Eierstockverjüngung unter Verwendung von plättchenreichem Plasma (PRP) und autologer Gewebestromagefäßfraktion (tSVF) und zellangereichertem tSVF (OVAR-REJUV)

In mehreren Serien wurde bereits gezeigt, dass die intraovarielle Platzierung von plättchenreichem Plasma (PRP) die Hormonspiegel in der Perimenopause und in der frühen Postmenopause auf die Spiegel vor der Menopause und das zyklische Verhalten vor der Menopause zurückführt, was sogar zu Schwangerschaften und Geburten von Gesunden führt Säuglinge. Die Absicht dieser Studie ist es, den Nutzen von PRP zur Verbesserung des Hormonstatus und der klinischen Symptomatik bei Frauen in der Perimenopause und frühen Postmenopause sowie bei Frauen mit vorzeitigem Ovarialversagen ohne Turner zu bewerten, indem die Verbesserungen der biochemischen/hormonellen Parameter dokumentiert werden , Knochendichte und Lebensqualität im Zusammenhang mit der körperlichen und geistigen Gesundheit sowie den Vergleich der Dauer und Wirksamkeit dieses PRP-Verfahrens mit der intraovarialen Platzierung von biozellulären, physiologisch aktiven Zell- und Zytokinelementen, die in der aus Fettgewebe stammenden stromalen Gefäßfraktion enthalten sind (tSVF).

Es sollte beachtet werden, dass die Knochendichteverlustrate bei Frauen in den 12 Monaten vor und 24 Monaten nach der Menopause maximal ist. Die absoluten und relativen prozentualen Körperfett- und Muskelanteile ändern sich in nachteiliger Weise – mit zunehmendem Fett und abnehmender Muskelmasse, wobei die dramatischsten Veränderungen auch in der Übergangszeit in den Wechseljahren auftreten. Diese Studie bietet daher das Potenzial, eine messbare Beendigung des Knochendichteverlusts oder eine Verringerung der Knochendichteverlustrate im Vergleich zu gut etablierten bekannten Mustern und historischen Kontrollen als Ergebnis der vorgeschlagenen relativ harmlosen Eingriffe zu dokumentieren. Dieselbe Technologie, die für die Bewertung der Knochendichte verwendet wird, die Einzelphotonen-Absorptiometrie, wird auch zur Quantifizierung der Körperzusammensetzung von Fett und Muskeln zu Studienbeginn und nach 18 Monaten verwendet.

SVF kann weiter entweder als zellulärer SVF oder als Gewebe-SVF (cSVF oder tSVF) charakterisiert werden. Gewebe-SVF (tSVF) wird durch Aspiration von subkutanem Fettgewebe mit einer kleinvolumigen manuellen Mikrokanüle mit geschlossener Spritze (ungefähr 10+ Teelöffel), gefolgt von Dekantieren in einem geschlossenen System zum Entfernen der infrananten Flüssigkeiten, gefolgt von Emulgieren des Rests bis zum erforderlichen Grad an Homogenität und reduzierte Partikelgröße, um eine Injektion durch Nadelbohrungen mit herkömmlichem Messgerät zu ermöglichen. Gewebe-SVF ist gekennzeichnet durch die Beibehaltung eines Teils der nicht-zellulären Matrix aus kollagenen und feinen Gefäßresten, die zusammen eine Matrix bilden, die die darin eingebetteten biozellulären Elemente erhält und ihnen Struktur verleiht. Zelluläre SVF (cSVF) beginnt mit der gleichen Mini-Aspiration, ist jedoch gekennzeichnet durch eine Zentrifugation in einem geschlossenen System, gefolgt von einem enzymatischen Verdau, um die zelluläre SVF (cSVF) zu isolieren/konzentrieren. Nach der Enzymneutralisierung und dem Spülen wird das resultierende Konzentrat lebensfähiger Stammzellen/stromaler kernhaltiger Zellen für eine geführte Platzierung in das Parenchymgewebe der Eierstöcke vorbereitet. Eine Probe jedes Injektats wird mit Standard-Laser-Durchflusszytometrie getestet und quantifiziert, einschließlich Lebensfähigkeit und Anzahl der Zellen in jeder Probe.

