COVAG - Covid-19 Antigen Study - skuteczność diagnostyczna testów szybkiego wykrywania SARS-CoV-2 (COVAG)

1. Tło:

   Choroba koronawirusowa 2019 (COVID-19) szybko rozprzestrzeniła się na całym świecie z Wuhan (Chiny) od grudnia 2019 r. Niezawodne technologie diagnostyczne mają kluczowe znaczenie w walce z COVID-19. Podczas gdy badanie próbek układu oddechowego oparte na reakcji łańcuchowej polimerazy z odwrotną transkryptazą (rRT-PCR) w czasie rzeczywistym pozostaje złotym standardem w diagnostyce COVID-19, w ciągu ostatnich miesięcy pojawiło się kilka komercyjnych testów przeciwciał przeciwko (SARS-CoV-2) ( Stocking i in., 2020).

   Mierząc obecność lub nieobecność białek wirusowych (antygenów), testy antygenowe mogą dać wyniki diagnozujące aktywną infekcję SARS-CoV-2 znacznie szybciej niż RT-PCR lub równoważne testy. Argumentowano, że testy antygenowe mogą mieć niższą czułość niż RT-PCR lub równoważne testy oparte na RNA, w wyniku czego jest znacznie bardziej prawdopodobne, że dadzą wyniki fałszywie ujemne u osób z mniejszą ilością wirusa. Może to spowodować, że będą one niewiarygodne u osób z bezobjawowym przebiegiem choroby, u osób w pierwszych dniach zakażenia i później niż 5-7 dni po wystąpieniu objawów (komunikat prasowy SYNLAB, 22.09.2020).

2. Cel:

   Celem tego nieinterwencyjnego badania jest wykazanie, że szybkie testy antygenowe w kierunku SARS-CoV-2 (Abbott i Roche) dają szybkie wyniki i działają równie dobrze jak RT-PCR, przynajmniej u pacjentów z objawami i wysokim mianem wirusa.

3. Projekt badania:

   Badanie zostanie przeprowadzone w Corona Test Centre Stuttgart Cannstatter Wasen prowadzonym przez Dr. med. Hans-Jörg Wertenauer, Stuttgart, w ścisłej współpracy z SYNLAB MVZ Leinfelden-Echterdingen GmbH. Około 2000 pacjentów zostanie zapisanych po podpisaniu formularza świadomej zgody (ICF). Po zaplanowanym czasie trwania badania wynoszącym osiem tygodni badacze będą mogli pobrać wymagane 2000 próbek (50 pacjentów dziennie).

   Planowana jest jedna wizyta studyjna w celu pobrania danych i krwi (15,5 ml), testów antygenowych, RT-PCR, testów serologicznych, podstawowych badań laboratoryjnych, które zostaną przekazane uczestnikom, oraz pomocniczych badań krwi (podejrzanych o związek z COVID-19, jak np. markery stanu zapalnego oraz mikroelementy i witaminy). Odbędą się one w SYNLAB MVZ Leinfelden GmbH. Porcje pobranego materiału będą przechowywane w -20 stopniach do pomiarów kontrolnych i badań pomocniczych, maksymalnie przez rok od włączenia ostatniego pacjenta do badania.

4. Racjonalne uzasadnienie:

   W ostatnich tygodniach dużo dyskutowano na temat szybkich testów antygenowych w kierunku SARS-CoV-2. Oczekuje się, że najnowsza generacja tych testów, dostępna od kilku różnych dostawców, będzie dobrze działać u pacjentów z wysokim mianem wirusa. Zwykle ma to miejsce około 3-10 dni po zakażeniu wirusem, gdy osoba jest zaraźliwa i może przebiegać bezobjawowo lub w pierwszych dniach objawów.

   Istnieje zatem nadzieja, że ​​szybkie testy antygenowe mogą wesprzeć diagnozę COVID-19 u osób, u których występują pierwsze objawy. W USA niektóre testy uzyskały autoryzację do wykonywania badań diagnostycznych u osób z objawami, w ciągu 5-7 dni od wystąpienia objawów (3).

5. Ryzyko i korzyści:

   Od każdego uczestnika zostaną pobrane trzy wymazy z jamy nosowo-gardłowej i jedna próbka krwi. W tym badaniu wykonywane są testy antygenowe, RT-PCR oraz serologiczne i pomocnicze testy laboratoryjne.

