Karakterisering av NK-celler under första linjens avancerad terapi Antingen som kurativ terapi för metastaserande melanom eller som adjuvant terapi för hög risk för återfall (NAKIMEL)

Natural Killer (NK) lymfocyter är cytotoxiska effektorer av det medfödda immunsvaret som är involverade i olika faser av tumörimmunövervakning. Dessa lymfocyter aktiveras vid kontakt med tumörceller och utövar direkt cytotoxisk aktivitet utan föregående immunisering. Aktiverade NK-lymfocyter producerar cytokiner, inklusive IFN-y och TNF-α, som inducerar och upprätthåller en aktivering av det adaptiva immunsvaret av CD8+-lymfocyter. Många studier i olika experimentella tumörmodeller belyser NK-cellers roll i kontrollen av metastaser.

Vårt tidigare arbete har visat att NK-celler infiltrerar primära melanom, att metastaserande patienter har förändrat blod-NK och dessutom att kemoterapi modulerar deras funktionella status. Utredarna observerade också en speciell fördelning av genpolymorfismer som kodar för NK-aktiverande receptorer hos melanompatienter i stadium IV jämfört med friska donatorer. Slutligen beskrev utredaren en ny population av NK-lymfocyter i metastaserande lymfkörtlar som dränerar melanom NK-cellaktivering regleras av en balans mellan aktiverande receptorer (NKG2D, NCR) och hämmande receptorer som binder till modulerande klassiska och icke-klassiska HLA-I-molekyler ( HLA-E och G). På senare tid har det visats att Lc NKs också uttrycker kontrollpunktsreceptorer inklusive CD96/TIGIT, NKG2A, TIM3 och PD-1 (de två senare finns på LcTs) som negativt modulerar NK-aktivering. Möjligheten att aktivera den lytiska och sekretoriska funktionen hos Lc NK genom att interferera med dessa receptorer kan representera ett alternativ som ännu inte har undersökts i immunterapibehandlingar.

På senare tid har utredaren utvecklat ett program för att förstå interaktionerna mellan tumörmutationsprofil, behandling med riktade terapier och NK-immunogenicitet. utredaren har en panel av melanomlinjer med och utan BRAF V600E-mutationen och vemurafenib-resistenta varianter har erhållits från några muterade linjer. utredaren utvärderade effekten av behandling och resistens mot BRAF-hämning på Lc NK-igenkänning och lys. Utredaren visade att en BRAF-hämmare, vemurafenib, minskade membran och lösligt uttryck av MICA/B och ULBP2, ligander för NKG2D, en aktiverande receptor som finns på Lc NKs och vissa populationer av Lc T-celler, i alla behandlade BRAF-muterade linjer. För 6 av de 7 muterade linjerna korrelerade moduleringar av uttryck av NK-ligander av vemurafenib med en lätt minskning av NK-cytotoxiska funktioner.

Vemurafenib-resistenta (R) varianter genererades och deras egenskaper jämfördes med de för känsliga (S) linjer. Förvärv av resistens mot vemurafenib inducerar en signifikant ökning av NK-funktioner (IFNg-utsöndring och mållys). De ansvariga mekanismerna involverar både uttryck av NK-receptorligander och modulering av dödsdomänreceptorer (Fas, TRAILRII). Transkriptomanalyser avslöjar olika mål av intresse i de tre paren av S/R-melanomlinjer som bär BRAF V600E-mutationen och distinkta ytterligare mutationer (inlämnat manuskript).

Baserat på våra senaste resultat antar vår hypotes att Lc NK är viktiga aktörer inom tumörimmunövervakning under nuvarande behandlingar av melanompatienter. Immunterapimetoder riktade mot dessa effektorer kan vara av intresse i kombinationer med riktade terapier eller immunterapier. Frekvensen av intratumorala Lc NKs har visat sig korrelera med närvaron av stimulerande dendritiska celler och denna miljö krävs för ett svar på anti-PD1 immunterapi. Innovativa antikroppar utvecklas för att aktivera antitumörfunktionerna hos NK-celler