COVAG – Covid-19-antigeenitutkimus – SARS-CoV-2-pikatunnistustestien diagnostinen tehokkuus (COVAG)

1. Tausta:

   Koronavirustauti 2019 (COVID-19) on levinnyt nopeasti maailmanlaajuisesti Wuhanista (Kiina) joulukuusta 2019 lähtien. Luotettavat diagnostiikkatekniikat ovat avainasemassa COVID-19:n torjunnassa. Vaikka reaaliaikainen käänteiskopioijapolymeraasiketjureaktioon (rRT-PCR) perustuva hengitysnäytteiden testaus on edelleen kultainen standardi COVID-19-diagnostiikassa, useita kaupallisia määrityksiä vasta-ainemäärityksiä (SARS-CoV-2) vastaan ​​on ilmaantunut viime kuukausina ( Stocking et al., 2020).

   Virusproteiinien (antigeenien) läsnäolon tai puuttumisen mittaaminen antigeenitesteillä voi antaa tuloksia, jotka diagnosoivat aktiivisen SARS-CoV-2-infektion paljon nopeammin kuin RT-PCR tai vastaavat testit. On väitetty, että antigeenitesteillä voi olla pienempi herkkyys kuin RT-PCR:llä tai vastaavilla RNA-pohjaisilla testeillä, ja sen seurauksena ne antavat paljon todennäköisemmin vääriä negatiivisia tuloksia yksilöillä, joilla on pienempi virusmäärä. Tämä voi mahdollisesti tehdä niistä epäluotettavia henkilöillä, joilla taudin kulku on oireeton, henkilöillä tartunnan ensimmäisinä päivinä ja myöhemmin kuin 5-7 päivää oireiden alkamisen jälkeen (SYNLABin lehdistötiedote 22.9.2020).

2. Tavoite:

   Tämän ei-interventiotutkimuksen tavoitteena on osoittaa, että nopeat SARS-CoV-2-antigeenitestit (Abbott ja Roche) antavat nopeita tuloksia ja toimivat yhtä hyvin kuin RT-PCR, ainakin oireellisilla potilailla, joilla on suuri viruskuorma.

3. Opintosuunnitelma:

   Tutkimus suoritetaan Corona Test Centerissä Stuttgart Cannstatter Wasenissa, jota hoitaa Dr. med. Hans-Jörg Wertenauer, Stuttgart, läheisessä yhteistyössä SYNLAB MVZ Leinfelden-Echterdingen GmbH:n kanssa. Noin 2 000 potilasta otetaan mukaan ilmoitettuaan suostumuslomakkeen (ICF) allekirjoittamisen jälkeen. Suunnitellun kahdeksan viikon tutkimuksen aikana tutkijat voivat kerätä tarvittavat 2000 näytettä (50 potilasta päivässä).

   Yksi opintokäynti on suunniteltu tietojen ja veren keräämiseksi (15,5 ml), antigeenitesteistä, RT-PCR:stä, serologisista testeistä, osallistujille välitettävistä peruslaboratoriotutkimuksista ja oheisverikokeista (joiden syytetään liittyvän COVID-19:ään, esim. tulehdusmerkkiaineet sekä mikroravinteet ja vitamiinit). Nämä esitetään SYNLAB MVZ Leinfelden GmbH:ssa. Alikvootteja kerätyistä materiaaleista säilytetään -20 asteessa kontrollimittauksia ja oheistutkimuksia varten, enintään vuoden ajan viimeisen potilaan ottamisesta mukaan tutkimukseen.

4. Perustelut:

   Viime viikkoina on keskusteltu paljon SARS-CoV-2-antigeenin nopeista testeistä. Näiden testien uusimman sukupolven, joita on saatavilla useilta eri toimittajilta, odotetaan toimivan hyvin potilailla, joilla on suuri viruskuorma. Tämä tapahtuu yleensä noin 3-10 päivää virustartunnan jälkeen, jolloin henkilö on tarttuva ja voi olla oireeton tai oireiden ensimmäisinä päivinä.

   Sen vuoksi toivotaan, että nopeat antigeenitestit voivat tukea COVID-19-diagnoosia ihmisillä, joilla on ensimmäiset oireet. Yhdysvalloissa jotkin testit ovat saaneet luvan diagnostisiin testeihin oireellisilla yksilöillä 5–7 päivän kuluessa oireiden alkamisesta (3).