   Zagrożenia związane z wymazami z jamy nosowo-gardłowej: Największym ryzykiem jest dyskomfort. Rzadko - 1 na tysiące - osoba otrzymująca wymaz traci przytomność z powodu nadwrażliwości lub dostaje lekkiego krwawienia z nosa.

   Zagrożenia związane z pobieraniem krwi: Ryzyko wkłucia do żyły obejmuje bycie najczęstszą reakcją. Istotne powikłania (określane jako zapalenie tkanki łącznej, zapalenie żył, obfite pocenie się, niedociśnienie, stan bliski omdlenia, omdlenie) obserwuje się w postaci niewielkiego siniaka w miejscu pobrania krwi i krwiaka (około 12%), z niewielkimi siniakami u około 3,5% pacjentów. Najczęstszym pojedynczym istotnym powikłaniem jest hipotonia występująca z częstością około 2,6%. Omdlenie obserwuje się u mniej niż 1% pacjentów. Inne poważne reakcje miejscowe, takie jak zapalenie tkanki łącznej lub zapalenie żył, są bardzo rzadkie (Galena HJ, J. Fam. ćwiczyć. 1992 maj;34(5):582-4). Pobieranie krwi jest zatem przeprowadzane w każdym z ośrodków badawczych pod nadzorem lekarza z licencją zarządu.

   Korzyści dla zdrowia publicznego: Testowanie antygenu w miejscu opieki jest integralną częścią aktualnej krajowej strategii testowania służącej zapobieganiu rozprzestrzeniania się COVID 19 https://www.bundesgesundheitsministerium.de/fileadmin/Dateien/3_Downloads/C/C oronavirus/Nationale_Teststrategie_kurz_041220.pdf Istnieje jednak znaczna niepewność co do wiarygodności testów antygenowych w porównaniu ze złotym standardem testów, rt-PCR. Według wiedzy autorów prospektywna, dostatecznie obszerna i dająca się zakwestionować ocena testów antygenowych w warunkach praktycznych nie została jeszcze zakończona. Obecne badanie ma na celu wypełnienie tej luki. Jej wyniki są pilnie potrzebne i będą miały natychmiastowy wpływ na aktualne zalecenia dotyczące stosowania testów antygenowych. W szczególności wykaże słabe i mocne strony testowania antygenów i pozwoli przeważyć potencjalne ograniczenia techniczne testowania antygenu w porównaniu z rt-PCR w porównaniu z korzyścią płynącą z krótkoterminowej dostępności wyników testu.

   Co więcej, dokładne rejestrowanie klinicznego stanu zdrowia i podstawowa analiza laboratoryjna przeprowadzona w tym badaniu pozwoli uzyskać dalszy wgląd w kliniczne predyktory podatności na COVID 19.

   Korzyści dla jednostki. Uczestnicy skorzystają na dwa sposoby. Inaczej niż w przypadku rt-PCR, wyniki testów antygenowych uzyskają od razu i na miejscu. Ponadto, oferując jednocześnie dwa testy antygenowe, wyniki testu w miejscu opieki będą jeszcze bardziej wiarygodne niż wynik pojedynczego testu. Ponadto uczestnikom oferowane jest bezpłatne podstawowe badanie laboratoryjne obejmujące następujące markery stanu zdrowia: podstawowa morfologia krwi, białko C-reaktywne, HbA1c, cholesterol, trójglicerydy, cholesterol LDL, cholesterol HDL, transferaza gamma-glutamylowa, kreatynina wraz z kreatyniną pochodzącą z formuły, witaminą D.

   Badacze doszli do wniosku, że korzyści płynące z tego badania dla systemu opieki zdrowotnej, który ma do czynienia z zagrożeniem życia, oraz dla poszczególnych uczestników badania wyraźnie przewyższają niewielkie i możliwe do opanowania ryzyko.

6. Populacja:

Badacze obejmą około 2000 kolejnych pacjentów płci męskiej i żeńskiej w wieku 18 lat lub starszych uczęszczających do Corona Test Center Stuttgart Cannstadter Wasen, u których badanie RT-PCR na obecność SARS-CoV-2 jest wskazane lub wymagane ze względów medycznych.

