COVAG - Studio sull'antigene Covid-19 - l'efficacia diagnostica dei test di rilevamento rapido SARS-CoV-2 (COVAG)

1. Sfondo:

   La malattia da coronavirus 2019 (COVID-19) si è rapidamente diffusa in tutto il mondo da Wuhan (Cina) da dicembre 2019. Tecnologie diagnostiche affidabili sono fondamentali per la lotta contro il COVID-19. Mentre i test basati sulla reazione a catena della polimerasi inversa della trascrittasi inversa (rRT-PCR) in tempo reale su campioni respiratori rimangono il gold standard per la diagnostica COVID-19, nei mesi precedenti sono emersi diversi test commerciali per gli anticorpi contro (SARS-CoV-2) ( Calza et al., 2020).

   Misurando la presenza o l'assenza di proteine ​​virali (antigeni), i test dell'antigene possono fornire risultati che diagnosticano un'infezione da SARS-CoV-2 attiva molto più velocemente rispetto a RT-PCR o test equivalenti. È stato affermato che i test dell'antigene possono avere una sensibilità inferiore rispetto a RT-PCR o test equivalenti basati sull'RNA e, di conseguenza, è molto più probabile che diano risultati falsi negativi in ​​individui con quantità inferiori di virus. Ciò potrebbe eventualmente renderli inaffidabili in soggetti con decorso asintomatico della malattia, in soggetti nei primi giorni di infezione e oltre 5-7 giorni dopo l'insorgenza dei sintomi (comunicato stampa SYNLAB, 22.09.2020).

2. Obbiettivo:

   L'obiettivo di questo studio non interventistico è dimostrare che i test rapidi dell'antigene per SARS-CoV-2 (Abbott e Roche) forniscono risultati rapidi e funzionano altrettanto bene della RT-PCR, almeno nei pazienti sintomatici con elevata carica virale.

3. Disegno dello studio:

   Lo studio sarà condotto presso il Corona Test Center Stuttgart Cannstatter Wasen gestito dal Dr. med. Hans-Jörg Wertenauer, Stoccarda, in stretta collaborazione con SYNLAB MVZ Leinfelden-Echterdingen GmbH. Saranno arruolati circa 2000 pazienti dopo aver firmato il modulo di consenso informato (ICF). Dopo una durata programmata dello studio di otto settimane, i ricercatori saranno in grado di raccogliere i 2000 campioni richiesti (50 pazienti al giorno).

   È prevista una visita di studio per la raccolta di dati e sangue (15,5 ml), test dell'antigene, RT-PCR, test sierologici, test di laboratorio di base da comunicare ai partecipanti e esami del sangue accessori (incriminati per essere correlati a COVID-19 come marcatori infiammatori, micronutrienti e vitamine). Questi saranno eseguiti presso la SYNLAB MVZ Leinfelden GmbH. Le aliquote dei materiali raccolti verranno conservate a -20 gradi per misurazioni di controllo e test accessori, al massimo per un anno dopo che l'ultimo paziente è stato arruolato nello studio.

4. Fondamento logico:

   Nelle ultime settimane si è molto discusso sui test rapidi dell'antigene per SARS-CoV-2. La generazione più recente di questi test, disponibile presso diversi fornitori, dovrebbe funzionare bene nei pazienti con carica virale elevata. Questo di solito accade circa 3-10 giorni dopo l'infezione da virus, quando la persona è contagiosa e può essere asintomatica o nei primi giorni di sintomi.

   Si spera quindi che i test antigenici rapidi possano supportare la diagnosi di COVID-19 nelle persone che presentano i primi sintomi. Negli USA alcuni test hanno ricevuto l'autorizzazione per test diagnostici in soggetti sintomatici, entro 5-7 giorni dall'esordio dei sintomi (3).

5. Rischi e benefici:

   Saranno ottenuti tre tamponi rinofaringei e un campione di sangue da ciascuno dei partecipanti. In questo studio vengono eseguiti test antigenici, RT-PCR e test di laboratorio sierologici e accessori.

