COVAG - Estudio del antígeno Covid-19: la eficacia diagnóstica de las pruebas de detección rápida de SARS-CoV-2 (COVAG)

1. Fondo:

   La enfermedad por coronavirus 2019 (COVID-19) se ha extendido rápidamente por todo el mundo desde Wuhan (China) desde diciembre de 2019. Las tecnologías de diagnóstico confiables son fundamentales para la lucha contra COVID-19. Si bien las pruebas basadas en la reacción en cadena de la polimerasa con transcriptasa inversa en tiempo real (rRT-PCR) de muestras respiratorias siguen siendo el estándar de oro para el diagnóstico de COVID-19, durante los meses anteriores han surgido varios ensayos comerciales para anticuerpos contra (SARS-CoV-2) ( Stocking et al., 2020).

   Al medir la presencia o ausencia de proteínas virales (antígenos), las pruebas de antígenos pueden proporcionar resultados que diagnostican una infección activa por SARS-CoV-2 mucho más rápido que la RT-PCR o pruebas equivalentes. Se ha argumentado que las pruebas de antígeno pueden tener una sensibilidad más baja que la RT-PCR o las pruebas equivalentes basadas en ARN y, como resultado, es mucho más probable que den resultados falsos negativos en personas con cantidades más bajas de virus. Es posible que esto los haga poco fiables en personas con un curso asintomático de la enfermedad, en personas en los primeros días de infección y más de 5 a 7 días después de la aparición de los síntomas (comunicado de prensa de SYNLAB, 22.09.2020).

2. Objetivo:

   El objetivo de este estudio no intervencionista es demostrar que las pruebas rápidas de antígenos para el SARS-CoV-2 (Abbott y Roche) brindan resultados rápidos y funcionan igual de bien que la RT-PCR, al menos en pacientes sintomáticos con cargas virales altas.

3. Diseño del estudio:

   El estudio se realizará en el Centro de Pruebas Corona de Stuttgart Cannstatter Wasen operado por el Dr. med. Hans-Jörg Wertenauer, Stuttgart, en estrecha colaboración con SYNLAB MVZ Leinfelden-Echterdingen GmbH. Se inscribirán aproximadamente 2000 pacientes después de haber firmado el Formulario de consentimiento informado (ICF). Con una duración de estudio programada de ocho semanas, los investigadores podrán recolectar las 2000 muestras requeridas (50 pacientes por día).

   Está prevista una visita de estudio para la recogida de datos y sangre (15,5 ml), pruebas de antígenos, RT-PCR, pruebas serológicas, pruebas de laboratorio básicas que se comunicarán a los participantes y análisis de sangre auxiliares (incriminados por estar relacionados con COVID-19 como marcadores inflamatorios, y micronutrientes y vitaminas). Estos se realizarán en SYNLAB MVZ Leinfelden GmbH. Se almacenarán alícuotas de los materiales recolectados a -20 grados para mediciones de control y pruebas auxiliares, como máximo durante un año después de que el último paciente se inscribió en el estudio.

4. Razón fundamental:

   En las últimas semanas, se ha debatido mucho sobre las pruebas rápidas de antígenos para el SARS-CoV-2. Se espera que la generación más reciente de estas pruebas, disponible de varios proveedores diferentes, funcione bien en pacientes con cargas virales altas. Este suele ser el caso aproximadamente 3-10 días después de la infección con el virus, cuando la persona es contagiosa, y puede estar asintomática o en los primeros días de síntomas.

   Por lo tanto, se espera que las pruebas rápidas de antígenos puedan respaldar el diagnóstico de COVID-19 en personas que tienen los primeros síntomas. En EE. UU., algunas pruebas han recibido autorización para realizar pruebas diagnósticas en individuos sintomáticos, dentro de los 5-7 días desde el inicio de los síntomas (3).

