Caratterizzazione delle cellule NK nell'ambito della terapia avanzata di prima linea sia come terapia curativa per il melanoma metastatico che come terapia adiuvante per l'alto rischio di recidiva (NAKIMEL)

I linfociti Natural Killer (NK) sono effettori citotossici della risposta immunitaria innata che sono coinvolti in diverse fasi dell'immunosorveglianza tumorale. Questi linfociti vengono attivati ​​al contatto con le cellule tumorali ed esercitano un'attività citotossica diretta senza previa immunizzazione. I linfociti NK attivati ​​producono citochine, tra cui IFN-γ e TNF-α, che inducono e mantengono un'attivazione della risposta immunitaria adattativa da parte dei linfociti CD8+. Numerosi studi in vari modelli tumorali sperimentali evidenziano il ruolo delle cellule NK nel controllo delle metastasi.

Il nostro lavoro precedente ha dimostrato che le cellule NK si infiltrano nei melanomi primari, che i pazienti metastatici hanno alterato le NK del sangue e, inoltre, che la chemioterapia modula il loro stato funzionale. I ricercatori hanno anche osservato una particolare distribuzione dei polimorfismi genici che codificano i recettori di attivazione delle NK nei pazienti con melanoma in stadio IV rispetto ai donatori sani. Infine, l'investigatore ha descritto una nuova popolazione di linfociti NK nei linfonodi metastatici che drenano il melanoma. HLA-E e G). Più recentemente è stato dimostrato che le NK Lc esprimono anche recettori checkpoint tra cui CD96/TIGIT, NKG2A, TIM3 e PD-1 (questi ultimi 2 sono presenti su LcT) che modulano negativamente l'attivazione delle NK. La possibilità di attivare la funzione litica e secretoria delle NK Lc interferendo con questi recettori può rappresentare un'alternativa ancora da esplorare nei trattamenti immunoterapici.

Più recentemente, il ricercatore ha sviluppato un programma per comprendere le interazioni tra il profilo mutazionale del tumore, il trattamento con terapie mirate e l'immunogenicità delle NK. lo sperimentatore dispone di un pannello di linee di melanoma con e senza la mutazione BRAF V600E e le varianti resistenti al vemurafenib sono state ottenute da alcune linee mutate. lo sperimentatore ha valutato l'impatto del trattamento e della resistenza all'inibizione di BRAF sul riconoscimento e sulla lisi di Lc NK. Lo sperimentatore ha dimostrato che un inibitore di BRAF, vemurafenib, ha diminuito l'espressione di membrana e solubile di MICA/B e ULBP2, ligandi per NKG2D, un recettore attivante presente su NK Lc e alcune popolazioni di cellule T Lc, in tutte le linee BRAF mutate trattate. Per 6 delle 7 linee mutate, le modulazioni dell'espressione dei ligandi NK da parte di vemurafenib erano correlate a una leggera diminuzione delle funzioni citotossiche delle NK.

Sono state generate varianti resistenti a vemurafenib (R) e le loro caratteristiche sono state confrontate con quelle delle linee sensibili (S). L'acquisizione di resistenza a vemurafenib induce un aumento significativo delle funzioni NK (secrezione di IFNg e lisi target). I meccanismi responsabili coinvolgono sia l'espressione dei ligandi del recettore NK sia la modulazione dei recettori del dominio della morte (Fas, TRAILRII). Le analisi del trascrittoma rivelano diversi bersagli di interesse nelle tre coppie di linee di melanoma S/R che portano la mutazione BRAF V600E e mutazioni aggiuntive distinte (manoscritto inviato).

Sulla base dei nostri recenti risultati, ipotizziamo che le NK Lc siano attori importanti nell'immunosorveglianza del tumore durante gli attuali trattamenti dei pazienti con melanoma. Gli approcci di immunoterapia mirati a questi effettori possono essere interessanti in combinazione con terapie mirate o immunoterapie. È stato dimostrato che la frequenza delle Lc NK intratumorali è correlata alla presenza di cellule dendritiche stimolatrici e questo ambiente è necessario per una risposta all'immunoterapia anti-PD1. Si stanno sviluppando anticorpi innovativi per attivare le funzioni antitumorali delle cellule NK