COVAG - Исследование антигена Covid-19 - диагностическая эффективность тестов быстрого обнаружения SARS-CoV-2 (COVAG)

1. Фон:

   Коронавирусная болезнь 2019 года (COVID-19) быстро распространилась по всему миру из Уханя (Китай) с декабря 2019 года. Надежные диагностические технологии имеют решающее значение в борьбе с COVID-19. В то время как тестирование образцов из дыхательных путей на основе полимеразной цепной реакции с обратной транскриптазой в режиме реального времени (рРТ-ПЦР) остается золотым стандартом диагностики COVID-19, в предыдущие месяцы появилось несколько коммерческих тестов на антитела против (SARS-CoV-2) ( Стокинг и др., 2020).

   Измеряя наличие или отсутствие вирусных белков (антигенов), тесты на антигены могут дать результаты для диагностики активной инфекции SARS-CoV-2 намного быстрее, чем ОТ-ПЦР или эквивалентные тесты. Утверждалось, что тесты на антигены могут иметь более низкую чувствительность, чем ОТ-ПЦР или эквивалентные тесты на основе РНК, и в результате они с гораздо большей вероятностью дадут ложноотрицательные результаты у людей с меньшим количеством вируса. Это может сделать их ненадежными у лиц с бессимптомным течением заболевания, у лиц в первые дни заражения и позднее 5-7 дней после появления симптомов (пресс-релиз СИНЛАБ от 22.09.2020).

2. Цель:

   Цель этого неинтервенционного исследования — продемонстрировать, что экспресс-тесты на антигены SARS-CoV-2 (Abbott и Roche) дают быстрые результаты и работают так же хорошо, как ОТ-ПЦР, по крайней мере, у пациентов с симптомами и высокой вирусной нагрузкой.

3. Дизайн исследования:

   Исследование будет проводиться в Штутгартском испытательном центре Corona Test Center Cannstatter Wasen, управляемом доктором мед. Ханс-Йорг Вертенауэр, Штутгарт, в тесном сотрудничестве с SYNLAB MVZ Leinfelden-Echterdingen GmbH. Приблизительно 2000 пациентов будут зарегистрированы после подписания формы информированного согласия (ICF). После запланированной продолжительности исследования в восемь недель исследователи смогут собрать необходимые 2000 образцов (50 пациентов в день).

   Запланировано одно учебное посещение для сбора данных и крови (15,5 мл), тестов на антигены, ОТ-ПЦР, серологических тестов, основных лабораторных тестов, которые должны быть сообщены участникам, и дополнительных анализов крови (обвиняемых в связи с COVID-19, таких как маркеры воспаления, микроэлементы и витамины). Они будут проводиться в SYNLAB MVZ Leinfelden GmbH. Аликвоты собранных материалов будут храниться при температуре -20 градусов для контрольных измерений и вспомогательных исследований, максимально в течение одного года после включения в исследование последнего пациента.

4. Обоснование:

   В последние недели было много дискуссий об экспресс-тестах на антигены SARS-CoV-2. Ожидается, что последнее поколение этих тестов, доступных от нескольких разных поставщиков, будет хорошо работать у пациентов с высокой вирусной нагрузкой. Обычно это происходит примерно через 3-10 дней после заражения вирусом, когда человек заразен, и может протекать бессимптомно или в первые дни симптомов.

   Поэтому есть надежда, что экспресс-тесты на антигены помогут диагностировать COVID-19 у людей с первыми симптомами. В США некоторые тесты получили разрешение для диагностического тестирования у лиц с симптомами в течение 5-7 дней после появления симптомов (3).

5. Риски и преимущества:

   У каждого участника будут взяты три мазка из носоглотки и один образец крови. В этом исследовании проводятся тесты на антигены, ОТ-ПЦР, серологические и вспомогательные лабораторные тесты.

   Риски мазков из носоглотки: самый большой риск – дискомфорт. Редко — 1 случай на тысячу — человек, получающий мазок, теряет сознание из-за сверхчувствительности или легкого кровотечения из носа.

   Риски взятия крови: Риски венепункции включают в себя наиболее распространенную реакцию. Значительные осложнения (определяемые как флегмона, флебиты, потоотделение, гипотония, предобморочные состояния, обмороки) наблюдаются при незначительных кровоподтеках в месте забора крови и гематомах (приблизительно у 12 %), при незначительных кровоподтеках примерно у 3,5 % больных. Наиболее частым единичным значимым осложнением является артериальная гипотензия с частотой примерно 2,6%. Обмороки наблюдаются менее чем у 1% пациентов. Другие серьезные местные реакции, такие как целлюлит или флебит, возникают очень редко (Galena HJ, J. Fam. Практика. 1992 г., май; 34(5):582-4). Поэтому забор крови проводится в каждом из исследовательских центров под наблюдением лицензированного врача.