5. Riesgos y beneficios:

   Se obtendrán tres hisopos nasofaríngeos y una muestra de sangre de cada uno de los participantes. En este estudio se realizan pruebas de antígenos, RT-PCR y pruebas de laboratorio serológicas y auxiliares.

   Riesgos de los hisopos nasofaríngeos: el mayor riesgo es la incomodidad. En raras ocasiones, 1 entre miles, la persona que recibe el hisopo se desmaya por ser muy sensible o tiene una leve hemorragia nasal.

   Riesgos de la extracción de sangre: Los riesgos de la venopunción incluyen ser la reacción más común. Complicaciones significativas (definidas como celulitis, flebitis, diaforesis, hipotensión, presíncope, síncope) se observan en hematomas leves en el sitio de extracción de sangre y hematoma (12 % aproximadamente), con hematomas leves en aproximadamente un 3,5 % de los pacientes. La complicación significativa aislada más frecuente es la hipotensión con una frecuencia de aproximadamente 2,6%. El síncope se observa en menos del 1% de los pacientes. Otras reacciones locales graves como celulitis o flebitis son muy raras (Galena HJ, J. Fam. Practica 1992 mayo; 34 (5): 582-4). Por lo tanto, el muestreo de sangre se lleva a cabo en cada uno de los sitios de estudio bajo la supervisión de un médico autorizado por la junta.

   Beneficios para la salud pública: la prueba de antígenos en el punto de atención es un componente integral de la estrategia de prueba nacional actual que sirve para prevenir la propagación de COVID 19 https://www.bundesgesundheitsministerium.de/fileadmin/Dateien/3_Downloads/C/C oronavirus/Nationale_Teststrategie_kurz_041220.pdf Sin embargo, existe una incertidumbre significativa en cuanto a la confiabilidad de las pruebas de antígenos en comparación con el estándar de oro de las pruebas, la rt-PCR. Según el conocimiento de los autores, hasta el momento no se ha completado una evaluación prospectiva, suficientemente grande y cuestionable de las pruebas de antígenos en condiciones prácticas. El presente estudio pretende cerrar esta brecha. Sus resultados se requieren con urgencia y tendrán un impacto inmediato en las recomendaciones actuales para el uso de pruebas de antígenos. En particular, demostrará las debilidades y fortalezas de las pruebas de antígenos y permitirá compensar las posibles limitaciones técnicas de las pruebas de antígenos en comparación con la rt-PCR frente a la ventaja de la disponibilidad a corto plazo de los resultados de las pruebas.

   Además, el registro completo del estado de salud clínico y los análisis de laboratorio básicos realizados en este estudio permitirán obtener más información sobre los predictores clínicos de la susceptibilidad a la COVID 19.

   Beneficios para el individuo. Los participantes se beneficiarán de dos maneras. Aparte de con rt-PCR, obtendrán los resultados de la prueba de antígeno de una vez y en el sitio. Además, al ofrecer dos pruebas de antígenos simultáneamente, los resultados de las pruebas en el punto de atención serán aún más confiables que el resultado de una sola prueba. Además, a los participantes se les ofrece un control de salud de laboratorio básico gratuito que incluye los siguientes marcadores de salud procesables: hemograma básico, proteína C reactiva, HbA1c, colesterol, triglicéridos, colesterol LDL, colesterol HDL, gamma-glutamil-transferasa, creatinina junto con creatinina derivada de la fórmula, vitamina D.

   Los investigadores concluyen que los beneficios de este estudio para el sistema de atención médica que se enfrenta a los riesgos para la vida y para los participantes individuales del estudio superan claramente los riesgos menores y manejables.

6. Población:

Los investigadores incluirán aproximadamente 2000 pacientes masculinos y femeninos consecutivos de 18 años o más que asistan al Corona Test Center Stuttgart Cannstadter Wasen, en quienes la prueba RT-PCR para SARS-CoV-2 esté médicamente indicada o solicitada.

