COVAG - Covid-19 Antigen Study - Diagnostic Effect of SARS-CoV-2 Rapid Detection Tests (COVAG)

1. Bakgrund:

   Coronavirussjukdomen 2019 (COVID-19) har snabbt spridit sig över hela världen från Wuhan (Kina) sedan december 2019. Pålitlig diagnostikteknik är avgörande för kampen mot covid-19. Medan omvänd transkriptas-polymeraskedjereaktion i realtid (rRT-PCR)-baserad testning av andningsprover fortfarande är guldstandarden för COVID-19-diagnostik, har flera kommersiella analyser för antikroppar mot (SARS-CoV-2) dykt upp under de föregående månaderna ( Stocking et al., 2020).

   Genom att mäta närvaron eller frånvaron av virala proteiner (antigener), kan antigentest ge resultat som diagnostiserar en aktiv SARS-CoV-2-infektion mycket snabbare än RT-PCR eller motsvarande tester. Det har hävdats att antigentester kan ha en lägre känslighet än RT-PCR eller motsvarande RNA-baserade tester, och som ett resultat är det mycket mer sannolikt att de ger falsknegativa resultat hos individer med lägre mängder virus. Detta kan möjligen göra dem opålitliga hos individer med ett asymtomatiskt sjukdomsförlopp, hos individer under de första infektionsdagarna och senare än 5-7 dagar efter symtomdebut (SYNLAB pressmeddelande, 2020-09-22).

2. Mål:

   Syftet med denna icke-interventionella studie är att visa att snabba antigentester för SARS-CoV-2 (Abbott och Roche) ger snabba resultat och presterar lika bra som RT-PCR, åtminstone hos symtomatiska patienter med hög virusbelastning.

3. Studera design:

   Studien kommer att utföras i Corona Test Center Stuttgart Cannstatter Wasen som drivs av Dr. med. Hans-Jörg Wertenauer, Stuttgart, i nära samarbete med SYNLAB MVZ Leinfelden-Echterdingen GmbH. Cirka 2000 patienter kommer att skrivas in på efter att ha undertecknat Informed Consent Form (ICF). Efter en planerad studielängd på åtta veckor kommer utredarna att kunna samla in de nödvändiga 2000 proverna (50 patienter per dag).

   Ett studiebesök planeras för data- och blodinsamling (15,5 ml), antigentester, RT-PCR, serologiska tester, grundläggande laboratorietester som ska meddelas deltagarna och tillhörande blodprov (som anklagas för att vara relaterade till covid-19 som t.ex. inflammatoriska markörer och mikronäringsämnen och vitaminer). Dessa kommer att utföras på SYNLAB MVZ Leinfelden GmbH. Alikvoter av det insamlade materialet kommer att lagras -20 grader för kontrollmätningar och kompletterande tester, maximalt i ett år efter att den sista patienten registrerades i studien.

4. Logisk grund:

   Under de senaste veckorna har det varit mycket diskussion om snabba antigentester för SARS-CoV-2. Den senaste generationen av dessa tester, tillgängliga från flera olika leverantörer, förväntas fungera bra hos patienter med hög virusbelastning. Detta är vanligtvis fallet cirka 3-10 dagar efter infektion med viruset, när personen är smittsam och kan vara asymtomatisk eller under de första dagarna av symtom.

   Man hoppas därför att snabba antigentester kan stödja diagnosen covid-19 hos personer som har de första symtomen. I USA har vissa tester fått tillstånd för diagnostisk testning hos symtomatiska individer, inom 5-7 dagar från symtomdebut (3).

5. Risker och fördelar:

   Tre nasofaryngeala pinnprover och ett blodprov kommer att tas från var och en av deltagarna. Antigentester, RT-PCR och serologiska och kompletterande laboratorietester utförs i denna studie.

   Risker från nasofaryngeala pinnprover: Den största risken är obehag. Sällan - 1 på tusen - svimmar personen som får pinnen av att vara superkänslig eller får en mild näsblod.

   Risker från blodtagning: Riskerna med venpunktion inkluderar att vara den vanligaste reaktionen. Signifikanta komplikationer (definierade som cellulit, flebit, diafores, hypotoni, nära synkope, synkope) observeras vid mindre blåmärken på platsen där blodet tas och hematom (ungefär 12 %), med mindre blåmärken hos ungefär 3,5 % av patienterna. Den vanligaste enstaka signifikanta komplikationen är hypotoni med en frekvens på cirka 2,6 %. Synkope ses hos mindre än 1 % av patienterna. Andra allvarliga lokala reaktioner som cellulit eller flebit är mycket sällsynta (Galena HJ, J. Fam. Öva. 1992 maj;34(5):582-4). Blodprover utförs därför på var och en av studieplatserna under övervakning av en läkare med legitimation.

