COVAG - Covid-19 Antigen Study - a eficácia diagnóstica dos testes de detecção rápida de SARS-CoV-2 (COVAG)

1. Fundo:

   A doença de coronavírus 2019 (COVID-19) se espalhou rapidamente pelo mundo a partir de Wuhan (China) desde dezembro de 2019. Tecnologias de diagnóstico confiáveis ​​são essenciais para a luta contra a COVID-19. Embora o teste baseado em reação em cadeia da polimerase por transcriptase reversa em tempo real (rRT-PCR) de amostras respiratórias continue sendo o padrão-ouro para o diagnóstico de COVID-19, vários ensaios comerciais para anticorpos contra (SARS-CoV-2) surgiram durante os meses anteriores ( Stocking et al., 2020).

   Medindo a presença ou ausência de proteínas virais (antígenos), os testes de antígenos podem fornecer resultados que diagnosticam uma infecção ativa por SARS-CoV-2 muito mais rapidamente do que RT-PCR ou testes equivalentes. Tem sido argumentado que os testes de antígeno podem ter uma sensibilidade menor do que RT-PCR ou testes equivalentes baseados em RNA e, como resultado, eles são muito mais propensos a fornecer resultados falso-negativos em indivíduos com quantidades menores de vírus. Isso pode torná-los não confiáveis ​​em indivíduos com curso assintomático da doença, em indivíduos nos primeiros dias de infecção e após 5-7 dias após o início dos sintomas (comunicado de imprensa SYNLAB, 22.09.2020).

2. Objetivo:

   O objetivo deste estudo não intervencional é demonstrar que os testes rápidos de antígeno para SARS-CoV-2 (Abbott e Roche) fornecem resultados rápidos e funcionam tão bem quanto o RT-PCR, pelo menos em pacientes sintomáticos com altas cargas virais.

3. Design de estudo:

   O estudo será realizado no Corona Test Center Stuttgart Cannstatter Wasen, operado pelo Dr. med. Hans-Jörg Wertenauer, Stuttgart, em estreita colaboração com o SYNLAB MVZ Leinfelden-Echterdingen GmbH. Aproximadamente 2.000 pacientes serão inscritos após terem assinado o Termo de Consentimento Livre e Esclarecido (TCLE). Após um estudo com duração programada de oito semanas, os investigadores poderão coletar as 2.000 amostras necessárias (50 pacientes por dia).

   Está prevista uma visita de estudo para colheita de dados e sangue (15,5 ml), testes de antigénios, RT-PCR, testes serológicos, testes laboratoriais básicos a comunicar aos participantes e exames de sangue auxiliares (incriminados por estarem relacionados com o COVID-19 como marcadores inflamatórios e micronutrientes e vitaminas). Estes serão realizados no SYNLAB MVZ Leinfelden GmbH. Alíquotas dos materiais coletados serão armazenadas -20 graus para medições de controle e testes auxiliares, no máximo por um ano após o último paciente ter sido incluído no estudo.

4. Justificativa:

   Nas últimas semanas, muito se discutiu sobre testes rápidos de antígenos para SARS-CoV-2. Espera-se que a geração mais recente desses testes, disponível em vários fornecedores diferentes, tenha um bom desempenho em pacientes com altas cargas virais. Isso geralmente ocorre aproximadamente 3 a 10 dias após a infecção pelo vírus, quando a pessoa é contagiosa, podendo estar assintomática ou nos primeiros dias de sintomas.

   Portanto, espera-se que os testes rápidos de antígeno possam apoiar o diagnóstico de COVID-19 em pessoas que apresentam os primeiros sintomas. Nos EUA, alguns testes receberam autorização para testes diagnósticos em indivíduos sintomáticos, dentro de 5-7 dias a partir do início dos sintomas (3).

5. Riscos e benefícios:

   Três swabs nasofaríngeos e uma amostra de sangue serão obtidos de cada um dos participantes. Testes de antígenos, RT-PCR e testes laboratoriais sorológicos e auxiliares são realizados neste estudo.

   Riscos de esfregaços nasofaríngeos: O maior risco é o desconforto. Raramente - 1 em milhares - a pessoa que recebe o cotonete desmaia por ser supersensível ou apresenta um leve sangramento nasal.

