Resistenza microbica della rifaximina nell'encefalopatia epatica

Metodologia Criteri di inclusione ed esclusione Pazienti pienamente coscienti sono stati arruolati dal National Hepatology and Tropical Medicine Research Institute (NHTMRI), Cairo, Egitto tra gennaio 2015 e dicembre 2018. I criteri di inclusione erano cirrosi dovuta a infezione da HCV, età compresa tra 18 e 75 anni, esperienza di almeno un episodio di OHE e punteggio MELD ≤ 25,13 Pazienti con problemi neurologici o di comunicazione, carcinoma epatocellulare, diabete mellito, infezione attiva, creatinina sierica > 2 mg/dl, Hg < 8 g/dL, Na sierico < 125 mmol/L o K sierico < 2,5 mmol/L sono stati esclusi. Sono stati esclusi anche i pazienti con precedente assunzione di rifaximina come profilassi o qualsiasi antibiotico nell'ultimo mese.

Disegno dello studio Il protocollo di questo studio interventistico in aperto, parallelo e prospettico è stato approvato dal comitato di revisione istituzionale (IRB) dell'NHTMRI e da quello della Facoltà di Farmacia dell'Università del Cairo (CL(1173)). Tutti i pazienti e/o gli operatori sanitari dei pazienti per quelli con capacità cognitive e/o di pensiero deboli/alterate a causa di precedenti episodi di HE sono stati consultati e spiegati per aver fornito il consenso informato scritto prima dell'arruolamento nello studio.

I pazienti sono stati assegnati in modo casuale al gruppo di intervento (gruppo rifaximina) o al gruppo di controllo (gruppo solo lattulosio). Entrambi i gruppi hanno ricevuto sciroppo di lattulosio 30-45 ml tre volte al giorno mentre rifaximina 400 mg tre volte al giorno è stata aggiunta al gruppo di intervento per 6 mesi. Altre terapie convenzionali inclusi diuretici, inibitori della pompa protonica, acido ursodesossicolico e silimarina sono state somministrate ai pazienti in entrambi i gruppi secondo il protocollo ospedaliero.

Follow-up dello studio Tutti i pazienti reclutati sono stati valutati clinicamente e biochimicamente al basale e ogni 2 settimane per 6 mesi. Conn score, grado di asterixis, quadro ematico completo con differenziale, bilirubina sierica (totale e diretta), aspartato transaminasi (AST) e alanina transaminasi (ALT), fosfatasi alcalina, gamma-glutamiltransferasi (GGT), albumina sierica, tempo e concentrazione di protrombina , urea e creatinina sierica, sodio sierico (Na) e potassio (K), analisi delle urine e delle feci.

Risultati di efficacia L'endpoint primario di efficacia era il tempo al primo episodio rivoluzionario di OHE (definito come il tempo dalla prima dose del farmaco in studio a un aumento da un punteggio Conn basale di 0 o 1 a un punteggio di 2 o più o da un punteggio Conn basale di 0 a un punteggio Conn di 1 più un aumento di 1 unità nel grado asterixis.13 L'endpoint secondario di efficacia era il tempo al primo ricovero che coinvolgeva HE (definito come ricovero a causa del disturbo o ricovero durante il quale si è verificato un episodio di HE).14 Anche la percentuale di sopravvivenza del paziente durante lo studio è stata considerata un risultato secondario.

Risultati sulla sicurezza A tutti i pazienti reclutati è stato richiesto di segnalare eventuali eventi avversi riscontrati durante il periodo di studio. Le visite cliniche si sono verificate ogni 2 settimane fino alla fine del periodo di trattamento. Nelle settimane senza visite cliniche, i pazienti sono stati seguiti da telefonate.

Rifaximina Resistenza microbica Isolamento di batteri Gram-negativi da campioni clinici di feci Campioni di feci sono stati raccolti da tutti i partecipanti prima di iniziare il trattamento e alla fine dello studio. Un grammo di feci è stato sospeso in 10 ml di soluzione fisiologica e vortexato vigorosamente. Un'aliquota di un ml della sospensione fecale è stata strisciata sulla superficie delle piastre di agar MacConkey per isolare i fermentatori di lattosio Gram-negativi. Le piastre sono state poi incubate a 37°C per 24 ore. Le colonie rosa sono state prelevate e striate ancora una volta, quindi sospese in glicerolo al 30% (vol/vol) in brodo Brain Heart Infusion (BHI) e conservate a -80 ⁰C fino a ulteriori analisi.

Determinazione della concentrazione minima inibente (MIC) di rifaximina per gli isolati fermentatori del lattosio È stata adottata una procedura sequenziale in brodo di diluizione seriale doppia secondo le linee guida del Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI).15 Dieci diluizioni di rifaximina sono state preparate a partire da 256 μg/ml in brodo Muller Hinton (MHB) e aliquotate in aliquote da 200 μl nei pozzetti di una piastra a 96 pozzetti a fondo tondo. È stato incluso un pozzetto di controllo preparato utilizzando 200 μl di MHB inoculato con 20 μl dell'inoculo batterico preparato.

L'inoculo è stato preparato regolando le cellule da una coltura durante la notte in modo che corrispondessero allo standard McFarland 0,5 (OD600 = 0,125). La sospensione è stata ulteriormente diluita 1:20 in MHB e in ciascun pozzetto sono stati aggiunti 20 μl dell'inoculo regolato. Le piastre sono state poi incubate a 37°C per 24 ore. L'esperimento è stato ripetuto due volte e la più bassa concentrazione di rifaximina che ha portato alla completa inibizione della crescita visibile rappresentava il valore MIC. I valori MIC sono stati considerati diversi se differivano per più di una diluizione doppia.16