5. Riskit ja edut:

   Jokaiselta osallistujalta otetaan kolme nenänielun vanupuikkoa ja yksi verinäyte. Tässä tutkimuksessa suoritetaan antigeenitestejä, RT-PCR sekä serologisia ja oheislaboratoriotutkimuksia.

   Nenänielun vanupuikoista aiheutuvat riskit: Suurin riski on epämukavuus. Harvoin - yksi tuhansista - vanupuikkoa vastaanottava henkilö pyörtyy superherkkyydestä tai saa lievän nenäverenvuotoa.

   Verenoton riskit: Suonenpunktion riskeihin kuuluu se, että se on yleisin reaktio. Merkittäviä komplikaatioita (määritelty selluliittiksi, flebiittiksi, hikoiluksi, hypotensioksi, lähellä pyörtymistä, pyörtymistä) havaitaan lieviä mustelmia verenottokohdassa ja hematoomaa (noin 12 %), ja pieniä mustelmia noin 3,5 %:lla potilaista. Yleisin yksittäinen merkittävä komplikaatio on hypotensio, jonka esiintymistiheys oli noin 2,6 %. Pyörtymistä havaitaan alle 1 %:lla potilaista. Muut vakavat paikalliset reaktiot, kuten selluliitti tai flebiitti, ovat hyvin harvinaisia ​​(Galena HJ, J. Fam. Harjoittele. 1992 toukokuu; 34(5):582-4). Verinäytteet otetaan siksi jokaisessa tutkimuspaikassa lautakunnan laillistetun lääkärin valvonnassa.

   Edut kansanterveydelle: Hoitopisteen antigeenitestaus on olennainen osa nykyistä kansallista testausstrategiaa, jolla pyritään estämään COVID 19:n leviäminen https://www.bundesgesundheitsministerium.de/fileadmin/Dateien/3_Downloads/C/C oronavirus/Nationale_Teststrategie_kurz_041220.pdf Antigeenitestauksen luotettavuuteen liittyy kuitenkin merkittävää epävarmuutta verrattuna testauksen kultastandardiin, rt-PCR:ään. Kirjoittajien tietämyksen mukaan prospektiivista, riittävän laajaa ja haastavaa antigeenitestauksen arviointia käytännön olosuhteissa ei ole vielä saatu päätökseen. Tämän tutkimuksen tarkoituksena on kuroa umpeen tämä kuilu. Sen tuloksia tarvitaan kiireellisesti, ja niillä on välitön vaikutus nykyisiin antigeenitestauksen käyttöä koskeviin suosituksiin. Se osoittaa erityisesti antigeenitestauksen heikkouksia ja vahvuuksia ja antaa mahdollisuuden ylittää antigeenitestauksen mahdolliset tekniset rajoitukset verrattuna rt-PCR:ään verrattuna testitulosten lyhytaikaiseen saatavuuteen.

   Lisäksi kliinisen terveydentilan perusteellinen kirjaaminen ja tässä tutkimuksessa tehdyt laboratorioperusanalyysit mahdollistavat lisätietoa COVID 19 -alttiuden kliinisistä ennustajista.

   Edut yksilölle. Osallistujat hyötyvät kahdella tavalla. Muut kuin rt-PCR:n avulla he saavat antigeenitestin tulokset heti ja paikan päällä. Lisäksi tarjoamalla kaksi antigeenitestiä samanaikaisesti, hoitopistetestin tulokset ovat jopa luotettavampia kuin yhden testin tulos. Lisäksi osallistujille tarjotaan maksuton laboratorion perusterveystarkastus, joka sisältää seuraavat terveysmerkit: perusverisolujen määrä, C-reaktiivinen proteiini, HbA1c, kolesteroli, triglyseridit, LDL-kolesteroli, HDL-kolesteroli, gamma-glutamyylitransferaasi, kreatiniini yhdessä kaavaperäisen kreatiniinin, D-vitamiinin kanssa.

   Tutkijat päättelevät, että tämän tutkimuksen hyödyt hengenvaarallisen terveydenhuoltojärjestelmän ja yksittäisten tutkimuksen osallistujien kannalta ovat selvästi suuremmat kuin pienet ja hallittavissa olevat riskit.

6. Väestö:

Tutkijoihin kuuluu noin 2 000 peräkkäistä vähintään 18-vuotiasta mies- ja naispotilasta, jotka osallistuvat Corona Test Centeriin Stuttgart Cannstadter Wasenissa ja joille SARS-CoV-2:n RT-PCR-testaus on lääketieteellisesti aiheellinen tai pyydetty.