6.1 Criterios de inclusión:

Los sujetos elegibles para su inclusión en este estudio deben cumplir con los siguientes criterios:

1. Se debe obtener un consentimiento informado firmado antes de la participación en el estudio. El paciente debe ser capaz de comprender la naturaleza, el significado y las implicaciones del ensayo.
2. Edad 18 años o más

6.2 Criterios de exclusión:

1. Falta de consentimiento informado
2. Incapacidad para comprender la naturaleza, el significado y las implicaciones del juicio.
3. Condiciones clínicas graves que requieren hospitalización de emergencia.
4. Niños y adolescentes menores de 18 años

7. Procedimientos de consentimiento informado Los sujetos elegibles solo pueden incluirse en el estudio después de proporcionar el consentimiento informado aprobado por el IRB/IEC. Se debe obtener el consentimiento informado antes de realizar cualquier procedimiento específico del estudio (Apéndice 2).

8. Calendario de evaluación y evaluaciones:

Formulario de Consentimiento Informado, Recolección de datos demográficos y X Antecedentes Médicos relevantes SARS-CoV-2 Rapid Antigen Test (Roche), PANBIO Covid-19 Ag Rapid Test (Abbott), RT-PCR Serological test (muestra de sangre, 15,5 ml) Pruebas auxiliares 8.1 Datos demográficos, historial médico, muestreo: Los datos demográficos del paciente y otros datos característicos que se recopilarán de todos los pacientes incluyen sexo, edad, peso, altura, historial médico relevante, signos vitales y síntomas característicos de COVID-19, incluidas especificaciones precisas de tiempo para inicio de los síntomas.

No se recopilará información sobre medicamentos. Se obtendrán tres hisopos nasofaríngeos independientes siguiendo procedimientos estándar Para evitar cualquier sesgo debido a la secuencia de toma de hisopos nasofaríngeos, los investigadores asignarán aleatoriamente a los pacientes a tres grupos de muestreo Grupo 1: RT-PCR - Prueba de antígeno Roche - Prueba de antígeno Grupo Abbott 2: Prueba de antígeno Roche - Prueba de antígeno Abbott - RT-PCR Grupo 3: Prueba de antígeno Abbott - RT-PCR - Prueba de antígeno Roche

La asignación de pacientes a cada uno de estos grupos se especificará claramente en los formularios de registro de casos. Habrá dos formularios para cada paciente:

Formulario 1: Hoja de solicitud de análisis de rutina utilizada por el punto de recolección para la identificación del paciente, que se etiquetará con un código de barras con el número de estudio de un paciente Formulario 2: Formulario específico del estudio que contiene una copia del código de barras con el número de estudio, iniciales del paciente y el año de nacimiento.

8.2 Prueba rápida de antígeno SARS-CoV-2 (Roche): La prueba rápida de antígeno SARS-CoV-2 es un inmunoensayo cromatográfico rápido en el punto de atención para la detección cualitativa de antígenos específicos de SARS-CoV-2 presentes en la nasofaringe humana.

8.3 Prueba rápida PANBIO Covid-19 Ag (Abbott): Panbio COVID-19 Ag Rapid Test Device es una prueba rápida de diagnóstico in vitro para la detección cualitativa del antígeno SARS-CoV-2 (Ag) en muestras de hisopos nasofaríngeos humanos.

8.4 RT-PCR: la RT-PCR evalúa la presencia o ausencia del genoma del SARS-CoV-2 en muestras de hisopos nasofaríngeos y orofaríngeos y se realizará de acuerdo con los protocolos establecidos en SYNLAB MVZ Leinfelden GmbH.

