Petefészekfiatalítás vérlemezkékben gazdag plazma (PRP) és autológ szövet stroma vascularis frakció (tSVF) és sejtdúsított tSVF segítségével (OVAR-REJUV)

A vérlemezkében gazdag plazma (PRP) petefészekben történő elhelyezését már számos sorozatban kimutatták, hogy a perimenopauzális és korai posztmenopauzális hormonszinteket a menopauza előtti szintre és a menopauza előtti ciklikus viselkedésre állítja vissza, még akkor is, ha terhességet és egészséges szülést eredményez. csecsemők. Ennek a vizsgálatnak a célja a PRP hasznosságának értékelése a hormonális állapot és a klinikai tünetek javításában perimenopauzás és korai posztmenopauzás nőknél, valamint a nem Turner-féle korai petefészek-elégtelenségben szenvedő nőknél a biokémiai/hormonális paraméterek javulásának dokumentálásával. , a csontsűrűség, valamint a fizikai és mentális egészséggel összefüggő életminőség, valamint a PRP eljárás időtartamának és hatékonyságának összehasonlítása a zsírszövetből származó sztróma vaszkuláris frakcióban található biocelluláris fiziológiailag aktív sejt- és citokinelemek petefészekbe történő elhelyezésével. (tSVF).

Meg kell jegyezni, hogy a csontsűrűség csökkenésének mértéke a nőknél a menopauzát megelőző 12 hónapban és az azt követő 24 hónapban a legmagasabb. A testzsír és izom abszolút és relatív százalékos mennyisége kedvezőtlen módon változik - a zsír növekedésével és az izomtömeg csökkenésével, a legdrámaibb változások a menopauza átmeneti időszakában is bekövetkeznek. Ez a tanulmány tehát lehetőséget ad a csontsűrűség-csökkenés mérhető megszűnésének vagy a csontsűrűség-csökkenés mértékének mérséklődésének dokumentálására, összehasonlítva a jól bevált ismert mintákkal és történeti kontrollokkal a javasolt viszonylag ártalmatlan beavatkozások eredményeként. Ugyanazt a technológiát, amelyet a csontsűrűség értékelésére használnak, az egyfoton abszorpciós mérést, a zsír és az izom testösszetételének számszerűsítésére is alkalmazzák majd a kiindulási és 18 hónapos időszakban.

Az SVF tovább jellemezhető akár celluláris SVF-ként, akár szöveti SVF-ként (cSVF vagy tSVF). A szöveti SVF-et (tSVF) a bőr alatti zsírszövet kis térfogatú kézi zárt fecskendős mikrokanüllel történő leszívásával kapják (körülbelül 10+ teáskanál), majd zárt rendszerű dekantálással eltávolítják az infranatáns folyadékokat, majd a maradékot emulgeálják a kívánt homogenitásig és csökkentett szemcseméret, hogy lehetővé tegye a hagyományos tűfuratokon keresztül történő befecskendezést. A szöveti SVF-re jellemző, hogy a kollagén és finom vaszkuláris maradványok nem sejtes mátrixának egy részét visszatartják, amelyek együtt egy mátrixot alkotnak, amely megtartja és struktúrát biztosít a beágyazott biocelluláris elemeknek. A celluláris SVF (cSVF) ugyanazzal a mini-aspirációval kezdődik, de zárt rendszerű centrifugálás, majd enzimatikus emésztés jellemzi a celluláris SVF (cSVF) izolálására/koncentrálására. Az enzimsemlegesítést és az öblítést követően az életképes őssejtek/sztrómamagos sejtek koncentrátumát előkészítik a petefészek parenchyma szövetébe történő irányított elhelyezéshez. Minden injektált mintát tesztelnek és mennyiségileg meghatároznak szabványos lézeres áramlási citometriával, beleértve az életképességet és az egyes mintákban lévő sejtek számát.

