhdistetty lähestymistapa voi mahdollistaa sopivasti suuremman määrän soluja, kasvutekijöitä, eksosomeja/mikrovesikkeleitä toteuttamisen ilman viljelmän laajentamisen tarvetta.

cSVF:n sisältö sisältää heterogeenisen populaation määrittelemättömiä (kantamaisia) ja tukisoluja (stromaali). Tämän aikuisten, autologisten solujen ja stroomasolujen yhdistelmän uskotaan tarjoavan tärkeitä terapeuttisiin ja regeneratiivisiin ominaisuuksiin perustuvia solujen erilaistumisominaisuuksia ja parakriiniä (eritysviestintäsignaaleja ja vasteita markkinarakoon) vaihtelevassa määrin. Uskotaan, että tällainen signalointi voi muodostaa kehon oman mekanismin homeostaasille ja regeneraatiolle. Näiden monimutkaisten biokemiallisten signaalien vuorovaikutuksen ehdotetaan lisäävän tai aktivoivan reparatiivisia prosesseja vuorovaikutuksessa alkuperäisten isäntäsolujen ja kudosten kanssa. Lisäksi tästä korjaavasta prosessista voi tulla tärkeitä erityisiä isäntätoimintoja ja tarpeita paikassa, johon terapeuttinen yhdistelmä asetetaan. Näiden korjaavien prosessien taustalla olevat tarkat mekanismit ovat intensiivisen tutkimuksen alla.

Kaikissa tapauksissa munasarjansisäistä injektiota varten tarkoitetut verihiutale- ja biosolumateriaalit asetetaan tavanomaisen kuvantamisen ohjaukseen käyttämällä endovaginaalista sonografiaa. Erityisesti suunniteltuja modifioituja neuloja käytetään biologisten tuotteiden tarkkaan toimittamiseen kohdennetuille munasarjojen parenkymaalisiin kudoksiin. Vaadittu metodologia on yleisesti ottaen hyvin samanlainen kuin munasolun haku hedelmättömyyshoidoissa, joita suoritetaan maailmanlaajuisesti, ja minimaalinen haittavaikutusten riski on miljoonia kertoja vuodessa.

Toimenpiteiden tiedetään aiheuttavan minimaalista epämukavuutta, ja potilaan valmistelu vaihtelee ei-mittaisesta lievään tukevaan anksiolyysiin. Toimenpiteen jälkeistä kipua, jos sellaista on, voidaan hallita tehokkaasti asetaminofeenilla. Potilaita tarkkaillaan toimenpiteen jälkeen 60–120 minuuttia, ja sitten heidät kotiutetaan sopivilla toimenpiteen jälkeisillä kirjallisilla ohjeilla, jotta he palaavat säännöllisesti kliiniseen ja laboratorioseurantaan tulosanalyysissä kuvatun protokollan mukaisesti. Tämän tutkimuksen tavoitteena on verrata hormonaalisen, kliinisen ja elämänlaadun paranemisen kestoa tutkimuksen kolmen haaran välillä.

Niille tutkimukseen osallistuneille, joiden munasarjat eivät ole helposti saatavilla endovaginaalisella ultraäänellä, osa potilaista saattaa vaatia laparoskooppista ohjausta. Kaikissa tällaisissa tapauksissa interventiot suoritetaan sairaalaympäristössä, jolloin tutkija valmistelee ruiskeen ja gynekologiset tai muut sopivat erikoislääkärit suorittavat laparoskooppisen toimenpiteen käyttämällä vakiomenetelmiä ohjeena.