Mikrobiell resistens av Rifaximin vid hepatisk encefalopati

Metodik Inklusions- och uteslutningskriterier Patienter vid fullt medvetande registrerades från National Hepatology and Tropical Medicine Research Institute (NHTMRI), Kairo, Egypten mellan januari 2015 och december 2018. Inklusionskriterierna var skrumplever på grund av HCV-infektion, ålder 18 till 75 år, upplevt minst en episod av OHE, och ett MELD-poäng ≤ 25,13 Patienter med neurologiska eller kommunikationsproblem, hepatocellulärt karcinom, diabetes mellitus, aktiv infektion, serumkreatinin > 2 mg/dl, Hg < 8 g/dL, serum Na < 125 mmol/L eller serum K < 2,5 mmol/L exkluderades. Patienter med tidigare intag av rifaximin som profylax eller något annat antibiotikum under den senaste månaden exkluderades också.

Studiedesign Protokollet för denna öppna, parallella, prospektiva interventionsstudie godkändes av den institutionella granskningsnämnden (IRB) vid NHTMRI och den vid Farmaceutiska fakulteten, Cairo University (CL(1173)). Alla patienter och/eller patienters vårdgivare för de med svag/nedsatt kognitiv och/eller tankeförmåga på grund av tidigare episod av HE rådfrågades och förklarades för lämnat skriftligt informerat samtycke innan studieregistreringen.

Patienterna fördelades slumpmässigt i antingen interventionsgrupp (rifaxmingrupp) eller kontrollgrupp (endast laktulosgrupp). Båda grupperna fick laktulossirap 30-45 ml tre gånger dagligen medan rifaximin 400 mg tre gånger dagligen tillsattes interventionsgruppen under 6 månader. Annan konventionell behandling inklusive diuretika, protonpumpshämmare, ursodeoxicholsyra och silymarin gavs till patienterna i båda grupperna enligt sjukhusets protokoll.

Studieuppföljning Alla rekryterade patienter utvärderades kliniskt och biokemiskt vid baslinjen och varannan vecka under 6 månader. Conn-poäng, asterixis-grad, fullständig blodbild med differential, serumbilirubin (totalt och direkt), serumaspartattransaminas (AST) och alanintransaminas (ALT), alkaliskt fosfatas, gamma-glutamyltransferas (GGT), serumalbumin, protrombintid och koncentration , urea och serumkreatinin, serumnatrium (Na) och kalium (K), urin och avföringsanalys mättes.

Effektresultat Det primära effektmåttet var tiden till den första genombrottsepisoden av OHE (definierad som tiden från den första dosen av studieläkemedlet till en ökning från ett baseline Conn-poäng på 0 eller 1 till en poäng på 2 eller mer eller från ett baseline Conn-poäng på 0 till ett Conn-poäng på 1 plus en ökning med 1 enhet i asterixgraden.13 Det sekundära effektmåttet var tiden till den första sjukhusvistelsen som involverade HE (definierad som sjukhusvistelse på grund av störningen eller sjukhusvistelsen under vilken en episod av HE inträffade).14 Procentandelen av patientens överlevnad under studien ansågs också vara ett sekundärt resultat.

Säkerhetsresultat Alla rekryterade patienter ombads att rapportera alla biverkningar som upplevts under studieperioden. Klinikbesök skedde varannan vecka fram till slutet av behandlingsperioden. Under veckor utan kliniska besök följdes patienterna upp med telefonsamtal.

Rifaximin mikrobiell resistens Isolering av gramnegativa bakterier från kliniska avföringsprover. Avföringsprover samlades in från alla deltagare innan behandlingen påbörjades och i slutet av studien. Ett gram avföring suspenderades i 10 ml saltlösning och virvlades kraftigt. En ml alikvot av avföringssuspensionen ströks ut på ytan av MacConkey-agarplattor för att isolera gramnegativa laktosfermentorer. Plattorna inkuberades sedan vid 37°C under 24 timmar. Rosa kolonier plockades och ströks på nytt en gång till och suspenderades sedan i 30 % glycerol (vol/vol) i Brain Heart Infusion-buljong (BHI) och lagrades vid -80 °C tills vidare analyser.

Bestämning av den lägsta hämmande koncentrationen (MIC) av rifaximin för laktosfermentorisolat En sekventiell tvåfaldig serieutspädningsbuljongprocedur antogs enligt riktlinjerna från Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI).15 Tio spädningar av rifaximin bereddes med utgångspunkt från 256 μg/ml i Muller Hinton-buljong (MHB) och alikvoterades i 200 μl alikvoter i brunnarna på en rundbottnad 96-brunnars platta. En kontrollbrunn inkluderades som framställdes med användning av 200 μl MHB inokulerad med 20 μl av det beredda bakterieinokulumet.

Inokulumet preparerades genom att justera celler från en odling över natten för att matcha McFarland-standarden 0,5 (OD600 = 0,125). Suspensionen späddes ytterligare 1:20 i MHB och 20 μl av det justerade inokulumet sattes till varje brunn. Plattorna inkuberades sedan vid 37°C under 24 timmar. Experimentet upprepades två gånger och den lägsta koncentrationen av rifaximin som resulterade i fullständig hämning av synlig tillväxt representerade MIC-värdet. MIC-värdena ansågs olika om de skilde sig åt med mer än en tvåfaldig utspädning.16