COVAG - Covid-19 Antigen Study - de diagnostische effectiviteit van SARS-CoV-2 snelle detectietests (COVAG)

1. Achtergrond:

   Coronavirusziekte 2019 (COVID-19) heeft zich sinds december 2019 snel wereldwijd verspreid vanuit Wuhan (China). Betrouwbare diagnostische technologieën zijn cruciaal in de strijd tegen COVID-19. Hoewel real-time op reverse transcriptase-polymerasekettingreactie (rRT-PCR) gebaseerde tests van respiratoire monsters de gouden standaard blijven voor COVID-19-diagnostiek, zijn er de afgelopen maanden verschillende commerciële assays voor antilichamen tegen (SARS-CoV-2) verschenen ( Stocking et al., 2020).

   Door de aan- of afwezigheid van virale eiwitten (antigenen) te meten, kunnen antigeentests veel sneller resultaten opleveren die een actieve SARS-CoV-2-infectie diagnosticeren dan RT-PCR of gelijkwaardige tests. Er is beweerd dat antigeentests mogelijk een lagere gevoeligheid hebben dan RT-PCR of gelijkwaardige RNA-gebaseerde tests, en als gevolg daarvan is de kans veel groter dat ze vals-negatieve resultaten geven bij personen met lagere hoeveelheden virus. Dit kan ze mogelijk onbetrouwbaar maken bij personen met een asymptomatisch verloop van de ziekte, bij personen in de eerste dagen van infectie en later dan 5-7 dagen na het begin van de symptomen (SYNLAB persbericht, 22.09.2020).

2. Objectief:

   Het doel van deze niet-interventionele studie is om aan te tonen dat snelle antigeentesten voor SARS-CoV-2 (Abbott en Roche) snelle resultaten opleveren en even goed presteren als RT-PCR, althans bij symptomatische patiënten met een hoge virale belasting.

3. Studieontwerp:

   De studie zal worden uitgevoerd in het Corona Test Center Stuttgart Cannstatter Wasen, beheerd door Dr. med. Hans-Jörg Wertenauer, Stuttgart, in nauwe samenwerking met SYNLAB MVZ Leinfelden-Echterdingen GmbH. Na ondertekening van het Informed Consent Form (ICF) zullen ongeveer 2000 patiënten worden ingeschreven. Na een geplande studieduur van acht weken zullen de onderzoekers de vereiste 2000 monsters kunnen verzamelen (50 patiënten per dag).

   Er is één studiebezoek gepland voor gegevens- en bloedafname (15,5 ml), antigeentesten, RT-PCR, serologische tests, basislaboratoriumtesten die aan de deelnemers moeten worden meegedeeld, en aanvullende bloedtesten (vermoedelijk gerelateerd aan COVID-19 zoals ontstekingsmarkers en micronutriënten en vitaminen). Deze zullen worden uitgevoerd bij de SYNLAB MVZ Leinfelden GmbH. Aliquots van de verzamelde materialen worden bij -20 graden bewaard voor controlemetingen en aanvullende tests, maximaal een jaar nadat de laatste patiënt in het onderzoek was opgenomen.

4. Grondgedachte:

   De afgelopen weken is er veel discussie geweest over snelle antigeentesten voor SARS-CoV-2. De meest recente generatie van deze tests, verkrijgbaar bij verschillende leveranciers, zal naar verwachting goed presteren bij patiënten met een hoge virale belasting. Dit is meestal het geval ongeveer 3-10 dagen na infectie met het virus, wanneer de persoon besmettelijk is en asymptomatisch kan zijn of in de eerste dagen van symptomen.

   Het is daarom te hopen dat snelle antigeentesten de diagnose van COVID-19 kunnen ondersteunen bij mensen die de eerste symptomen hebben. In de VS zijn sommige tests goedgekeurd voor diagnostische tests bij personen met symptomen, binnen 5-7 dagen na het begin van de symptomen (3).

5. Risico's en voordelen:

   Van elk van de deelnemers worden drie nasofaryngeale uitstrijkjes en één bloedmonster afgenomen. In deze studie worden antigeentesten, RT-PCR en serologische en aanvullende laboratoriumtesten uitgevoerd.

