COVAG - Covid-19 Antigen Undersøgelse - den diagnostiske effektivitet af SARS-CoV-2 hurtige detektionstests (COVAG)

1. Baggrund:

   Coronavirus sygdom 2019 (COVID-19) har hurtigt spredt sig over hele verden fra Wuhan (Kina) siden december 2019. Pålidelige diagnostiske teknologier er afgørende for kampen mod COVID-19. Mens real-time revers transkriptase-polymerase-kædereaktion (rRT-PCR)-baseret testning af respiratoriske prøver fortsat er guldstandarden for COVID-19-diagnostik, er flere kommercielle assays for antistoffer mod (SARS-CoV-2) dukket op i løbet af de foregående måneder ( Stocking et al., 2020).

   Ved at måle tilstedeværelsen eller fraværet af virale proteiner (antigener), kan antigentest give resultater, der diagnosticerer en aktiv SARS-CoV-2-infektion meget hurtigere end RT-PCR eller tilsvarende tests. Det er blevet hævdet, at antigentest kan have en lavere følsomhed end RT-PCR eller tilsvarende RNA-baserede tests, og som følge heraf er de meget mere tilbøjelige til at give falsk-negative resultater hos personer med lavere mængder af virus. Dette kan muligvis gøre dem upålidelige hos individer med et asymptomatisk sygdomsforløb, hos individer i de første dage af infektionen og senere end 5-7 dage efter symptomdebut (SYNLAB pressemeddelelse, 22.09.2020).

2. Objektiv:

   Formålet med denne ikke-interventionelle undersøgelse er at demonstrere, at hurtige antigentest for SARS-CoV-2 (Abbott og Roche) giver hurtige resultater og yder lige så godt som RT-PCR, i det mindste hos symptomatiske patienter med høj viral belastning.

3. Studere design:

   Undersøgelsen vil blive udført i Corona Test Center Stuttgart Cannstatter Wasen, der drives af Dr. med. Hans-Jörg Wertenauer, Stuttgart, i tæt samarbejde med SYNLAB MVZ Leinfelden-Echterdingen GmbH. Ca. 2000 patienter vil blive tilmeldt efter at have underskrevet Informed Consent Form (ICF). Efter en planlagt undersøgelsesvarighed på otte uger vil efterforskerne være i stand til at indsamle de nødvendige 2000 prøver (50 patienter pr. dag).

   Der er planlagt ét studiebesøg til data- og blodindsamling (15,5 ml), antigentest, RT-PCR, serologiske tests, grundlæggende laboratorietests, der skal kommunikeres til deltagerne, og tilhørende blodprøver (anklages for at være relateret til COVID-19 som f.eks. inflammatoriske markører og mikronæringsstoffer og vitaminer). Disse vil blive udført på SYNLAB MVZ Leinfelden GmbH. Alikvoter af de indsamlede materialer vil blive opbevaret -20 grader til kontrolmålinger og supplerende tests, maksimalt i et år efter, at den sidste patient blev indskrevet i undersøgelsen.

4. Begrundelse:

   I de seneste uger har der været megen diskussion om hurtige antigentest for SARS-CoV-2. Den seneste generation af disse test, som er tilgængelig fra flere forskellige leverandører, forventes at fungere godt hos patienter med høj viral belastning. Dette er normalt tilfældet cirka 3-10 dage efter infektion med virussen, når personen er smitsom, og kan være asymptomatisk eller i de første dage med symptomer.

   Det er derfor håbet, at hurtige antigentest kan understøtte diagnosticering af COVID-19 hos personer, der har de første symptomer. I USA har nogle tests modtaget autorisation til diagnostisk testning hos symptomatiske individer inden for 5-7 dage fra symptomdebut (3).

5. Risici og fordele:

   Tre nasopharyngeale podninger og en blodprøve vil blive taget fra hver af deltagerne. Antigentest, RT-PCR og serologiske og supplerende laboratorietests udføres i denne undersøgelse.