   Fördelar för folkhälsan: Point of care-antigentestning är en integrerad del av den nuvarande nationella teststrategin för att förhindra spridning av COVID 19 https://www.bundesgesundheitsministerium.de/fileadmin/Dateien/3_Downloads/C/C oronavirus/Nationale_Teststrategie_kurz_041220.pdf Det finns emellertid betydande osäkerhet om antigentestningens tillförlitlighet i jämförelse med testets guldstandard, rt-PCR. Såvitt författarna vet har en prospektiv, tillräckligt stor och utmanbar utvärdering av antigentestning under praktikförhållanden inte slutförts hittills. Den aktuella studien är avsedd att överbrygga denna lucka. Dess resultat krävs omedelbart och kommer att ha omedelbar inverkan på nuvarande rekommendationer för användning av antigentestning. I synnerhet kommer det att visa på svagheter och styrkor hos antigentestning och kommer att göra det möjligt att uppväga potentiella tekniska begränsningar av antigentestning jämfört med rt-PCR mot fördelen med kortsiktig tillgänglighet av testresultat.

   Vidare, den grundliga registreringen av det kliniska hälsotillståndet och den grundläggande laboratorieanalysen som utförs i denna studie, kommer att kunna få ytterligare insikter i kliniska prediktorer för känsligheten för COVID 19.

   Fördelar för individen. Deltagarna kommer att gynnas på två sätt. Annat än med rt-PCR kommer de att få resultaten av antigentestningen på en gång och på plats. Genom att dessutom erbjuda två antigentester samtidigt, kommer resultaten av point-of-care-testningen att vara ännu mer tillförlitliga än resultatet av ett enda test. Vidare erbjuds deltagarna en kostnadsfri grundläggande laboratoriehälsokontroll inklusive följande hälsomarkörer: grundläggande blodkroppar, C-reaktivt protein, HbA1c, kolesterol, triglycerider, LDL-kolesterol, HDL-kolesterol, gamma-glutamyl-transferas, kreatinin tillsammans med kreatinin som härrör från formel, D-vitamin.

   Utredarna drar slutsatsen att fördelarna med denna studie för sjukvården som står inför det livshotande och för de enskilda studiedeltagarna klart överväger de mindre och hanterbara riskerna.

6. Befolkning:

Utredarna kommer att inkludera cirka 2000 på varandra följande manliga och kvinnliga patienter i åldern 18 år eller äldre som går på Corona Test Center Stuttgart Cannstadter Wasen, där RT-PCR-testning för SARS-CoV-2 är medicinskt indicerat eller efterfrågat.

6.1 Inklusionskriterier:

Ämnen som är kvalificerade för inkludering i denna studie måste uppfylla följande kriterier:

1. Undertecknat informerat samtycke måste erhållas innan studiedeltagandet. Patienten måste vara kapabel att förstå prövningens natur, betydelse och innebörd.
2. Ålder 18 år eller äldre

6.2 Uteslutningskriterier:

1. Brist på informerat samtycke
2. Oförmåga att förstå rättegångens natur, betydelse och innebörd.
3. Allvarliga kliniska tillstånd som kräver akut sjukhusvistelse
4. Barn och ungdomar under 18 år

7. Procedurer för informerat samtycke Kvalificerade försökspersoner får endast inkluderas i studien efter att ha lämnat IRB/IEC-godkänt informerat samtycke. Informerat samtycke måste erhållas innan några studiespecifika procedurer utförs (bilaga 2).

8. Bedömningsschema och bedömningar:

Informerat samtycke, insamling av demografiska data och X relevant medicinsk historia SARS-CoV-2 Rapid Antigen Test (Roche), PANBIO Covid-19 Ag Rapid Test (Abbott), RT-PCR Serologiskt test (blodprov, 15,5 ml) Tilläggstestning 8.1 Demografi, medicinsk historia, provtagning: Patientdemografiska data och annan karakteristisk data som ska samlas in om alla patienter inkluderar kön, ålder, vikt, längd, relevant medicinsk historia, vitala tecken och symtom som är karakteristiska för COVID-19 inklusive exakta tidsspecifikationer för uppkomst av symtom.

Ingen information om medicin kommer att samlas in. Tre oberoende nasofaryngeala pinnprover kommer att erhållas enligt standardprocedurer För att undvika partiskhet på grund av sekvensen för att ta nasofarynxproverna kommer utredarna att slumpmässigt fördela patienterna i tre provtagningsgrupper Grupp 1: RT-PCR - Antigentest Roche - Antigen Test Abbott Group 2: Antigen Test Roche - Antigen Test Abbott - RT-PCR Grupp 3: Antigen Test Abbott - RT-PCR - Antigen Test Roche

Tilldelningen av patienter till var och en av dessa grupper kommer att tydligt specificeras på journalformulären. Det kommer att finnas två blanketter för varje patient:

Blankett 1: Rutinanalysformulär som används av insamlingsstället för patientidentifiering som kommer att märkas med en streckkod som bär patientens studienummer. Blankett 2: Studiespecifik blankett som innehåller en kopia av streckkoden med studienumret, initialer av patienten och födelseår.