6.1 Kryteria włączenia:

Osoby kwalifikujące się do włączenia do tego badania muszą spełniać następujące kryteria:

1. Przed udziałem w badaniu należy uzyskać podpisaną świadomą zgodę. Pacjent musi być w stanie zrozumieć charakter, znaczenie i implikacje badania.
2. Wiek 18 lat lub więcej

6.2 Kryteria wykluczenia:

1. Brak świadomej zgody
2. Niemożność zrozumienia natury, znaczenia i implikacji procesu.
3. Ciężkie stany kliniczne wymagające pilnej hospitalizacji
4. Dzieci i młodzież w wieku poniżej 18 lat

7. Procedury świadomej zgody Kwalifikujący się uczestnicy mogą zostać włączeni do badania wyłącznie po przedstawieniu świadomej zgody zatwierdzonej przez IRB/IEC. Świadomą zgodę należy uzyskać przed wykonaniem jakichkolwiek procedur związanych z badaniem (Załącznik 2).

8. Harmonogram ocen i oceny:

Formularz świadomej zgody, Zbiór danych demograficznych i X odpowiednich historii medycznych Szybki test antygenowy SARS-CoV-2 (Roche), Szybki test PANBIO Covid-19 Ag (Abbott), RT-PCR Test serologiczny (próbka krwi, 15,5 ml) Badania pomocnicze 8.1 Dane demograficzne, historia medyczna, pobieranie próbek: Dane demograficzne pacjenta i inne charakterystyczne dane, które należy zebrać w odniesieniu do wszystkich pacjentów, obejmują płeć, wiek, wagę, wzrost, odpowiednią historię medyczną, parametry życiowe i objawy charakterystyczne dla COVID-19, w tym dokładne specyfikacje czasu początek objawów.

Żadne informacje o lekach nie będą zbierane. Trzy niezależne wymazy z jamy nosowo-gardłowej zostaną pobrane zgodnie ze standardowymi procedurami. Aby uniknąć jakichkolwiek odchyleń wynikających z kolejności pobierania wymazów z jamy nosowo-gardłowej, badacze losowo przydzielą pacjentów do trzech grup pobierania próbek. Grupa 1: RT-PCR — test antygenowy Roche — test antygenowy Abbott 2: Test antygenowy Roche — Test antygenowy Abbott — RT-PCR Grupa 3: Test antygenowy Abbott — RT-PCR — Test antygenowy Roche

Przydział pacjentów do każdej z tych grup będzie wyraźnie określony w kartach przypadków. Dla każdego pacjenta będą dostępne dwa formularze:

Formularz 1: Formularz wniosku o rutynową analizę stosowany przez punkt pobrań w celu identyfikacji pacjenta, który będzie oznaczony kodem kreskowym zawierającym numer badania pacjenta Formularz 2: Formularz dotyczący konkretnego badania zawierający kopię kodu kreskowego z numerem badania, inicjałami pacjenta i rok urodzenia.

8.2 Szybki test antygenowy SARS-CoV-2 (Roche): Szybki test antygenowy SARS-CoV-2 to szybki chromatograficzny test immunologiczny do jakościowego wykrywania specyficznych antygenów SARS-CoV-2 obecnych w ludzkiej nosogardzieli.

8.3 Szybki test PANBIO Covid-19 Ag (Abbott): Urządzenie do szybkiego testu Panbio COVID-19 Ag to szybki test diagnostyczny in vitro do jakościowego wykrywania antygenu SARS-CoV-2 (Ag) w próbkach wymazu z jamy nosowo-gardłowej człowieka.

8.4 RT-PCR: RT-PCR ocenia obecność lub brak genomu SARS-CoV-2 w próbkach pobranych z wymazów z jamy nosowo-gardłowej i ustno-gardłowej i zostanie przeprowadzony zgodnie z protokołami ustalonymi w SYNLAB MVZ Leinfelden GmbH.