   Risici fra nasopharyngeale podninger: Den største risiko er ubehag. Sjældent - 1 ud af tusinder - besvimer den person, der modtager podepinden, af at være superfølsom eller får en mild næseblod.

   Risici ved blodudtagning: Risikoen ved venepunktur inkluderer at være den mest almindelige reaktion. Signifikante komplikationer (defineret som cellulitis, flebitis, diaforese, hypotension, nærsynkope, synkope) observeres ved mindre blå mærker på det sted, hvor blodet tages, og hæmatom (ca. 12 %), med mindre blå mærker omkring 3,5 % af patienterne. Den hyppigste enkelt signifikante komplikation er hypotension med en hyppighed på ca. 2,6 %. Synkope ses hos mindre end 1 % af patienterne. Andre alvorlige lokale reaktioner såsom cellulitis eller flebitis er meget sjældne (Galena HJ, J. Fam. øv. 1992 maj;34(5):582-4). Blodprøvetagning udføres derfor på hvert af undersøgelsesstederne under overvågning af en autoriseret læge.

   Fordele for folkesundheden: Point of care antigentest er en integreret del af den nuværende nationale teststrategi, der tjener til at forhindre spredning af COVID 19 https://www.bundesgesundheitsministerium.de/fileadmin/Dateien/3_Downloads/C/C oronavirus/Nationale_Teststrategie_kurz_041220.pdf Der er dog betydelig usikkerhed med hensyn til pålideligheden af ​​antigentestning sammenlignet med testningens guldstandard, rt-PCR. Så vidt forfatterne ved, er en prospektiv, tilstrækkeligt stor og udfordrende evaluering af antigentestning under praksisbetingelser ikke blevet afsluttet indtil videre. Den nuværende undersøgelse har til formål at lukke dette hul. Dets resultater er påtrængende og vil have øjeblikkelig indvirkning på de nuværende anbefalinger for brug af antigentestning. Det vil især demonstrere svagheder og styrker ved antigentestning og vil gøre det muligt at opveje potentielle tekniske begrænsninger ved antigentest sammenlignet med rt-PCR mod fordelen ved kortsigtet tilgængelighed af testresultater.

   Ydermere vil den grundige registrering af den kliniske helbredsstatus og den grundlæggende laboratorieanalyse udført i denne undersøgelse være i stand til at få yderligere indsigt i kliniske prædiktorer for modtageligheden for COVID 19.

   Fordele for den enkelte. Deltagerne vil drage fordel på to måder. Bortset fra med rt-PCR vil de opnå resultaterne af antigentestningen på én gang og på stedet. Derudover vil resultaterne af point-of-care-testen være endnu mere pålidelige end resultatet af en enkelt test, hvis der tilbydes to antigentest samtidigt. Deltagerne tilbydes desuden et gratis grundlæggende laboratorie-sundhedstjek, herunder følgende brugbare sundhedsmarkører: grundlæggende blodcelletal, C-reaktivt protein, HbA1c, kolesterol, triglycerider, LDL-kolesterol, HDL-kolesterol, gamma-glutamyl-transferase, kreatinin sammen med formel-afledt kreatinin, vitamin D.

   Efterforskerne konkluderer, at fordelene ved denne undersøgelse for sundhedssystemet, som står over for den livstruende, og for de individuelle undersøgelsesdeltagere klart opvejer de mindre og håndterbare risici.

6. Befolkning:

Efterforskerne vil omfatte cirka 2000 på hinanden følgende mandlige og kvindelige patienter i alderen 18 år eller derover, der deltager i Corona Test Center Stuttgart Cannstadter Wasen, hvor RT-PCR-testning for SARS-CoV-2 er medicinsk indiceret eller anmodet om.