8.5 Pruebas serológicas y auxiliares: Se recolectarán muestras de sangre (10 ml de plasma con heparina y 5,5 ml de plasma con EDTA) para detectar la presencia de anticuerpos (respuesta inmunitaria específica) contra las proteínas antigénicas del SARS-CoV-2 (p. Roche, Abbott). Específicamente, a todos los participantes se les ofrecerá recibir los resultados de los siguientes analitos en reconocimiento a su participación en el estudio: hemograma, proteína C reactiva, HbA1c, colesterol, triglicéridos, colesterol LDL, colesterol HDL, gamma-glutamil-transferasa , creatinina junto con creatinina derivada de la fórmula, vitamina D. Se recolectarán muestras de respaldo para determinar parámetros auxiliares como marcadores inflamatorios y micronutrientes y vitaminas.

9. Período de observación:

horario NIS:

Inicio del reclutamiento de pacientes: 1 de febrero de 2021 Fin del período de observación: 31 de marzo de 2021 Informe final: 31 de mayo de 2021

10. Análisis de datos y métodos estadísticos: Se generará una base de datos de los datos y resultados seudonimizados. Los investigadores plantean la hipótesis de que cada una de las pruebas de antígeno tiene una sensibilidad y especificidad de 1,0 en relación con la RT-PCR, que se considerará como la prueba de referencia. Se requerirá un valor de p inferior a 0,05 para considerar cada una de las dos pruebas rápidas equivalentes a RT-PCR.

Con la ayuda de cálculos de potencia para pruebas de chi-cuadrado para dos grados de libertad, probabilidad de error tipo I requerida igual a 0,05, (probabilidad de error 1-tipo II) requerida igual a 0,8 y tamaño del efecto requerido igual a 0,1 (tamaño del efecto pequeño en el sentido de (4)) los investigadores obtienen un número de al menos N = 964 observaciones para pruebas consecutivas de pacientes entrantes para cumplir con nuestros requisitos de significación y poder para responder la primera pregunta de investigación. Debido al número esperado de alrededor del 10% positivo de cada 1000 casos, se permite la suposición de una distribución de chi-cuadrado.

Los investigadores también abordarán la cuestión de si las diferentes probabilidades previas a la prueba afectarán la sensibilidad de las pruebas de antígeno. Los investigadores esperan que dos grupos de indicaciones principales con diferentes probabilidades previas a la prueba aporten aproximadamente el 90 por ciento de las muestras positivas de rt-PCR: a) participantes admitidos para la prueba de rt-PCR por un médico b) participantes que buscan la prueba de rt-PCR por recomendación de mi salud autoridades de atención/personas de contacto. Se requerirá un total de aproximadamente 200 muestras de rt-PCR para detectar una diferencia estadísticamente significativa entre estos dos grupos con un error de tipo 1 de 0,05 y una potencia estadística de 0,80. Para responder a esta segunda pregunta, los investigadores ampliarán el estudio a 2000 participantes.

11. Ética: El protocolo del estudio se presentará al Comité de Ética de la Facultad de Medicina de Mannheim, Universidad de Heidelberg y el estudio no comenzará hasta que se obtenga el permiso por escrito. El estudio se llevará a cabo de conformidad con la legislación alemana, las normas de ensayos clínicos de la UE y la Declaración de Helsinki sobre los principios éticos de la investigación clínica.

11.1 Información del paciente y Consentimiento informado: El objetivo, la naturaleza y el alcance del documento deben ser explicados por escrito a cada paciente antes de que sea incluido en el estudio (Anexo 1). El paciente no debe ser incluido a menos que haya dado su consentimiento por escrito (Anexo 2). Los pacientes tendrán derecho a negarse a participar o retirarse del estudio por cualquier motivo y en cualquier etapa sin afectar la calidad o accesibilidad de su atención médica.

11.2 Protección de datos: Los datos de los pacientes recogidos para el estudio se registrarán de forma seudonimizada (Anexo 4), con un número de paciente que no podrá atribuirse a la identidad del paciente. En caso de que se publiquen los resultados del estudio, los datos personales solo podrán utilizarse si se mantiene el anonimato del paciente. Los datos del paciente están garantizados para estar siempre absolutamente protegidos.