6.1 Sisällyttämiskriteerit:

Koehenkilöiden, jotka voidaan ottaa mukaan tähän tutkimukseen, on täytettävä seuraavat kriteerit:

1. Allekirjoitettu tietoinen suostumus on hankittava ennen tutkimukseen osallistumista. Potilaan on kyettävä ymmärtämään tutkimuksen luonne, merkitys ja vaikutukset.
2. Ikä 18 vuotta tai enemmän

6.2 Poissulkemiskriteerit:

1. Tietoisen suostumuksen puute
2. Kyvyttömyys ymmärtää oikeudenkäynnin luonnetta, merkitystä ja seurauksia.
3. Vakavat kliiniset tilat, jotka vaativat kiireellistä sairaalahoitoa
4. Lapset ja alle 18-vuotiaat nuoret

7. Tietoisen suostumuksen menettelyt Soveltuvia koehenkilöitä voidaan ottaa mukaan tutkimukseen vasta saatuaan IRB/IEC:n hyväksymän tietoisen suostumuksen. Tietoinen suostumus on hankittava ennen tutkimuskohtaisten toimenpiteiden suorittamista (Liite 2).

8. Arvioinnin aikataulu ja arvioinnit:

Ilmoitettu suostumuslomake, demografisten tietojen kerääminen ja X-merkityksellinen sairaushistoria SARS-CoV-2 nopea antigeenitesti (Roche), PANBIO Covid-19 Ag -pikatesti (Abbott), RT-PCR serologinen testi (verinäyte, 15,5 ml) Täydentävät testaukset 8.1 Väestötiedot, sairaushistoria, näytteenotto: Kaikista potilaista kerättävät potilasdemografiset tiedot ja muut tunnusomaiset tiedot sisältävät sukupuolen, iän, painon, pituuden, asiaankuuluvan sairaushistorian, COVID-19:lle tyypilliset elintoiminnot ja oireet, mukaan lukien tarkat aikatiedot oireiden alkamista.

Lääkkeistä ei kerätä tietoja. Kolme riippumatonta nenänielun vanupuikkoa otetaan vakiomenettelyjä noudattaen. Nenänielun vanupuikkonäytteiden ottojärjestyksen aiheuttaman vinoutumisen välttämiseksi tutkijat jakavat potilaat satunnaisesti kolmeen näytteenottoryhmään Ryhmä 1: RT-PCR - Antigeenitesti Roche - Antigeenitesti Abbott Group 2: Antigeenitesti Roche - Antigeenitesti Abbott - RT-PCR Ryhmä 3: Antigeenitesti Abbott - RT-PCR - Antigeenitesti Roche

Potilaiden jakaminen kuhunkin näistä ryhmistä ilmoitetaan selvästi tapauslomakkeissa. Jokaiselle potilaalle on kaksi lomaketta:

Lomake 1: Keräyspisteen käyttämä rutiinianalyysipyyntölomake potilaan tunnistamiseen, joka on merkitty viivakoodilla, jossa on potilaan tutkimusnumero. Lomake 2: Tutkimuskohtainen lomake, joka sisältää kopion viivakoodista, jossa on tutkimuksen numero ja nimikirjaimet potilaan ja syntymävuoden.

8.2 SARS-CoV-2-pikaantigeenitesti (Roche): SARS-CoV-2-pikaantigeenitesti on nopea hoitopisteen kromatografinen immunomääritys ihmisen nenänielun spesifisten SARS-CoV-2-antigeenien kvalitatiiviseen havaitsemiseen.

8.3 PANBIO Covid-19 Ag Rapid Test (Abbott): Panbio COVID-19 Ag Rapid Test Device on in vitro diagnostinen pikatesti SARS-CoV-2-antigeenin (Ag) kvalitatiiviseen havaitsemiseen ihmisen nenänielun vanupuikkonäytteistä.

8.4 RT-PCR: RT-PCR arvioi SARS-CoV-2-genomin olemassaolon tai puuttumisen nenänielun ja suunielun pyyhkäisynäytteistä, ja se suoritetaan SYNLAB MVZ Leinfelden GmbH:ssa vahvistettujen protokollien mukaisesti.