   Rischi da tamponi nasofaringei: il rischio maggiore è il disagio. Raramente - 1 su migliaia - la persona che riceve il tampone sviene per essere super sensibile o ha una lieve emorragia dal naso.

   Rischi da prelievo di sangue: i rischi della venipuntura includono l'essere la reazione più comune. Complicanze significative (definite come cellulite, flebite, diaforesi, ipotensione, quasi sincope, sincope) si osservano in Lievi ecchimosi nella sede del prelievo di sangue ed ematomi (12% circa), con ecchimosi minori in circa il 3,5% dei pazienti. La singola complicanza significativa più frequente è l'ipotensione con una frequenza di circa il 2,6%. La sincope è osservata in meno dell'1% dei pazienti. Altre gravi reazioni locali come cellulite o flebite sono molto rare (Galena HJ, J. Fam. Pratica. 1992 maggio;34(5):582-4). Il prelievo di sangue viene quindi condotto in ciascuno dei siti dello studio sotto la sorveglianza di un medico autorizzato.

   Benefici per la salute pubblica: il test dell'antigene presso il punto di cura è parte integrante dell'attuale strategia nazionale di test che serve a prevenire la diffusione di COVID 19 https://www.bundesgesundheitsministerium.de/fileadmin/Dateien/3_Downloads/C/C oronavirus/Nationale_Teststrategie_kurz_041220.pdf Vi è, tuttavia, una significativa incertezza sull'affidabilità del test dell'antigene rispetto al gold standard del test, rt-PCR. A conoscenza degli autori, finora non è stata completata una valutazione prospettica, sufficientemente consistente e contestabile del test dell'antigene in condizioni pratiche. L'attuale studio intende colmare questa lacuna. I suoi risultati sono urgentemente richiesti e avranno un impatto immediato sulle attuali raccomandazioni per l'utilizzo dei test dell'antigene. In particolare, dimostrerà i punti deboli ei punti di forza del test dell'antigene e consentirà di superare i potenziali limiti tecnici del test dell'antigene rispetto alla rt-PCR rispetto al vantaggio della disponibilità a breve termine dei risultati del test.

   Inoltre, la registrazione approfondita dello stato di salute clinico e l'analisi di laboratorio di base eseguita in questo studio, sarà in grado di ottenere ulteriori approfondimenti sui predittori clinici per la suscettibilità a COVID 19.

   Vantaggi per l'individuo. I partecipanti beneficeranno in due modi. Oltre che con rt-PCR, otterranno i risultati del test dell'antigene in una sola volta e in loco. Inoltre, offrendo due test dell'antigene contemporaneamente, i risultati del test point-of-care saranno ancora più affidabili del risultato di un singolo test. Inoltre, ai partecipanti viene offerto un controllo sanitario di base gratuito di laboratorio che include i seguenti indicatori di salute utilizzabili: conta di base delle cellule del sangue, proteina C-reattiva, HbA1c, colesterolo, trigliceridi, colesterolo LDL, colesterolo HDL, gamma-glutamil-transferasi, creatinina insieme a creatinina derivata dalla formula, vitamina D.

   I ricercatori concludono che i benefici di questo studio per il sistema sanitario che si trova ad affrontare il pericolo di vita e per i singoli partecipanti allo studio superano chiaramente i rischi minori e gestibili.

6. Popolazione:

Gli investigatori includeranno circa 2000 pazienti maschi e femmine consecutivi di età pari o superiore a 18 anni che frequentano il Corona Test Center Stuttgart Cannstadter Wasen, in cui il test RT-PCR per SARS-CoV-2 è indicato o richiesto dal punto di vista medico.