   Riscos da coleta de sangue: Os riscos da punção venosa incluem ser a reação mais comum. Complicações significativas (definidas como celulite, flebite, diaforese, hipotensão, quase síncope, síncope) são observadas em Pequenos hematomas no local onde o sangue é colhido e hematoma (12% aproximadamente), com pequenos hematomas em aproximadamente 3,5% dos pacientes. A complicação única significativa mais frequente é a hipotensão com uma frequência de aproximadamente 2,6%. A síncope é observada em menos de 1% dos pacientes. Outras reações locais graves, como celulite ou flebite, são muito raras (Galena HJ, J. Fam. Praticar. 1992 maio;34(5):582-4). A amostragem de sangue é, portanto, conduzida em cada um dos locais de estudo sob a vigilância de um médico licenciado.

   Benefícios para a saúde pública: O teste de antígeno no local de atendimento é um componente integral da atual estratégia nacional de testes que serve para prevenir a propagação do COVID 19 https://www.bundesgesundheitsministerium.de/fileadmin/Dateien/3_Downloads/C/C oronavirus/Nationale_Teststrategie_kurz_041220.pdf Há, no entanto, incerteza significativa quanto à confiabilidade do teste de antígeno em comparação com o teste padrão-ouro, rt-PCR. Para o conhecimento dos autores, uma avaliação prospectiva, suficientemente grande e questionável do teste de antígeno em condições práticas não foi concluída até o momento. O presente estudo pretende colmatar esta lacuna. Seus resultados são necessários com urgência e terão impacto imediato nas recomendações atuais para o uso de testes de antígenos. Em particular, demonstrará pontos fracos e fortes do teste de antígeno e permitirá superar as limitações técnicas potenciais do teste de antígeno em comparação com rt-PCR contra a vantagem da disponibilidade de curto prazo dos resultados do teste.

   Além disso, o registro completo do estado de saúde clínico e a análise laboratorial básica realizada neste estudo poderão obter mais informações sobre os preditores clínicos da suscetibilidade ao COVID 19.

   Benefícios para o indivíduo. Os participantes se beneficiarão de duas maneiras. Com exceção do rt-PCR, eles obterão os resultados do teste de antígeno de uma só vez e no local. Além disso, oferecendo dois testes de antígeno simultaneamente, os resultados do teste no local de atendimento serão ainda mais confiáveis ​​do que o resultado de um único teste. Além disso, os participantes recebem uma verificação básica de saúde laboratorial gratuita, incluindo os seguintes marcadores de saúde acionáveis: contagem básica de células sanguíneas, proteína C-reativa, HbA1c, colesterol, triglicerídeos, colesterol LDL, colesterol HDL, gama-glutamil-transferase, creatinina juntamente com creatinina derivada de fórmula, vitamina D.

   Os investigadores concluíram que os benefícios deste estudo para o sistema de saúde que enfrenta risco de vida e para os participantes individuais do estudo superam claramente os riscos menores e gerenciáveis.

6. População:

Os investigadores incluirão aproximadamente 2.000 pacientes masculinos e femininos consecutivos com 18 anos ou mais atendidos no Corona Test Center Stuttgart Cannstadter Wasen, nos quais o teste RT-PCR para SARS-CoV-2 é clinicamente indicado ou solicitado.

6.1 Critérios de Inclusão:

Os indivíduos elegíveis para inclusão neste estudo devem atender aos seguintes critérios:

1. O consentimento informado assinado deve ser obtido antes da participação no estudo. O paciente deve ser capaz de entender a natureza, o significado e as implicações do estudo.
2. Idade 18 anos ou mais

6.2 Critérios de exclusão:

1. Falta de consentimento informado
2. Incapacidade de compreender a natureza, significado e implicações do julgamento.
3. Condições clínicas graves que requerem hospitalização de emergência
4. Crianças e adolescentes com idade inferior a 18 anos

7. Procedimentos de consentimento informado Os indivíduos elegíveis só podem ser incluídos no estudo após o consentimento informado aprovado pelo IRB/IEC. O consentimento informado deve ser obtido antes de realizar qualquer procedimento específico do estudo (Apêndice 2).

8. Cronograma de avaliação e avaliações:

Termo de Consentimento Livre e Esclarecido, Coleta de dados demográficos e X histórico médico relevante Teste rápido de antígeno SARS-CoV-2 (Roche), Teste rápido PANBIO Covid-19 Ag (Abbott), Teste sorológico RT-PCR (amostra de sangue, 15,5 ml) Testes auxiliares 8.1 Dados demográficos, histórico médico, amostragem: Dados demográficos do paciente e outros dados característicos a serem coletados em todos os pacientes incluem sexo, idade, peso, altura, histórico médico relevante, sinais vitais e sintomas característicos do COVID-19, incluindo especificações precisas de tempo para início dos sintomas.