8.5 Serologiset ja liitännäistutkimukset: Verinäytteitä (10 ml hepariiniplasmaa ja 5,5 ml EDTA-plasmaa) otetaan SARS-CoV-2:n antigeenisten proteiinien (esim. Roche, Abbott). Erityisesti kaikille osallistujille tarjotaan seuraavien analyyttien tulokset osoituksena tutkimukseen osallistumisesta: verisolujen määrä, C-reaktiivinen proteiini, HbA1c, kolesteroli, triglyseridit, LDL-kolesteroli, HDL-kolesteroli, gamma-glutamyylitransferaasi , kreatiniini sekä kaavaperäinen kreatiniini, D-vitamiini. Varanäytteet kerätään apuparametrien, kuten tulehdusmerkkiaineiden sekä mikroravinteiden ja vitamiinien määrittämiseksi.

9. Tarkkailujakso:

NIS aikataulu:

Potilasrekrytoinnin aloitus: 1.2.2021 Tarkkailujakson loppu: 31.3.2021 Loppuraportti: 31.5.2021

10. Tietojen analysointi ja tilastolliset menetelmät: Pseudonyymisistä tiedoista ja tuloksista luodaan tietokanta. Tutkijat olettavat, että kunkin antigeenitestin herkkyys ja spesifisyys on 1,0 suhteessa RT-PCR:ään, jota pidetään vertailutestinä. P-arvo on pienempi kuin 0,05, jotta kumpaakin pikatestiä voidaan pitää RT-PCR:ää vastaavina.

Teholaskelmien avulla khin-neliötesteissä kahdelle vapausasteelle vaadittu tyypin I virhetodennäköisyys on 0,05, vaadittu (1-tyypin II virhetodennäköisyys) 0,8 ja vaadittu tehon koko on 0,1 (pieni efektin koko (4)) mielessä tutkijat saavat useita vähintään N=964 havaintoja saapuvien potilaiden peräkkäistä testausta varten täyttääkseen vaatimukset merkityksellisyydestä ja voimasta vastata ensimmäiseen tutkimuskysymykseen. Koska odotettavissa oleva luku on noin 10 % positiivista 1000 tapauksesta, khin neliöjakauman oletus on sallittu.

Tutkijat käsittelevät myös kysymystä, vaikuttavatko erilaiset testiä edeltävät todennäköisyydet antigeenitestien herkkyyteen. Tutkijat odottavat, että kaksi suurta indikaatioryhmää, joilla on erilaiset esitestin todennäköisyydet, muodostavat noin 90 prosenttia rt-PCR-positiivisista näytteistä: a) osallistujat, jotka lääkäri hyväksyi rt-PCR-testaukseen b) osallistujat, jotka hakevat rt-PCR-testiä terveyteni suosituksesta. hoitoviranomaiset/yhteyshenkilöt. Yhteensä noin 200 rt-PCR-näytettä tarvitaan tilastollisesti merkitsevän eron havaitsemiseksi näiden kahden ryhmän välillä tyypin 1 virheellä 0,05 ja tilastollisella teholla 0,80. Vastatakseen tähän toiseen kysymykseen tutkijat laajentavat tutkimuksen 2000 osallistujaan.

11. Etiikka: Tutkimuspöytäkirja toimitetaan Heidelbergin yliopiston Mannheimin lääketieteellisen tiedekunnan eettiselle toimikunnalle ja tutkimusta ei aloiteta ennen kuin on saatu kirjallinen lupa. Tutkimus toteutetaan Saksan lainsäädännön, EU:n kliinisen tutkimuksen säännösten ja Helsingin julistuksen kliinisen tutkimuksen eettisistä periaatteista mukaisesti.

11.1 Potilastiedot ja tietoinen suostumus: Asiakirjan tavoite, luonne ja laajuus tulee selittää kirjallisesti jokaiselle potilaalle ennen kuin hänet otetaan mukaan tutkimukseen (Liite 1). Potilasta ei saa ottaa mukaan, ellei hän ole antanut kirjallista suostumusta (Liite 2). Potilaalla on oikeus kieltäytyä osallistumasta tutkimukseen tai vetäytyä tutkimuksesta mistä tahansa syystä ja missä tahansa vaiheessa vaikuttamatta hänen terveydenhuoltonsa laatuun tai saatavuuteen.

11.2 Tietosuoja: Tutkimusta varten kerätyt potilastiedot tallennetaan pseudonymisoidussa muodossa (Liite 4), jossa on potilasnumero, jota ei voida yhdistää potilaan henkilöllisyyteen. Tutkimustulosten julkistamisen yhteydessä henkilötietoja voidaan käyttää vain, jos potilaan nimettömyys säilyy. Potilaan tiedot taataan aina ehdottoman suojassa.