   Risico's van nasofaryngeale uitstrijkjes: het grootste risico is ongemak. Zelden - 1 op de duizenden - valt de persoon die het uitstrijkje krijgt flauw omdat hij supergevoelig is of krijgt hij een lichte bloedneus.

   Risico's van bloedafname: De risico's van venapunctie zijn onder meer de meest voorkomende reactie. Significante complicaties (gedefinieerd als cellulitis, flebitis, diaforese, hypotensie, bijna-syncope, syncope) worden waargenomen bij lichte blauwe plekken op de plaats waar het bloed is afgenomen en hematoom (ongeveer 12 %), met lichte blauwe plekken bij ongeveer 3,5% van de patiënten. De meest voorkomende enkele significante complicatie is hypotensie met een frequentie van ongeveer 2,6%. Syncope wordt gezien bij minder dan 1% van de patiënten. Andere ernstige lokale reacties zoals cellulitis of flebitis zijn zeer zeldzaam (Galena HJ, J. Fam. Oefen. 1992 mei;34(5):582-4). Bloedafname wordt daarom op elk van de onderzoekslocaties uitgevoerd onder toezicht van een arts met een vergunning van de raad.

   Voordelen voor de volksgezondheid: Point of care-antigeentesten zijn een integraal onderdeel van de huidige nationale teststrategie ter voorkoming van de verspreiding van COVID 19 https://www.bundesgesundheitsministerium.de/fileadmin/Dateien/3_Downloads/C/C oronavirus/Nationale_Teststrategie_kurz_041220.pdf Er bestaat echter grote onzekerheid over de betrouwbaarheid van antigeentesten in vergelijking met de gouden teststandaard, rt-PCR. Voor zover de auteurs weten, is er tot nu toe geen prospectieve, voldoende omvangrijke en betwistbare evaluatie van antigeentesten onder praktijkomstandigheden voltooid. De huidige studie is bedoeld om deze leemte te dichten. De resultaten ervan zijn dringend vereist en zullen onmiddellijk van invloed zijn op de huidige aanbevelingen voor het gebruik van antigeentesten. Het zal met name de zwakke en sterke punten van antigeentests aantonen en het mogelijk maken om de potentiële technische beperkingen van antigeentests in vergelijking met rt-PCR op te wegen tegen het voordeel van beschikbaarheid van testresultaten op korte termijn.

   Verder zullen de grondige registratie van de klinische gezondheidsstatus en de basislaboratoriumanalyse die in deze studie is uitgevoerd, verdere inzichten kunnen opleveren in klinische voorspellers voor de gevoeligheid voor COVID 19.

   Voordelen voor het individu. De deelnemers profiteren op twee manieren. Anders dan bij rt-PCR, krijgen ze de resultaten van de antigeentesten in één keer en ter plaatse. Door tegelijkertijd twee antigeentesten aan te bieden, zijn de resultaten van de point-of-care-test bovendien nog betrouwbaarder dan het resultaat van een enkele test. Verder krijgen de deelnemers een gratis basislaboratoriumgezondheidscontrole aangeboden, met inbegrip van de volgende bruikbare gezondheidsmarkers: basisbloedceltelling, C-reactief proteïne, HbA1c, cholesterol, triglyceriden, LDL-cholesterol, HDL-cholesterol, gamma-glutamyl-transferase, creatinine samen met formule-afgeleide creatinine, vitamine D.

   De onderzoekers concluderen dat de voordelen van deze studie voor de gezondheidszorg die wordt geconfronteerd met levensbedreigende mensen en voor de individuele studiedeelnemers duidelijk opwegen tegen de kleine en beheersbare risico's.

6. Bevolking:

De onderzoekers zullen ongeveer 2000 opeenvolgende mannelijke en vrouwelijke patiënten van 18 jaar of ouder omvatten die het Corona Test Center Stuttgart Cannstadter Wasen bijwonen, bij wie RT-PCR-testen voor SARS-CoV-2 medisch geïndiceerd of aangevraagd is.