6.1 Criteri di inclusione:

I soggetti idonei per l'inclusione in questo studio devono soddisfare i seguenti criteri:

1. Il consenso informato firmato deve essere ottenuto prima della partecipazione allo studio. Il paziente deve essere in grado di comprendere la natura, il significato e le implicazioni del processo.
2. Età 18 anni o più

6.2 Criteri di esclusione:

1. Mancanza di consenso informato
2. Incapacità di comprendere la natura, il significato e le implicazioni del processo.
3. Gravi condizioni cliniche che richiedono un ricovero urgente
4. Bambini e adolescenti di età inferiore ai 18 anni

7. Procedure di consenso informato I soggetti idonei possono essere inclusi nello studio solo dopo aver fornito il consenso informato approvato dall'IRB/IEC. Il consenso informato deve essere ottenuto prima di eseguire qualsiasi procedura specifica dello studio (Appendice 2).

8. Programma di valutazione e valutazioni:

Modulo di consenso informato, raccolta dati demografici e anamnesi X pertinente Test rapido dell'antigene SARS-CoV-2 (Roche), Test rapido PANBIO Covid-19 Ag (Abbott), Test sierologico RT-PCR (campione di sangue, 15,5 ml) Test ausiliari 8.1 Dati demografici, anamnesi, campionamento: i dati demografici dei pazienti e altri dati caratteristici da raccogliere su tutti i pazienti includono sesso, età, peso, altezza, anamnesi clinica pertinente, segni vitali e sintomi caratteristici di COVID-19, comprese le precise specifiche temporali per insorgenza dei sintomi.

Non verranno raccolte informazioni sui farmaci. Saranno ottenuti tre tamponi rinofaringei indipendenti seguendo le procedure standard Per evitare qualsiasi pregiudizio dovuto alla sequenza di prelievo dei tamponi rinofaringei, gli investigatori assegneranno casualmente i pazienti a tre gruppi di campionamento Gruppo 1: RT-PCR - Test dell'antigene Roche - Test dell'antigene Gruppo Abbott 2: Test dell'antigene Roche - Test dell'antigene Abbott - RT-PCR Gruppo 3: Test dell'antigene Abbott - RT-PCR - Test dell'antigene Roche

L'assegnazione dei pazienti a ciascuno di questi gruppi sarà chiaramente specificata nelle schede di registrazione. Ci saranno due moduli per ogni paziente:

Modulo 1: Scheda di richiesta di analisi di routine utilizzata dal punto di raccolta per l'identificazione del paziente che sarà etichettata con un codice a barre riportante il numero dello studio di un paziente Modulo 2: Modulo specifico dello studio contenente una copia del codice a barre con il numero dello studio, iniziali del paziente e l'anno di nascita.

8.2 Test rapido dell'antigene SARS-CoV-2 (Roche): il test rapido dell'antigene SARS-CoV-2 è un immunodosaggio cromatografico rapido point-of-care per la rilevazione qualitativa di antigeni specifici di SARS-CoV-2 presenti nel rinofaringe umano.

8.3 Test rapido PANBIO Covid-19 Ag (Abbott): il dispositivo per test rapido Panbio COVID-19 Ag è un test rapido diagnostico in vitro per la rilevazione qualitativa dell'antigene SARS-CoV-2 (Ag) in campioni di tamponi rinofaringei umani.

8.4 RT-PCR: la RT-PCR valuta la presenza o l'assenza del genoma SARS-CoV-2 in campioni di tamponi nasofaringei e orofaringei e sarà condotta secondo i protocolli stabiliti presso la SYNLAB MVZ Leinfelden GmbH.

8.5 Test sierologici e accessori: verranno raccolti campioni di sangue (10 ml di plasma con eparina e 5,5 ml di plasma EDTA) per rilevare la presenza di anticorpi (risposta immunitaria specifica) contro le proteine ​​antigeniche SARS-CoV-2 (ad es. Roche, Abbott). In particolare, a tutti i partecipanti verrà offerto di ricevere i risultati per i seguenti analiti in riconoscimento della loro partecipazione allo studio: conteggio delle cellule del sangue, proteina C-reattiva, HbA1c, colesterolo, trigliceridi, colesterolo LDL, colesterolo HDL, gamma-glutamil-transferasi , creatinina insieme a creatinina derivata dalla formula, vitamina D. Verranno raccolti campioni di backup per determinare parametri ausiliari come marcatori infiammatori, micronutrienti e vitamine.