8.2 SARS-CoV-2 Rapid Antigen Test (Roche): SARS-CoV-2 Rapid Antigen Test är en snabb kromatografisk immunanalys för kvalitativ detektion av specifika antigener av SARS-CoV-2 som finns i den mänskliga nasofarynxen.

8.3 PANBIO Covid-19 Ag Rapid Test (Abbott): Panbio COVID-19 Ag Rapid Test Device är ett in vitro diagnostiskt snabbtest för kvalitativ detektering av SARS-CoV-2-antigen (Ag) i humana nasofaryngeala pinnprover.

8.4 RT-PCR: RT-PCR utvärderar närvaron eller frånvaron av SARS-CoV-2-genomet i prover från nasofaryngeala och orofaryngeala pinnprover och kommer att utföras enligt de protokoll som fastställts av SYNLAB MVZ Leinfelden GmbH.

8.5 Serologiska och kompletterande tester: Blodprover (10 ml heparinplasma och 5,5 ml EDTA-plasma) kommer att samlas in för att detektera närvaron av antikroppar (specifikt immunsvar) mot SARS-CoV-2 antigena proteiner (t.ex. Roche, Abbott). Specifikt kommer alla deltagare att erbjudas att få resultaten för följande analyter som ett kvitto på deras deltagande i studien: antal blodkroppar, C-reaktivt protein, HbA1c, kolesterol, triglycerider, LDL-kolesterol, HDL-kolesterol, gamma-glutamyl-transferas , kreatinin tillsammans med kreatinin som härrör från formeln, vitamin D. Backupprover kommer att samlas in för att bestämma hjälpparametrar som inflammatoriska markörer och mikronäringsämnen och vitaminer.

9. Observationsperiod:

NIS schema:

Start av patientrekryteringen: 1 februari 2021 Slut på observationsperioden: 31 mars 2021 Slutrapport: 31 maj 2021

10. Dataanalys och statistiska metoder: En databas med pseudonymiserade data och resultat kommer att genereras. Utredarna antar att vart och ett av antigentesterna har en sensitivitet och specificitet på 1,0 i förhållande till RT-PCR som kommer att betraktas som referenstestet. Ett p-värde på mindre än 0,05 kommer att krävas för att beakta vart och ett av de två snabbtesterna som motsvarar RT-PCR.

Med hjälp av effektberäkningar för chi-kvadrattest för två frihetsgrader krävs typ I felsannolikhet lika med 0,05, krävs (1-typ II felsannolikhet) lika med 0,8 och önskad effektstorlek lika med 0,1 (liten effektstorlek i känslan av (4)) får utredarna ett antal minst N=964 observationer för konsekutiva tester av inkommande patienter för att uppfylla våra krav på signifikans och förmåga att svara på den första forskningsfrågan. På grund av det förväntade antalet på cirka 10 % positiva av 1 000 fall är antagandet om en chi-kvadratfördelning tillåtet.

Utredarna kommer också att ta upp frågan om olika sannolikheter före test kommer att påverka känsligheten hos antigentesterna. Utredarna förväntar sig att två stora indikationsgrupper med olika sannolikheter före testet bidrar med cirka 90 procent av de rt-PCR-positiva proverna: a) deltagare som tagits in för rt-PCR-testning av en läkare b) deltagare som söker rt-PCR-testning på rekommendation av min hälsa vårdmyndigheter/kontaktpersoner. Totalt cirka 200 rt-PCR-prover kommer att krävas för att detektera en statistiskt signifikant skillnad mellan dessa två grupper vid ett typ 1-fel på 0,05 och en statistisk styrka på 0,80. För att besvara denna andra fråga kommer utredarna att utöka studien till 2000 deltagare.

11. Etik: Studieprotokollet kommer att skickas till den etiska kommittén, medicinska fakulteten Mannheim, universitetet i Heidelberg och studien kommer inte att påbörjas förrän skriftligt tillstånd erhållits. Studien kommer att genomföras i enlighet med tysk lag, EU:s regler för kliniska prövningar och Helsingforsdeklarationen om de etiska principerna för klinisk forskning.

11.1 Patientinformation och informerat samtycke: Dokumentets syfte, art och omfattning måste förklaras skriftligen för varje patient innan han eller hon inkluderas i studien (bilaga 1). Patienten får inte tas med om han eller hon inte har gett skriftligt medgivande (bilaga 2). Patienter kommer att ha rätt att vägra att delta eller att dra sig ur studien av vilken anledning som helst och i vilket skede som helst utan att det påverkar kvaliteten eller tillgängligheten av deras hälsovård.

11.2 Dataskydd: De patientuppgifter som samlas in för studien kommer att registreras i pseudonymiserad form (bilaga 4), med ett patientnummer som inte kan hänföras till patientens identitet. I händelse av att studieresultaten publiceras får personuppgifterna endast användas om patientens anonymitet upprätthålls. Patientens data är garanterat alltid absolut skyddade.