   Польза для общественного здравоохранения: тестирование на антиген в месте оказания медицинской помощи является неотъемлемым компонентом текущей национальной стратегии тестирования, направленной на предотвращение распространения COVID 19 https://www.bundesgesundheitsministerium.de/fileadmin/Dateien/3_Downloads/C/C оронавирус/Nationale_Teststrategie_kurz_041220.pdf Однако существует значительная неопределенность в отношении надежности тестирования на антиген по сравнению с золотым стандартом тестирования, ОТ-ПЦР. Насколько известно авторам, проспективная, достаточно масштабная и сложная оценка тестирования антигенов в практических условиях еще не завершена. Настоящее исследование призвано восполнить этот пробел. Его результаты срочно необходимы и окажут непосредственное влияние на текущие рекомендации по использованию тестирования на антигены. В частности, он продемонстрирует слабые и сильные стороны тестирования на антигены и позволит перевесить потенциальные технические ограничения тестирования на антигены по сравнению с ОТ-ПЦР за счет преимущества краткосрочной доступности результатов тестирования.

   Кроме того, тщательная регистрация клинического состояния здоровья и базовый лабораторный анализ, проведенные в этом исследовании, позволят получить дополнительное представление о клинических предикторах восприимчивости к COVID-19.

   Польза для человека. Участники получат две выгоды. В отличие от ОТ-ПЦР, они получат результаты тестирования на антиген сразу и на месте. Кроме того, предлагая одновременно два теста на антигены, результаты тестирования по месту оказания медицинской помощи будут даже более надежными, чем результат одного теста. Кроме того, участникам предлагается бесплатное базовое лабораторное обследование здоровья, включающее следующие действенные маркеры здоровья: основной анализ крови, С-реактивный белок, HbA1c, холестерин, триглицериды, холестерин ЛПНП, холестерин ЛПВП, гамма-глутамилтрансфераза, креатинин. наряду с полученным из формулы креатинином, витамином D.

   Исследователи пришли к выводу, что преимущества этого исследования для системы здравоохранения, столкнувшейся с опасными для жизни случаями, и для отдельных участников исследования явно перевешивают незначительные и управляемые риски.

6. Население:

Исследователи будут включать примерно 2000 последовательных пациентов мужского и женского пола в возрасте 18 лет и старше, посещающих Corona Test Center Stuttgart Cannstadter Wasen, которым по медицинским показаниям или запрошено тестирование RT-PCR на SARS-CoV-2.

6.1 Критерии включения:

Субъекты, имеющие право на включение в это исследование, должны соответствовать следующим критериям:

1. Подписанное информированное согласие должно быть получено до участия в исследовании. Пациент должен быть способен понять характер, значение и смысл исследования.
2. Возраст 18 лет и старше

6.2 Критерии исключения:

1. Отсутствие информированного согласия
2. Неспособность понять характер, значение и последствия судебного разбирательства.
3. Тяжелые клинические состояния, требующие экстренной госпитализации
4. Дети и подростки в возрасте до 18 лет

7. Процедуры информированного согласия Подходящие субъекты могут быть включены в исследование только после предоставления информированного согласия, одобренного IRB/IEC. Информированное согласие должно быть получено перед выполнением каких-либо процедур, связанных с исследованием (Приложение 2).

8. График оценки и оценки:

Форма информированного согласия, Сбор демографических данных и X соответствующей истории болезни Экспресс-тест на антигены SARS-CoV-2 (Roche), Экспресс-тест PANBIO Covid-19 Ag (Abbott), RT-PCR Серологический тест (образец крови, 15,5 мл) Вспомогательное тестирование 8.1 Демография, история болезни, выборка: демографические данные пациентов и другие характеристические данные, которые должны быть собраны по всем пациентам, включают пол, возраст, вес, рост, соответствующий анамнез, жизненные показатели и симптомы, характерные для COVID-19, включая точное указание времени для появление симптомов.

Информация о лекарствах не собирается. Три независимых мазка из носоглотки будут получены в соответствии со стандартными процедурами. Чтобы избежать какой-либо систематической ошибки из-за последовательности взятия мазков из носоглотки, исследователи случайным образом распределят пациентов по трем группам выборки Группа 1: ОТ-ПЦР - Тест на антиген Roche - Тест на антиген Группа Abbott 2: Antigen Test Roche — Antigen Test Abbott — RT-PCR Группа 3: Antigen Test Abbott — RT-PCR — Antigen Test Roche

Отнесение пациентов к каждой из этих групп будет четко указано в регистрационных карточках. Для каждого пациента будет две формы:

Форма 1: Лист запроса на рутинный анализ, используемый пунктом сбора для идентификации пациента, который будет помечен штрих-кодом с номером исследования пациента. Форма 2: Форма для конкретного исследования, содержащая копию штрих-кода с номером исследования, инициалами. пациента и год рождения.