6.1 Inklusionskriterier:

Emner, der er berettiget til at blive inkluderet i denne undersøgelse, skal opfylde følgende kriterier:

1. Underskrevet informeret samtykke skal indhentes inden studiedeltagelse. Patienten skal være i stand til at forstå karakteren, betydningen og implikationen af ​​forsøget.
2. Alder 18 år eller mere

6.2 Eksklusionskriterier:

1. Mangel på informeret samtykke
2. Manglende evne til at forstå karakteren, betydningen og implikationen af ​​retssagen.
3. Alvorlige kliniske tilstande, der kræver akut hospitalsindlæggelse
4. Børn og unge under 18 år

7. Procedurer for informeret samtykke Kvalificerede forsøgspersoner må kun inkluderes i undersøgelsen efter at have givet IRB/IEC-godkendt informeret samtykke. Informeret samtykke skal indhentes, før der udføres undersøgelsesspecifikke procedurer (bilag 2).

8. Evalueringsplan og vurderinger:

Formular til informeret samtykke, indsamling af demografiske data og X relevant medicinsk historie SARS-CoV-2 Rapid Antigen Test (Roche), PANBIO Covid-19 Ag Rapid Test (Abbott), RT-PCR Serologisk test (blodprøve, 15,5 ml) Supplerende test 8.1 Demografi, sygehistorie, prøveudtagning: Patientdemografiske data og andre karakteristiske data, der skal indsamles om alle patienter, omfatter køn, alder, vægt, højde, relevant sygehistorie, vitale tegn og symptomer, der er karakteristiske for COVID-19, herunder præcise tidsspecifikationer for indtræden af ​​symptomer.

Der vil ikke blive indsamlet oplysninger om medicin. Tre uafhængige nasopharyngeale podninger vil blive opnået efter standardprocedurer For at undgå skævhed på grund af rækkefølgen af ​​udtagning af nasopharyngeale podninger, vil efterforskerne tilfældigt allokere patienterne til tre prøveudtagningsgrupper Gruppe 1: RT-PCR - Antigen Test Roche - Antigen Test Abbott Group 2: Antigen Test Roche - Antigen Test Abbott - RT-PCR Gruppe 3: Antigen Test Abbott - RT-PCR - Antigen Test Roche

Tildelingen af ​​patienter til hver af disse grupper vil være tydeligt specificeret på sagsjournalen. Der vil være to formularer til hver patient:

Skema 1: Rutineanalyseanmodningsark som brugt af indsamlingsstedet til patientidentifikation, som vil være mærket med en stregkode, der bærer undersøgelsesnummeret på en patient. Skema 2: Undersøgelsesspecifik formular, der indeholder en kopi af stregkoden med undersøgelsesnummeret, initialer af patienten og fødselsåret.

8.2 SARS-CoV-2 Rapid Antigen Test (Roche): SARS-CoV-2 Rapid Antigen Test er en hurtig kromatografisk immunanalyse til kvalitativ påvisning af specifikke antigener af SARS-CoV-2 til stede i den humane nasopharynx.

8.3 PANBIO Covid-19 Ag Rapid Test (Abbott): Panbio COVID-19 Ag Rapid Test Device er en in vitro diagnostisk hurtigtest til kvalitativ påvisning af SARS-CoV-2 antigen (Ag) i humane nasopharyngeale podningsprøver.

8.4 RT-PCR: RT-PCR evaluerer tilstedeværelsen eller fraværet af SARS-CoV-2-genomet i prøver fra nasopharyngeale og oropharyngeale podninger og vil blive udført i overensstemmelse med protokollerne etableret hos SYNLAB MVZ Leinfelden GmbH.