A vizsgálat magában foglalja a PRP (Emcyte II Pure PRP, Florida, USA) PRP önmagában történő használatát a gyártó utasításai szerint, kontrollként az első kezelési végtagban (ARM), amely térfogatilag megegyezik a többi injekcióval, a petefészekben dokumentált irányított elhelyezéshez. . A PRP-ből álló, összehasonlító második ARM-et emulgeált tSVF-fel (Sterile Tulip Nanofat Disposable, San Diego, California (CA, USA)) kombinálják. Egy harmadik ARM-ben a PRP plusz emulgeált tSVF kombinálódik mindkét koncentrált cSVF-fel. Ez a kar a Centricyte 1000 (Healeon Medical Inc, Newbury Park, CA, USA) sejtkoncentrátumok használatával elért magasabb sejtkoncentráció hatásainak meghatározására szolgál, mint a második ARM-ben. Ezen választható eljárások mindegyikének elsődleges eredményeit összehasonlítják, és értékelik a biztonságosság és a klinikai hatékonyság szempontjából a petefészek-funkció helyreállításának javításában, hogy meghatározzák a maximális eredmények elérése érdekében előnyben részesített módszertant.

A beteg kiindulási és monitorozott jellemzői a következők:

• Az összes beteg kiindulási állapotát releváns biokémiai mutatók, köztük a tüszőstimuláló hormon (FSH), az anti-Muller-hormon (AMH), a luteinizáló hormon (LH), az ösztradiol (E2) és a progeszteron (PRG) szérumszintjei alapján határozzák meg. Ezeket 30 és 90 naponként megismétlik, majd 3 havonta további 15 hónapig, összesen 18 hónapig követhető nyomon követés. Az átfogó vérpanel (SMA 12), a teljes vérkép (CBC), a lipidprofilok és a véralvadási indexek mérése az alapvonalon történik, és 12 hónap múlva ismétlődik (alvadási indexek nélkül).
• Mivel a csontsűrűség jelentős mértékben csökkenni kezd a perimenopauzális időszakban, a csontsűrűség meghatározása egyetlen foton abszorpciós módszerrel történik a kiinduláskor, majd ismét 12 és/vagy 18 hónap múlva. A testösszetétel zsír/izom arányát azonos technológiával, ugyanazon ülésen értékeljük.
• A fizikai és mentális egészséggel kapcsolatos életminőséget életminőség-felméréssel értékelik kiinduláskor, 6 és 12 hónap után.
• A petefészek térfogatát a kiinduláskor endovaginális ultrahangvizsgálattal, a jelenlévő tüszők méretével és számával együtt, majd 6 havonta értékelik.
• A menstruációs ciklusok naplózása - gyakoriság/intervallum, napok és időtartam.

Az ARM 1-ben egyedül a PRP kerül a petefészkekbe. Az ARM 2-ben a PRP a tSVF-fel lesz kombinálva. Az ARM 3-ban a tSVF a cSVF-fel és a PRP-vel is kombinálva lesz. Minden ARM-ben megfelelő mennyiségű injekciót kell használni, hogy elkerülhető legyen a petefészek parenchyma esetleges interferenciája, amely befolyásolja az eredményt a térfogati változó hatások miatt. Az egyes ágak elsődleges eredményeit összehasonlítjuk, tájékoztatva bennünket a további értékeléshez előnyben részesített módszertanról, és végül a klinikai gyakorlatról.

Az autológ vérlemezkében gazdag plazma egy bevált kezelési mód, amely az FDA által jóváhagyott módszereket és készleteket alkalmazza, és kiforrott kezelési módsá fejlődött különféle ortopédiai és lágyszöveti patológiák kezelésére. Mint már említettük, a petefészek megfiatalításában és a meddőség visszafordításában való biztonságosságát és hasznosságát már szakértői értékelésű esetsorozatokban állapították meg.