8.2 Экспресс-тест на антигены SARS-CoV-2 (Roche): Экспресс-тест на антигены SARS-CoV-2 представляет собой экспресс-хроматографический иммуноанализ для качественного обнаружения специфических антигенов SARS-CoV-2, присутствующих в носоглотке человека.

8.3 Экспресс-тест PANBIO Covid-19 Ag (Abbott): устройство для экспресс-тестирования Panbio COVID-19 Ag представляет собой диагностический экспресс-тест in vitro для качественного обнаружения антигена SARS-CoV-2 (Ag) в образцах мазков из носоглотки человека.

8.4 ОТ-ПЦР: ОТ-ПЦР оценивает наличие или отсутствие генома SARS-CoV-2 в образцах мазков из носоглотки и ротоглотки и будет проводиться в соответствии с протоколами, установленными в SYNLAB MVZ Leinfelden GmbH.

8.5 Серологическое и вспомогательное тестирование: образцы крови (10 мл плазмы с гепарином и 5,5 мл плазмы с ЭДТА) будут взяты для выявления наличия антител (специфический иммунный ответ) против антигенных белков SARS-CoV-2 (например, Рош, Эбботт). В частности, всем участникам будет предложено получить результаты для следующих аналитов в подтверждение их участия в исследовании: число клеток крови, С-реактивный белок, HbA1c, холестерин, триглицериды, холестерин ЛПНП, холестерин ЛПВП, гамма-глутамилтрансфераза. , креатинин вместе с креатинином, полученным из смеси, витамином D. Будут собраны резервные образцы для определения вспомогательных параметров, таких как маркеры воспаления, микроэлементы и витамины.

9. Период наблюдения:

Расписание НИШ:

Начало набора пациентов: 1 февраля 2021 г. Окончание периода наблюдения: 31 марта 2021 г. Окончательный отчет: 31 мая 2021 г.

10.Анализ данных и статистические методы: будет создана база данных псевдонимизированных данных и результатов. Исследователи предполагают, что каждый из тестов на антигены имеет чувствительность и специфичность 1,0 по отношению к ОТ-ПЦР, который будет рассматриваться как эталонный тест. Чтобы считать каждый из двух экспресс-тестов эквивалентным ОТ-ПЦР, потребуется значение р менее 0,05.

С помощью расчетов мощности для критерия хи-квадрат для двух степеней свободы требуемая вероятность ошибки I рода равна 0,05, требуемая (1-я вероятность ошибки II рода) равна 0,8 и требуемая величина эффекта равна 0,1 (малая величина эффекта в В смысле (4)) исследователи получают ряд не менее N=964 наблюдений для последовательного тестирования поступающих пациентов, чтобы выполнить наши требования по значимости и мощности для ответа на первый исследовательский вопрос. Из-за ожидаемого числа положительных результатов около 10% из 1000 случаев допустимо предположение о распределении хи-квадрат.

Исследователи также рассмотрят вопрос о том, повлияют ли различные предварительные вероятности на чувствительность тестов на антиген. Исследователи предполагают, что две основные группы показаний с различной вероятностью до тестирования составляют примерно 90 процентов положительных образцов ОТ-ПЦР: а) участники, допущенные врачом для проведения ОТ-ПЦР-тестирования; органы по уходу/контактные лица. В общей сложности потребуется около 200 образцов RT-PCR для выявления статистически значимой разницы между этими двумя группами при ошибке 1-го типа 0,05 и статистической мощности 0,80. Чтобы ответить на этот второй вопрос, исследователи расширят исследование до 2000 участников.

11. Этика. Протокол исследования будет представлен Комитету по этике Медицинского факультета Мангейма Гейдельбергского университета, и исследование не начнется до тех пор, пока не будет получено письменное разрешение. Исследование будет проводиться в соответствии с законодательством Германии, правилами клинических испытаний ЕС и Хельсинкской декларацией об этических принципах клинических исследований.

11.1 Информация для пациента и информированное согласие. Цель, характер и объем документа должны быть объяснены в письменной форме каждому пациенту до его или ее включения в исследование (Приложение 1). Пациент не должен быть включен, если он или она не дали письменное согласие (Приложение 2). Пациенты будут иметь право отказаться от участия или выйти из исследования по любой причине и на любом этапе, что не повлияет на качество или доступность их медицинского обслуживания.

11.2 Защита данных. Данные пациента, собранные для исследования, будут записаны в псевдонимизированной форме (Приложение 4) с номером пациента, который не может быть связан с личностью пациента. В случае публикации результатов исследования персональные данные могут быть использованы только при условии соблюдения анонимности пациента. Данные пациента гарантированно всегда абсолютно защищены.