8.5 Testy serologiczne i pomocnicze: Pobrane zostaną próbki krwi (10 ml osocza heparyny i 5,5 ml osocza EDTA) w celu wykrycia obecności przeciwciał (swoistej odpowiedzi immunologicznej) przeciwko białkom antygenowym SARS-CoV-2 (np. Roche, Abbott). W szczególności wszystkim uczestnikom zostanie zaproponowane otrzymanie wyników dla następujących analitów w potwierdzeniu ich udziału w badaniu: morfologia krwi, białko C-reaktywne, HbA1c, cholesterol, trójglicerydy, cholesterol LDL, cholesterol HDL, transferaza gamma-glutamylowa , kreatynina wraz z kreatyniną pochodzącą z formuły, witaminą D. Pobrane zostaną próbki zapasowe w celu określenia parametrów pomocniczych, takich jak markery stanu zapalnego oraz mikroelementy i witaminy.

9. Okres obserwacji:

Harmonogram NIS:

Rozpoczęcie rekrutacji pacjentów: 1 lutego 2021 r. Zakończenie okresu obserwacji: 31 marca 2021 r. Raport końcowy: 31 maja 2021 r.

10.Analiza danych i metody statystyczne: Zostanie wygenerowana baza danych pseudonimizowanych danych i wyników. Badacze stawiają hipotezę, że każdy z testów antygenowych ma czułość i specyficzność równą 1,0 w stosunku do RT-PCR, który zostanie uznany za test referencyjny. Do rozważenia każdego z dwóch szybkich testów równoważnych z RT-PCR wymagana będzie wartość p mniejsza niż 0,05.

Za pomocą obliczeń mocy dla testów chi-kwadrat dla dwóch stopni swobody, wymagane prawdopodobieństwo błędu I rodzaju równe 0,05, wymagane (1-prawdopodobieństwo błędu II rodzaju) równe 0,8 i wymagana wielkość efektu równa 0,1 (wielkość małego efektu w sens (4)) badacze uzyskują liczbę co najmniej N=964 obserwacji do kolejnych badań przychodzących pacjentów, aby spełnić nasze wymagania dotyczące istotności i mocy, aby odpowiedzieć na pierwsze pytanie badawcze. Ze względu na oczekiwaną liczbę około 10% dodatnich przypadków na 1000, dopuszczalne jest założenie rozkładu chi-kwadrat.

Badacze odpowiedzą również na pytanie, czy różne prawdopodobieństwa przed testem wpłyną na czułość testów antygenowych. Badacze spodziewają się, że dwie główne grupy wskazań o różnych prawdopodobieństwach przed testem będą stanowiły około 90 procent próbek pozytywnych rt-PCR: a) uczestnicy przyjęci na badanie rt-PCR przez lekarza b) uczestnicy ubiegający się o wykonanie testu rt-PCR na zalecenie mój stan zdrowia władze opiekuńcze/osoby kontaktowe. W sumie około 200 próbek rt-PCR będzie potrzebnych do wykrycia statystycznie istotnej różnicy między tymi dwiema grupami przy błędzie typu 1 równym 0,05 i mocy statystycznej równej 0,80. Aby odpowiedzieć na to drugie pytanie, badacze rozszerzą badanie na 2000 uczestników.

11. Etyka: Protokół badania zostanie przedłożony Komisji Etyki na Wydziale Lekarskim Mannheim Uniwersytetu w Heidelbergu, a badanie nie rozpocznie się, dopóki nie zostanie uzyskana pisemna zgoda. Badanie zostanie przeprowadzone zgodnie z prawem niemieckim, unijnymi przepisami dotyczącymi badań klinicznych oraz Deklaracją Helsińską w sprawie zasad etycznych badań klinicznych.

11.1 Informacje dla pacjentów i świadoma zgoda: Cel, charakter i zakres dokumentu należy wyjaśnić na piśmie każdemu pacjentowi przed włączeniem go do badania (Załącznik 1). Pacjent nie może być włączony, chyba że wyraził pisemną zgodę (Załącznik 2). Pacjenci będą mieli prawo odmówić udziału lub wycofać się z badania z dowolnego powodu i na każdym etapie bez wpływu na jakość lub dostępność ich opieki zdrowotnej.

11.2 Ochrona danych: Dane pacjenta zebrane na potrzeby badania zostaną zapisane w formie pseudonimizowanej (Załącznik 4), z numerem pacjenta, którego nie można przypisać do tożsamości pacjenta. W przypadku publikacji wyników badań dane osobowe mogą być wykorzystane wyłącznie pod warunkiem zachowania anonimowości pacjenta. Gwarantujemy, że dane pacjenta będą zawsze całkowicie chronione.