Bizonyos allogén humán mesenchymális őssejtek (hMSC) használatának biztonságosságát javasolták, és néhány korábbi tanulmányban korlátozottan tesztelték a hatékonyságot. A tesztelt termékek változó protokollokkal rendelkeznek a tartalom és a celluláris életképesség elkülönítésére és dokumentálására.

Az (a cSVF-ben található) autológ ős-stromális sejtekről számos alkalmazásban/tanulmányban, valamint más testrendszerekben és patológiákban folyamatban lévő klinikai vizsgálatokban számoltak be. Ezek a sejtek könnyen kinyerhetők és zárt rendszerben izolálhatók/koncentrálhatók a páciens zsírból származó stroma vascularis frakciójából (tSVF). Ez azért fontos, mert az ilyen szövetek a páciens saját, genetikailag egyedi sejtjei, és elméletileg potenciálisan biztonságosabbak, mint az allogén humán mesenchymális őssejtek (hMSC), amelyek potenciálisan genetikailag idegenek, és a feldolgozás és szállítás során a fertőzés kockázatát hordozzák.

A kombinált megközelítés lehetővé teheti megfelelően nagyobb számú sejt, növekedési faktor, exoszómák/mikrovezikulák megvalósítását anélkül, hogy a tenyészet bővítésére lenne szükség.

A cSVF tartalma nem jelölt (ősszerű) és támogató sejtek (stromális) heterogén populációját tartalmazza. A felnőtt, autológ sejtek ezen kombinációja a stromasejtekkel együtt fontos terápiás és regeneratív tulajdonságokon alapuló sejtdifferenciálódási jellemzőket, valamint a parakrin (szekréciós kommunikációs jelek és válaszok a niche-re) különböző mértékben kínál. Úgy gondolják, hogy az ilyen jelzések a szervezet saját homeosztázis- és regenerációs mechanizmusát képezhetik. Ezeknek az összetett biokémiai jeleknek a kölcsönhatása a natív gazdasejtekkel és szövetekkel való kölcsönhatás révén további reparatív folyamatok toborzását vagy aktiválását javasolja. Továbbá ez a reparatív folyamat fontos specifikus gazdatevékenységekké és szükségletekké válhat azon a helyen, ahol a terápiás kombinációt elhelyezik. A reparatív folyamatok mögött meghúzódó pontos mechanizmusokat intenzíven vizsgálják.

A petefészekbe történő injekcióhoz használt vérlemezkék és biocelluláris anyagok minden esetben a hagyományos képalkotó irányítás alá kerülnek, endovaginális szonográfia felhasználásával. Speciálisan kialakított módosított tűket használnak a biológiai termékek pontos bejuttatására a megcélzott petefészek parenchymás szöveteibe. A szükséges módszertan összességében nagyon hasonló a meddőségi kezelések petesejtek visszanyeréséhez, amelyeket világszerte végeznek, és évente milliószor minimális a káros hatások kockázata.

Az eljárásokról köztudott, hogy minimális kényelmetlenséget okoznak, a páciens előkészítése az egyiktől az enyhe szupportív szorongásig terjed. A beavatkozás utáni fájdalom, ha van ilyen, hatékonyan kezelhető acetaminofénnel. A betegeket a beavatkozás után 60-120 percig megfigyelik, majd megfelelő írásos utasításokkal elbocsátják, hogy rendszeresen visszatérjenek klinikai és laboratóriumi ellenőrzésre az eredményelemzésben felvázolt protokoll szerint. A tanulmány célja a hormonális, klinikai és életminőség-javulás időtartamának összehasonlítása a vizsgálat 3 ágában.

A vizsgálatban résztvevők azon kisebb része számára, akiknél a petefészkek nem hozzáférhetők könnyen endovaginális ultrahanggal, a betegek egy része laparoszkópos irányítást igényelhet. A beavatkozások minden ilyen esetben kórházi körülmények között történnek, a vizsgáló elkészíti az injekciót, a laparoszkópos beavatkozást pedig nőgyógyász vagy más megfelelő szaksebész végzi, a szokásos eljárások alapján.