Die Studie umfasst die Verwendung von PRP (Emcyte II Pure PRP, Florida, USA) PRP gemäß den Anweisungen des Herstellers) allein als Kontrolle im ersten Behandlungsglied (ARM), das volumetrisch mit den anderen Injektionen identisch ist, für eine geführte Platzierung, die in den Eierstöcken dokumentiert ist . Ein vergleichender zweiter ARM, bestehend aus PRP, wird mit emulgiertem tSVF (Sterile Tulip Nanofat Disposable, San Diego, Kalifornien (CA), USA) kombiniert. In einem dritten ARM werden PRP plus emulgiertes tSVF mit beiden konzentrierten cSVF kombiniert. Dieser Arm dient dazu, die Wirkungen einer höheren Zellkonzentration zu bestimmen, als sie in der zweiten ARM unter Verwendung der Zellkonzentrate erzielt wird, die unter Verwendung des Centricyte 1000 (Healeon Medical Inc, Newbury Park, CA, USA) erreicht werden. Die primären Ergebnisse für jedes dieser optionalen Verfahren werden verglichen und hinsichtlich Sicherheit und klinischer Wirksamkeit bei der Verbesserung der Wiederherstellung der Ovarialfunktion bewertet, um die bevorzugte Methode zur Erzielung maximaler Ergebnisse zu bestimmen.

Baseline- und überwachte Patientenmerkmale sind wie folgt:

• Der Ausgangsstatus aller Patienten wird anhand relevanter biochemischer Indizes bestimmt, einschließlich der Serumspiegel von Follikel-stimulierendem Hormon (FSH), Anti-Müller-Hormon (AMH), luteinisierendem Hormon (LH), Estradiol (E2) und Progesteron (PRG). Diese werden nach 30 und 90 Tagen und dann alle 3 Monate für weitere 15 Monate wiederholt, insgesamt 18 Monate. Umfassendes Blutbild (SMA 12), komplettes Blutbild (CBC), Lipidprofile und Gerinnungsindizes werden zu Studienbeginn erhoben und nach 12 Monaten wiederholt (ohne Gerinnungsindizes).
• Da die Knochendichte in der Perimenopause mit einer signifikanten Rate abzunehmen beginnt, wird eine Knochendichtebestimmung mit Single-Photon-Absorptiometrie zu Studienbeginn und erneut nach 12 und/oder 18 Monaten durchgeführt. Die Fett-/Muskelanteile der Körperzusammensetzung werden mit der gleichen Technologie in der gleichen Sitzung bewertet.
• Die Lebensqualität im Zusammenhang mit der körperlichen und geistigen Gesundheit wird mit den Erhebungen zur Lebensqualität zu Studienbeginn, nach 6 und 12 Monaten bewertet.
• Das Ovarialvolumen wird zu Studienbeginn durch endovaginale Sonographie zusammen mit der Größe und Anzahl der vorhandenen Follikel und dann alle 6 Monate beurteilt.
• Tagebuchaufzeichnung der Menstruationszyklen – Häufigkeit/Intervall, Tage und Dauer.

In ARM 1 wird nur PRP in die Eierstöcke eingebracht. In ARM 2 wird PRP mit tSVF kombiniert. In ARM 3 wird tSVF sowohl mit cSVF als auch mit PRP kombiniert. Angepasste Injektatvolumina werden in jedem ARM verwendet, um die Frage einer möglichen Störung des Ovarialparenchyms zu vermeiden, die das Ergebnis aufgrund von volumenvariablen Effekten beeinflusst. Die primären Ergebnisse für jeden dieser Arme werden verglichen, um uns über eine bevorzugte Methodik für die weitere Bewertung und letztendlich für die klinische Praxis zu informieren.

Autologes plättchenreiches Plasma ist eine etablierte Behandlungsmethode, die von der FDA zugelassene Methoden und Kits verwendet und sich zu einer ausgereiften Behandlungsmethode für eine Vielzahl von orthopädischen und Weichteilpathologien entwickelt hat. Wie bereits erwähnt, wurde seine Sicherheit und Nützlichkeit bei der Verjüngung der Eierstöcke und der Umkehrung der Unfruchtbarkeit bereits in Peer-Review-Fallserien nachgewiesen.

Die Sicherheit der Anwendung bestimmter allogener humaner mesenchymaler Stammzellen (hMSC) wurde vorgeschlagen und in einigen früheren Studien begrenzt auf ihre Wirksamkeit getestet. Die getesteten Produkte haben variable Protokolle zum Isolieren und Dokumentieren von Inhalt und Zelllebensfähigkeit.

