Rifaksimiinin mikrobien resistenssi maksa-enkefalopatiassa

Metodologia Sisällyttämis- ja poissulkemiskriteerit Täysin tajuissaan olevia potilaita otettiin mukaan Kairossa, Egyptissä sijaitsevasta National Hepatology and Tropical Medicine Research Institutesta (NHTMRI) tammikuun 2015 ja joulukuun 2018 välisenä aikana. Osallistumiskriteerit olivat HCV-infektiosta johtuva kirroosi, ikä 18–75 vuotta, vähintään yksi OHE-jakso ja MELD-pistemäärä ≤ 25,13 Potilaat, joilla on neurologisia tai kommunikaatioongelmia, hepatosellulaarinen syöpä, diabetes mellitus, aktiivinen infektio, seerumin kreatiniini > 2 mg/dl, Hg < 8 g/dl, seerumin Na < 125 mmol/L tai seerumin K < 2,5 mmol/L. Myös potilaat, jotka ovat saaneet rifaksimiinia ennaltaehkäisynä tai mitä tahansa antibioottia viimeisen kuukauden aikana, suljettiin pois.

Tutkimuksen suunnittelu Tämän avoimen rinnakkaistutkimuksen prospektiivisen interventiotutkimuksen protokollan hyväksyivät NHTMRI:n institutionaalinen arviointilautakunta (IRB) ja Kairon yliopiston farmasian tiedekunta (CL(1173)). Kaikilta potilailta ja/tai heidän omaishoitajilta, joilla on heikko/heikentynyt kognitiivinen ja/tai ajattelukyky edellisen HE-jakson vuoksi, neuvoteltiin ja heille selitettiin kirjallinen tietoinen suostumus ennen tutkimukseen ilmoittautumista.

Potilaat jaettiin satunnaisesti joko interventioryhmään (rifaksimiiniryhmä) tai kontrolliryhmään (vain laktuloosiryhmä). Molemmat ryhmät saivat laktuloosisiirappia 30-45 ml kolmesti päivässä, kun taas rifaksimiinia 400 mg kolmesti päivässä lisättiin interventioryhmään 6 kuukauden ajan. Molemmissa ryhmissä potilaille annettiin muuta tavanomaista hoitoa, mukaan lukien diureetteja, protonipumpun estäjiä, ursodeoksikoolihappoa ja silymariinia, sairaalan protokollan mukaisesti.

Tutkimuksen seuranta Kaikki värvätyt potilaat arvioitiin kliinisesti ja biokemiallisesti lähtötilanteessa ja 2 viikon välein 6 kuukauden ajan. Conn-pisteet, asterixis-aste, täydellinen verikuva erotuksella, seerumin bilirubiini (kokonais- ja suora), seerumin aspartaattitransaminaasi (AST) ja alaniinitransaminaasi (ALT), alkalinen fosfataasi, gamma-glutamyylitransferaasi (GGT), seerumin albumiini, protrombiiniaika ja -pitoisuus , urea ja seerumin kreatiniini, seerumin natrium (Na) ja kalium (K), virtsan ja ulosteen analyysi mitattiin.

Tehon tulokset Ensisijainen tehon päätetapahtuma oli aika OHE:n ensimmäiseen läpimurtojaksoon (määritelty aika ensimmäisestä tutkimuslääkkeen annoksesta nousuun lähtötason Conn-pisteestä 0 tai 1 arvoon 2 tai enemmän tai alkaen lähtötason Conn-pisteet 0:sta Conn-pisteeseen 1 plus 1 yksikön lisäys asterixis-luokassa.13 Toissijainen tehon päätetapahtuma oli aika ensimmäiseen sairaalahoitoon, johon liittyi HE (määritelty sairaalahoidoksi sen häiriön tai sairaalahoidon vuoksi, jonka aikana HE-jakso esiintyi).14 Toissijaisena tuloksena pidettiin myös potilaan eloonjäämisprosenttia tutkimuksen aikana.

Turvallisuustulokset Kaikkia värvättyjä potilaita pyydettiin raportoimaan kaikista tutkimusjakson aikana kokeneista haittatapahtumista. Klinikalla käytiin 2 viikon välein hoitojakson loppuun asti. Viikkoina ilman kliinisiä käyntejä potilaita seurattiin puhelimitse.

Rifaksimiinimikrobiresistenssi Gram-negatiivisten bakteerien eristäminen kliinisistä ulostenäytteistä Kaikilta osallistujilta kerättiin ulostenäytteet ennen hoidon aloittamista ja tutkimuksen lopussa. Yksi gramma ulostetta suspendoitiin 10 ml:aan suolaliuosta ja vorteksoitiin voimakkaasti. Yksi ml ulostesuspensiota juovitettiin MacConkey-agarmaljojen pinnalle gramnegatiivisten laktoosifermentoijien eristämiseksi. Sitten levyjä inkuboitiin 37 °C:ssa 24 tuntia. Vaaleanpunaiset pesäkkeet poimittiin ja siivottiin uudelleen vielä kerran, sitten ne suspendoitiin 30-prosenttiseen glyseroliin (tilavuus/tilavuus) Brain Heart Infusion -liemessä (BHI) ja säilytettiin -80 °C:ssa lisäanalyyseihin asti.

Rifaksimiinin pienimmän estävän pitoisuuden (MIC) määrittäminen laktoosifermentori-isolaateille Peräkkäinen kaksinkertainen sarjalaimennusliemimenetelmä otettiin käyttöön Clinical and Laboratory Standards Instituten (CLSI) ohjeiden mukaisesti.15 Kymmenen rifaksimiinilaimennosta valmistettiin alkaen pitoisuudesta 256 µg/ml Muller Hinton -liemessä (MHB) ja jaettiin 200 µl:n eriin pyöreäpohjaisen 96-kuoppaisen levyn kuoppiin. Mukana oli kontrollikuoppa, joka valmistettiin käyttämällä 200 µl MHB:tä, johon oli ympätty 20 µl valmistettua bakteerisiirrostetta.

Ymppi valmistettiin säätämällä solut yön yli viljelystä vastaamaan McFarland-standardia 0,5 (OD600 = 0,125). Suspensio laimennettiin edelleen suhteessa 1:20 MHB:hen ja kuhunkin kuoppaan lisättiin 20 μl säädettyä ymppiä. Levyjä inkuboitiin sitten 37 °C:ssa 24 tuntia. Koe toistettiin kahdesti ja pienin rifaksimiinin pitoisuus, joka johti täydelliseen näkyvän kasvun estoon, edusti MIC-arvoa. MIC-arvoja pidettiin erilaisina, jos ne erosivat enemmän kuin kaksinkertaisen laimennoksen verran.16