Karakterisering van NK-cellen onder geavanceerde eerstelijnstherapie, hetzij als curatieve therapie voor gemetastaseerd melanoom, hetzij als adjuvante therapie voor een hoog risico op herhaling (NAKIMEL)

Natural Killer (NK)-lymfocyten zijn cytotoxische effectoren van de aangeboren immuunrespons die betrokken zijn bij verschillende fasen van tumorimmunosurveillance. Deze lymfocyten worden geactiveerd bij contact met tumorcellen en oefenen directe cytotoxische activiteit uit zonder voorafgaande immunisatie. Geactiveerde NK-lymfocyten produceren cytokinen, waaronder IFN-γ en TNF-α, die een activering van de adaptieve immuunrespons door CD8+-lymfocyten induceren en in stand houden. Talrijke studies in verschillende experimentele tumormodellen benadrukken de rol van NK-cellen bij de controle van metastase.

Ons eerdere werk heeft aangetoond dat NK-cellen primaire melanomen infiltreren, dat gemetastaseerde patiënten bloed-NK's ​​hebben veranderd en bovendien dat chemotherapie hun functionele status moduleert. Onderzoekers observeerden ook een bepaalde verdeling van genpolymorfismen die coderen voor NK-activerende receptoren van stadium IV melanoompatiënten in vergelijking met gezonde donoren. Ten slotte beschreef de onderzoeker een nieuwe populatie van NK-lymfocyten in metastatische lymfeklieren die melanoom afvoeren. NK-celactivering wordt gereguleerd door een balans tussen activerende receptoren (NKG2D, NCR) en remmende receptoren die binden aan modulerende klassieke en niet-klassieke HLA-I-moleculen ( HLA-E en G). Meer recentelijk is aangetoond dat Lc NK's ook checkpoint-receptoren tot expressie brengen, waaronder CD96 / TIGIT, NKG2A, TIM3 en PD-1 (de laatste 2 zijn aanwezig op LcT's) die NK-activering negatief moduleren. De mogelijkheid om de lytische en secretoire functie van Lc NK's te activeren door deze receptoren te verstoren, kan een alternatief zijn dat nog moet worden onderzocht in immunotherapiebehandelingen.

Meer recent heeft de onderzoeker een programma ontwikkeld om de interacties tussen tumormutatieprofiel, behandeling met gerichte therapieën en NK-immunogeniciteit te begrijpen. de onderzoeker heeft een panel van melanoomlijnen met en zonder de BRAF V600E-mutatie en vemurafenib-resistente varianten zijn verkregen uit enkele gemuteerde lijnen. de onderzoeker evalueerde de impact van behandeling en resistentie tegen BRAF-remming op Lc NK-herkenning en -lysis. De onderzoeker toonde aan dat een BRAF-remmer, vemurafenib, de membraan- en oplosbare expressie van MICA/B en ULBP2 verminderde, liganden voor NKG2D, een activerende receptor aanwezig op Lc NK's en bepaalde populaties van Lc T-cellen, in alle behandelde BRAF-gemuteerde lijnen. Voor 6 van de 7 gemuteerde lijnen correleerden modulaties van de expressie van NK-liganden door vemurafenib met een lichte afname van de cytotoxische functies van NK.

Vemurafenib-resistente (R) varianten werden gegenereerd en hun kenmerken werden vergeleken met die van gevoelige (S) lijnen. De verwerving van resistentie tegen vemurafenib veroorzaakt een significante toename van NK-functies (IFNg-secretie en doelwitlysis). De verantwoordelijke mechanismen omvatten zowel de expressie van NK-receptorliganden als de modulatie van dooddomeinreceptoren (Fas, TRAILRII). Transcriptoomanalyses onthullen verschillende interessante doelwitten in de drie paar S/R-melanoomlijnen die de BRAF V600E-mutatie dragen en verschillende aanvullende mutaties (ingediend manuscript).

Op basis van onze recente resultaten veronderstellen we dat Lc NK's belangrijke spelers zijn in tumorimmunosurveillance tijdens de huidige behandelingen van melanoompatiënten. Immunotherapiebenaderingen gericht op deze effectoren kunnen interessant zijn in combinatie met gerichte therapieën of immunotherapieën. Er is aangetoond dat de frequentie van intratumorale Lc NK's correleert met de aanwezigheid van stimulerende dendritische cellen en deze omgeving is vereist voor een respons op anti-PD1-immunotherapie. Er worden innovatieve antilichamen ontwikkeld om de antitumorfuncties van NK-cellen te activeren