Autologe Stammstromazellen (in cSVF enthalten) wurden in vielen Anwendungen/Studien und in klinischen Studien, die derzeit in anderen Körpersystemen und Pathologien durchgeführt werden, als sicher und wirksam beschrieben. Diese Zellen lassen sich leicht gewinnen und in einem geschlossenen System aus der aus Fettgewebe gewonnenen stromalen Gefäßfraktion (tSVF) des Patienten isolieren/konzentrieren. Dies ist wichtig, da solche Gewebe die eigenen, genetisch einzigartigen Zellen des Patienten sind und theoretisch potenziell sicherer sind als die allogenen humanen mesenchymalen Stammzellen (hMSCs), die potenziell genetisch fremd sind und das Risiko einer Kontamination bei der Verarbeitung und Lieferung tragen.

Ein kombinierter Ansatz kann die Implementierung einer geeignet größeren Anzahl von Zellen, Wachstumsfaktoren, Exosomen/Mikrovesikeln ohne die Notwendigkeit einer Kulturexpansion ermöglichen.

Der Inhalt des cSVF enthält eine heterogene Population nicht bezeichneter (stammartiger) und unterstützender Zellen (Stroma). Es wird angenommen, dass diese Kombination aus erwachsenen, autologen Zellen zusammen mit Stromazellen wichtige therapeutische und regenerative Qualitäten bietet, die auf zellulären Differenzierungsmerkmalen und dem Parakrinen (sekretorische Kommunikationssignale und Reaktionen auf Nischen) in unterschiedlichem Ausmaß basieren. Es wird angenommen, dass eine solche Signalgebung den körpereigenen Mechanismus zur Homöostase und Regeneration darstellen kann. Es wird vorgeschlagen, dass die Wechselwirkung dieser komplexen biochemischen Signale durch Wechselwirkung mit den nativen Wirtszellen und -geweben reparative Prozesse weiter rekrutiert oder aktiviert. Darüber hinaus kann dieser Reparaturprozess zu wichtigen spezifischen Wirtsaktivitäten und -bedürfnissen an dem Ort werden, an dem die therapeutische Kombination platziert wird. Die genauen Mechanismen, die diesen Reparaturprozessen zugrunde liegen, werden intensiv untersucht.

In allen Fällen werden die Blutplättchen und biozellulären Materialien für die intraovarielle Injektion unter herkömmlicher bildgebender Führung unter Verwendung der endovaginalen Sonographie platziert. Speziell entworfene modifizierte Nadeln werden verwendet, um die biologischen Produkte genau an die gezielten parenchymalen Gewebe innerhalb der Eierstöcke abzugeben. Die erforderliche Methodik ist insgesamt der Oozytenentnahme bei Unfruchtbarkeitsbehandlungen sehr ähnlich, die weltweit millionenfach pro Jahr mit minimalem Risiko von Nebenwirkungen durchgeführt werden.

Es ist bekannt, dass die Verfahren zu minimalen Beschwerden führen, wobei die Vorbereitung des Patienten von keiner bis zu einer leichten unterstützenden Anxiolyse variiert. Eventuelle Schmerzen nach dem Eingriff können mit Paracetamol wirksam behandelt werden. Die Patienten werden nach dem Eingriff 60 bis 120 Minuten lang beobachtet und dann mit geeigneten schriftlichen Anweisungen nach dem Eingriff entlassen, um regelmäßig zur klinischen und Labornachsorge gemäß dem in der Ergebnisanalyse beschriebenen Protokoll zurückzukehren. Das Ziel dieser Studie besteht darin, die Dauer der hormonellen, klinischen und Lebensqualitätsverbesserung zwischen den 3 Studienarmen zu vergleichen.

Bei der Minderheit der Studienteilnehmerinnen, bei denen die Eierstöcke für den endovaginalen Ultraschall nicht leicht zugänglich sind, kann bei einer Untergruppe von Patientinnen eine laparoskopische Führung erforderlich sein. In all diesen Fällen finden die Eingriffe im Krankenhaus statt, wobei der Prüfarzt das Injektat vorbereitet und gynäkologische oder andere geeignete Fachchirurgen das laparoskopische Verfahren unter Verwendung von Standardverfahren als Anleitung durchführen.