6.1 Opnamecriteria:

Proefpersonen die in aanmerking komen voor opname in dit onderzoek moeten aan de volgende criteria voldoen:

1. Ondertekende geïnformeerde toestemming moet worden verkregen voorafgaand aan deelname aan de studie. De patiënt moet in staat zijn de aard, het belang en de implicaties van het onderzoek te begrijpen.
2. Leeftijd 18 jaar of ouder

6.2 Uitsluitingscriteria:

1. Gebrek aan geïnformeerde toestemming
2. Onvermogen om de aard, betekenis en implicatie van het proces te begrijpen.
3. Ernstige klinische aandoeningen die spoedopname in het ziekenhuis vereisen
4. Kinderen en jongeren onder de 18 jaar

7. Procedures voor geïnformeerde toestemming In aanmerking komende proefpersonen mogen alleen in het onderzoek worden opgenomen na IRB/IEC-goedgekeurde geïnformeerde toestemming. Geïnformeerde toestemming moet worden verkregen voordat studiespecifieke procedures worden uitgevoerd (bijlage 2).

8. Toetsschema en toetsen:

Formulier voor geïnformeerde toestemming, verzameling van demografische gegevens en X relevante medische geschiedenis SARS-CoV-2 Rapid Antigen Test (Roche), PANBIO Covid-19 Ag Rapid Test (Abbott), RT-PCR Serologische test (bloedmonster, 15,5 ml) Aanvullende tests 8.1 Demografische gegevens, medische geschiedenis, steekproeven: demografische gegevens van de patiënt en andere kenmerkende gegevens die over alle patiënten moeten worden verzameld, zijn onder meer geslacht, leeftijd, gewicht, lengte, relevante medische geschiedenis, vitale functies en symptomen die kenmerkend zijn voor COVID-19, inclusief precieze tijdspecificaties voor begin van de symptomen.

Er worden geen gegevens over medicatie verzameld. Er zullen drie onafhankelijke nasofaryngeale uitstrijkjes worden verkregen volgens de standaardprocedures. Om vertekening door de volgorde van het afnemen van de nasofaryngeale uitstrijkjes te voorkomen, zullen de onderzoekers de patiënten willekeurig toewijzen aan drie bemonsteringsgroepen Groep 1: RT-PCR - Antigen Test Roche - Antigen Test Abbott Group 2: Antigeentest Roche - Antigeentest Abbott - RT-PCR Groep 3: Antigeentest Abbott - RT-PCR - Antigeentest Roche

De toewijzing van patiënten aan elk van deze groepen zal duidelijk worden gespecificeerd op de dossierformulieren. Er zijn twee formulieren voor elke patiënt:

Formulier 1: Verzoekformulier routineanalyse zoals gebruikt door het verzamelpunt voor patiëntidentificatie, gelabeld met een streepjescode met het onderzoeksnummer van een patiënt Formulier 2: Onderzoeksspecifiek formulier met een kopie van de streepjescode met het onderzoeksnummer, initialen van de patiënt en het geboortejaar.

8.2 SARS-CoV-2 Rapid Antigen Test (Roche): De SARS-CoV-2 Rapid Antigen Test is een snelle point-of-care chromatografische immunoassay voor de kwalitatieve detectie van specifieke antigenen van SARS-CoV-2 die aanwezig zijn in de menselijke nasofarynx.

8.3 PANBIO Covid-19 Ag Rapid Test (Abbott): Panbio COVID-19 Ag Rapid Test Device is een in vitro diagnostische sneltest voor de kwalitatieve detectie van SARS-CoV-2-antigeen (Ag) in menselijke nasofaryngeale uitstrijkjes.

8.4 RT-PCR: RT-PCR evalueert de aanwezigheid of afwezigheid van het SARS-CoV-2-genoom in monsters van nasofaryngeale en orofaryngeale uitstrijkjes en zal worden uitgevoerd volgens de protocollen die zijn opgesteld door SYNLAB MVZ Leinfelden GmbH.

8.5 Serologisch en aanvullend onderzoek: Er worden bloedmonsters (10 ml heparineplasma en 5,5 ml EDTA-plasma) afgenomen om de aanwezigheid van antilichamen (specifieke immuunrespons) tegen SARS-CoV-2-antigeeneiwitten (bijv. Roche, Abbott). Concreet zullen alle deelnemers worden aangeboden om de resultaten te ontvangen voor de volgende analyten als erkenning van hun deelname aan de studie: aantal bloedcellen, C-reactief proteïne, HbA1c, cholesterol, triglyceriden, LDL-cholesterol, HDL-cholesterol, gamma-glutamyl-transferase , creatinine samen met van formule afgeleide creatinine, vitamine D. Back-upmonsters zullen worden verzameld om aanvullende parameters zoals ontstekingsmarkers en micronutriënten en vitamines te bepalen.