9. Periodo di osservazione:

Programma NSI:

Inizio del reclutamento dei pazienti: 1 febbraio 2021 Fine del periodo di osservazione: 31 marzo 2021 Report finale: 31 maggio 2021

10. Analisi dei dati e metodi statistici: verrà generato un database dei dati e dei risultati pseudonimizzati. I ricercatori ipotizzano che ciascuno dei test dell'antigene abbia una sensibilità e una specificità di 1,0 in relazione a RT-PCR che sarà considerato il test di riferimento. Sarà richiesto un valore p inferiore a 0,05 per considerare ciascuno dei due test rapidi equivalenti a RT-PCR.

Con l'ausilio di calcoli di potenza per test chi-quadrato per due gradi di libertà, probabilità di errore di tipo I richiesta pari a 0,05, probabilità di errore richiesta di tipo II pari a 0,8 e dimensione dell'effetto richiesta pari a 0,1 (dimensione dell'effetto piccolo in il senso di (4)) i ricercatori ottengono un numero di almeno N = 964 osservazioni per test consecutivi di pazienti in arrivo al fine di soddisfare i nostri requisiti sul significato e il potere di rispondere alla prima domanda di ricerca. A causa del numero previsto di circa il 10% di positivi su 1000 casi, è ammissibile l'ipotesi di una distribuzione chi-quadro.

Gli investigatori affronteranno anche la questione se diverse probabilità pre-test influenzeranno la sensibilità dei test dell'antigene. I ricercatori si aspettano che due principali gruppi di indicazioni con diverse probabilità pre-test contribuiscano a circa il 90 percento dei campioni positivi rt-PCR: a) partecipanti ammessi per test rt-PCR da un medico b) partecipanti che cercano test rt-PCR su raccomandazione la mia salute autorità di cura/persone di contatto. Sarà necessario un totale di circa 200 campioni rt-PCR per rilevare una differenza statisticamente significativa tra questi due gruppi con un errore di tipo 1 di 0,05 e una potenza statistica di 0,80. Per rispondere a questa seconda domanda, i ricercatori estenderanno lo studio a 2000 partecipanti.

11. Etica: Il protocollo dello studio sarà sottoposto al Comitato Etico della Facoltà di Medicina di Mannheim, Università di Heidelberg e lo studio non avrà inizio fino a quando non sarà ottenuta l'autorizzazione scritta. Lo studio sarà condotto in conformità con la legge tedesca, i regolamenti della sperimentazione clinica dell'UE e la Dichiarazione di Helsinki sui principi etici della ricerca clinica.

11.1 Informazioni sul paziente e consenso informato: l'obiettivo, la natura e l'estensione del documento devono essere spiegati per iscritto a ogni paziente prima che venga incluso nello studio (Appendice 1). Il paziente non deve essere incluso a meno che non abbia dato il consenso scritto (Appendice 2). I pazienti avranno il diritto di rifiutarsi di partecipare o di ritirarsi dallo studio per qualsiasi motivo e in qualsiasi momento senza pregiudicare la qualità o l'accessibilità della loro assistenza sanitaria.

11.2 Protezione dei dati: i dati del paziente raccolti per lo studio saranno registrati in forma pseudonimizzata (Appendice 4), con un numero di paziente che non può essere attribuito all'identità del paziente. In caso di pubblicazione dei risultati dello studio, i dati personali possono essere utilizzati solo se viene mantenuto l'anonimato del paziente. Si garantisce che i dati del paziente siano sempre assolutamente protetti.