Charakterisierung von NK-Zellen unter einer fortgeschrittenen First-Line-Therapie entweder als kurative Therapie für metastasierendes Melanom oder als adjuvante Therapie für ein hohes Rezidivrisiko (NAKIMEL)

Natural Killer (NK)-Lymphozyten sind zytotoxische Effektoren der angeborenen Immunantwort, die an verschiedenen Phasen der Tumorimmunüberwachung beteiligt sind. Diese Lymphozyten werden bei Kontakt mit Tumorzellen aktiviert und üben ohne vorherige Immunisierung eine direkte zytotoxische Aktivität aus. Aktivierte NK-Lymphozyten produzieren Zytokine, einschließlich IFN-γ und TNF-α, die eine Aktivierung der adaptiven Immunantwort durch CD8+-Lymphozyten induzieren und aufrechterhalten. Zahlreiche Studien in verschiedenen experimentellen Tumormodellen unterstreichen die Rolle der NK-Zellen bei der Kontrolle der Metastasierung.

Unsere bisherige Arbeit hat gezeigt, dass NK-Zellen primäre Melanome infiltrieren, dass Patienten mit Metastasen veränderte NKs im Blut haben und darüber hinaus, dass eine Chemotherapie ihren funktionellen Status moduliert. Die Forscher beobachteten auch eine besondere Verteilung von Genpolymorphismen, die für NK-aktivierende Rezeptoren von Melanompatienten im Stadium IV im Vergleich zu gesunden Spendern kodieren. Schließlich beschrieb der Forscher eine neue Population von NK-Lymphozyten in metastasierten Lymphknoten, die das Melanom entwässern. Die Aktivierung von NK-Zellen wird durch ein Gleichgewicht zwischen aktivierenden Rezeptoren (NKG2D, NCR) und inhibitorischen Rezeptoren reguliert, die an modulierende klassische und nicht-klassische HLA-I-Moleküle binden ( HLA-E und G). Vor kurzem wurde gezeigt, dass Lc-NKs auch Checkpoint-Rezeptoren exprimieren, einschließlich CD96/TIGIT, NKG2A, TIM3 und PD-1 (die letzteren 2 sind auf LcTs vorhanden), die die NK-Aktivierung negativ modulieren. Die Möglichkeit, die lytische und sekretorische Funktion von Lc-NKs durch Interferenz mit diesen Rezeptoren zu aktivieren, könnte eine noch zu erforschende Alternative in Immuntherapiebehandlungen darstellen.

In jüngerer Zeit haben die Forscher ein Programm entwickelt, um die Wechselwirkungen zwischen Tumormutationsprofil, Behandlung mit zielgerichteten Therapien und NK-Immunogenität zu verstehen. Der Prüfarzt verfügt über ein Panel von Melanomlinien mit und ohne BRAF-V600E-Mutation, und von einigen mutierten Linien wurden Vemurafenib-resistente Varianten erhalten. Der Prüfarzt bewertete die Auswirkungen der Behandlung und der Resistenz gegenüber der BRAF-Hemmung auf die Erkennung und Lyse von Lc NK. Der Prüfarzt zeigte, dass ein BRAF-Inhibitor, Vemurafenib, die Membran- und lösliche Expression von MICA/B und ULBP2, Liganden für NKG2D, einem aktivierenden Rezeptor, der auf Lc-NKs und bestimmten Populationen von Lc-T-Zellen vorhanden ist, in allen behandelten BRAF-mutierten Linien verringerte. Bei 6 der 7 mutierten Linien korrelierten Modulationen der NK-Liganden-Expression durch Vemurafenib mit einer leichten Abnahme der zytotoxischen NK-Funktionen.

Vemurafenib-resistente (R)-Varianten wurden generiert und ihre Eigenschaften mit denen sensitiver (S)-Linien verglichen. Der Erwerb einer Resistenz gegen Vemurafenib induziert eine signifikante Steigerung der NK-Funktionen (IFNg-Sekretion und Target-Lyse). Die verantwortlichen Mechanismen umfassen sowohl die Expression von NK-Rezeptorliganden als auch die Modulation von Todesdomänenrezeptoren (Fas, TRAILRII). Transkriptomanalysen zeigen verschiedene interessante Ziele in den drei Paaren von S/R-Melanomlinien, die die BRAF-V600E-Mutation und verschiedene zusätzliche Mutationen tragen (eingereichtes Manuskript).

Basierend auf unseren jüngsten Ergebnissen stellen wir die Hypothese auf, dass Lc-NKs wichtige Akteure in der Tumorimmunüberwachung während der derzeitigen Behandlung von Melanompatienten sind. Immuntherapeutische Ansätze, die auf diese Effektoren abzielen, können in Kombination mit zielgerichteten Therapien oder Immuntherapien von Interesse sein. Es wurde gezeigt, dass die Häufigkeit von intratumoralen Lc-NKs mit dem Vorhandensein von stimulierenden dendritischen Zellen korreliert, und diese Umgebung ist für eine Reaktion auf eine Anti-PD1-Immuntherapie erforderlich. Es werden neuartige Antikörper entwickelt, um die Antitumorfunktionen von NK-Zellen zu aktivieren