9. Observatieperiode:

NIS-schema:

Start patiëntenwerving: 1 februari 2021 Einde observatieperiode: 31 maart 2021 Eindrapport: 31 mei 2021

10.Gegevensanalyse en statistische methoden: Er wordt een database van de gepseudonimiseerde gegevens en resultaten gegenereerd. De onderzoekers veronderstellen dat elk van de antigeentesten een sensitiviteit en specificiteit van 1,0 heeft ten opzichte van RT-PCR, die als referentietest zal worden beschouwd. Er is een p-waarde van minder dan 0,05 nodig om elk van de twee sneltesten gelijkwaardig aan RT-PCR te beschouwen.

Met behulp van powerberekeningen voor chikwadraattoetsen voor twee vrijheidsgraden, vereiste type I foutkans gelijk aan 0,05, vereiste (1-type II foutkans) gelijk aan 0,8 en vereiste effectgrootte gelijk aan 0,1 (kleine effectgrootte in de zin van (4)) verkrijgen de onderzoekers een aantal van ten minste N=964 waarnemingen voor het achtereenvolgens testen van inkomende patiënten om te voldoen aan onze vereisten inzake significantie en vermogen om de eerste onderzoeksvraag te beantwoorden. Vanwege het verwachte aantal van ongeveer 10% positief op 1000 gevallen, is de aanname van een chikwadraatverdeling toegestaan.

De onderzoekers zullen ook ingaan op de vraag of verschillende pre-testkansen de gevoeligheid van de antigeentesten zullen beïnvloeden. De onderzoekers verwachten dat twee belangrijke indicatiegroepen met verschillende pre-testkansen ongeveer 90 procent bijdragen aan de rt-PCR-positieve monsters: a) deelnemers die zijn opgenomen voor rt-PCR-testen door een arts b) deelnemers die rt-PCR-testen willen ondergaan op aanraden van mijn gezondheid zorgautoriteiten/contactpersonen. Er zijn in totaal ongeveer 200 rt-PCR-monsters nodig om een ​​statistisch significant verschil tussen deze twee groepen te detecteren bij een type 1-fout van 0,05 en een statistisch vermogen van 0,80. Om deze tweede vraag te beantwoorden, zullen de onderzoekers de studie uitbreiden tot 2000 deelnemers.

11. Ethiek: Het onderzoeksprotocol zal worden voorgelegd aan de ethische commissie van de Medische Faculteit Mannheim, Universiteit van Heidelberg en het onderzoek zal niet beginnen voordat schriftelijke toestemming is verkregen. De studie zal worden uitgevoerd in overeenstemming met de Duitse wetgeving, de EU-voorschriften voor klinische proeven en de Verklaring van Helsinki over de ethische principes van klinisch onderzoek.

11.1 Patiëntinformatie en geïnformeerde toestemming: Het doel, de aard en de reikwijdte van het document moeten schriftelijk aan elke patiënt worden uitgelegd voordat hij of zij wordt opgenomen in het onderzoek (bijlage 1). De patiënt mag alleen worden geïncludeerd als hij of zij daar schriftelijk toestemming voor heeft gegeven (bijlage 2). Patiënten hebben het recht om te weigeren deel te nemen aan of zich terug te trekken uit het onderzoek om welke reden dan ook en in elk stadium zonder de kwaliteit of toegankelijkheid van hun gezondheidszorg aan te tasten.

11.2 Gegevensbescherming: De voor het onderzoek verzamelde patiëntgegevens worden gepseudonimiseerd vastgelegd (bijlage 4), met een patiëntnummer dat niet herleidbaar is tot de identiteit van de patiënt. Bij publicatie van de onderzoeksresultaten mogen de persoonsgegevens alleen worden gebruikt als de anonimiteit van de patiënt wordt gewaarborgd. De gegevens van de patiënt zijn gegarandeerd altijd absoluut beschermd.