8.5 Serologisk og hjælpeundersøgelse: Blodprøver (10 ml heparinplasma og 5,5 ml EDTA-plasma) vil blive indsamlet for at påvise tilstedeværelsen af ​​antistoffer (specifik immunrespons) mod SARS-CoV-2 antigene proteiner (f.eks. Roche, Abbott). Specifikt vil alle deltagere blive tilbudt at modtage resultaterne for følgende analytter som en anerkendelse af deres deltagelse i undersøgelsen: antal blodlegemer, C-reaktivt protein, HbA1c, kolesterol, triglycerider, LDL-kolesterol, HDL-kolesterol, gamma-glutamyl-transferase , kreatinin sammen med formel-afledt kreatinin, vitamin D. Backup prøver vil blive indsamlet for at bestemme hjælpeparametre som inflammatoriske markører og mikronæringsstoffer og vitaminer.

9. Observationsperiode:

NIS tidsplan:

Start af patientrekruttering: 1. februar 2021 Slut på observationsperioden: 31. marts 2021 Slutrapport: 31. maj 2021

10. Dataanalyse og statistiske metoder: En database med de pseudonymiserede data og resultater vil blive genereret. Efterforskerne antager, at hver af antigentestene har en sensitivitet og specificitet på 1,0 i forhold til RT-PCR, som vil blive betragtet som referencetesten. En p-værdi på mindre end 0,05 vil være påkrævet for at overveje hver af de to hurtige test svarende til RT-PCR.

Ved hjælp af effektberegninger til chi-kvadrattest for to frihedsgrader, krævet type I fejlsandsynlighed lig med 0,05, krævet (1-type II fejlsandsynlighed) lig med 0,8 og krævet effektstørrelse lig med 0,1 (lille effektstørrelse i fornemmelsen af ​​(4)) opnår efterforskerne et antal af mindst N=964 observationer til konsekutiv testning af indkommende patienter for at opfylde vores krav til betydning og magt til at besvare det første forskningsspørgsmål. På grund af det forventede antal på omkring 10 % positive ud af 1000 tilfælde, er antagelsen om en chi-kvadratfordeling tilladt.

Efterforskerne vil også tage stilling til spørgsmålet om, hvorvidt forskellige prætestsandsynligheder vil påvirke følsomheden af ​​antigentestene. Efterforskerne forventer, at to store indikationsgrupper med forskellige præ-testsandsynligheder bidrager med cirka 90 procent af de rt-PCR-positive prøver: a) deltagere indlagt til rt-PCR-test af en læge b) deltagere, der søger rt-PCR-test efter anbefaling af mit helbred plejemyndigheder/kontaktpersoner. I alt ca. 200 rt-PCR prøver vil være nødvendige for at påvise en statistisk signifikant forskel mellem disse to grupper ved en type 1 fejl på 0,05 og en statistisk styrke på 0,80. For at besvare dette andet spørgsmål vil efterforskerne udvide undersøgelsen til 2000 deltagere.

11. Etik: Undersøgelsesprotokollen vil blive indsendt til den etiske komité, det medicinske fakultet Mannheim, Universitetet i Heidelberg, og undersøgelsen vil ikke påbegyndes, før der er opnået skriftlig tilladelse. Undersøgelsen vil blive udført i overensstemmelse med tysk lov, EU-regler for kliniske forsøg og Helsinki-erklæringen om de etiske principper for klinisk forskning.

11.1 Patientinformation og informeret samtykke: Dokumentets formål, art og omfang skal forklares skriftligt til hver patient, før han eller hun indgår i undersøgelsen (bilag 1). Patienten må ikke medtages, medmindre han eller hun har givet skriftligt samtykke (bilag 2). Patienter vil have ret til at nægte at deltage eller trække sig fra undersøgelsen af ​​enhver grund og på et hvilket som helst tidspunkt uden at påvirke kvaliteten eller tilgængeligheden af ​​deres sundhedspleje.

11.2 Databeskyttelse: De patientdata, der indsamles til undersøgelsen, vil blive registreret i en pseudonymiseret form (bilag 4), med et patientnummer, der ikke kan henføres til patientens identitet. I tilfælde af, at undersøgelsesresultaterne offentliggøres, må personoplysningerne kun anvendes, hvis patientens anonymitet opretholdes. Patientens data er garanteret altid absolut beskyttet.