Nenhuma informação sobre medicamentos será coletada. Três swabs nasofaríngeos independentes serão obtidos seguindo procedimentos padrão Para evitar qualquer viés devido à sequência de coleta dos swabs nasofaríngeos, os investigadores irão alocar aleatoriamente os pacientes em três grupos de amostragem Grupo 1: RT-PCR - Teste de antígeno Roche - Teste de antígeno Grupo Abbott 2: Teste de Antígeno Roche - Teste de Antígeno Abbott - RT-PCR Grupo 3: Teste de Antígeno Abbott - RT-PCR - Teste de Antígeno Roche

A atribuição de pacientes a cada um desses grupos será claramente especificada nos formulários de registro de caso. Haverá dois formulários para cada paciente:

Formulário 1: Ficha de solicitação de análise de rotina utilizada pelo ponto de coleta para identificação do paciente, que será etiquetada com um código de barras contendo o número do estudo de um paciente Formulário 2: Formulário específico do estudo contendo uma cópia do código de barras com o número do estudo, iniciais do paciente e o ano de nascimento.

8.2 Teste rápido de antígeno SARS-CoV-2 (Roche): O teste rápido de antígeno SARS-CoV-2 é um imunoensaio cromatográfico rápido para detecção qualitativa de antígenos específicos de SARS-CoV-2 presentes na nasofaringe humana.

8.3 Panbio Covid-19 Ag Rapid Test (Abbott): O Panbio COVID-19 Ag Rapid Test Device é um teste rápido de diagnóstico in vitro para a detecção qualitativa do antígeno SARS-CoV-2 (Ag) em amostras de swab nasofaríngeo humano.

8.4 RT-PCR: O RT-PCR avalia a presença ou ausência do genoma SARS-CoV-2 em amostras de swabs nasofaríngeos e orofaríngeos e será conduzido de acordo com os protocolos estabelecidos no SYNLAB MVZ Leinfelden GmbH.

8.5 Testes sorológicos e auxiliares: Amostras de sangue (10 ml de plasma heparina e 5,5 ml de plasma EDTA) serão coletadas para detectar a presença de anticorpos (resposta imune específica) contra proteínas antigênicas SARS-CoV-2 (por exemplo, Roche, Abbot). Especificamente, todos os participantes receberão os resultados para os seguintes analitos em reconhecimento à sua participação no estudo: contagem de células sanguíneas, proteína C-reativa, HbA1c, colesterol, triglicerídeos, colesterol LDL, colesterol HDL, gama-glutamil-transferase , creatinina junto com creatinina derivada de fórmula, vitamina D. Amostras de backup serão coletadas para determinar parâmetros auxiliares como marcadores inflamatórios e micronutrientes e vitaminas.

9. Período de observação:

Cronograma NIS:

Início do recrutamento de pacientes: 1 de fevereiro de 2021 Fim do período de observação: 31 de março de 2021 Relatório final: 31 de maio de 2021

10.Análise de dados e métodos estatísticos: Será gerado um banco de dados com os dados e resultados pseudonimizados. Os investigadores levantam a hipótese de que cada um dos testes de antígeno tem sensibilidade e especificidade de 1,0 em relação ao RT-PCR que será considerado o teste de referência. Será necessário um valor de p inferior a 0,05 para considerar cada um dos dois testes rápidos equivalentes a RT-PCR.

Com o auxílio de cálculos de poder para testes de qui-quadrado para dois graus de liberdade, probabilidade de erro tipo I necessária igual a 0,05, probabilidade de erro necessária (probabilidade de erro tipo II 1) igual a 0,8 e tamanho de efeito necessário igual a 0,1 (tamanho de efeito pequeno em no sentido de (4)) os investigadores obtêm um número de pelo menos N=964 observações para testes consecutivos de pacientes que chegam, a fim de cumprir nossos requisitos de significância e poder para responder à primeira questão de pesquisa. Devido ao número esperado de cerca de 10% positivo em 1.000 casos, a suposição de uma distribuição qui-quadrada é permitida.

Os investigadores também abordarão a questão de saber se diferentes probabilidades pré-teste afetarão a sensibilidade dos testes de antígeno. Os investigadores esperam dois grupos principais de indicação com diferentes probabilidades pré-teste, contribuindo com aproximadamente 90% das amostras positivas de rt-PCR: a) participantes admitidos para teste de rt-PCR por um médico b) participantes que procuram teste de rt-PCR por recomendação minha saúde autoridades de cuidados/pessoas de contacto. Um total de aproximadamente 200 amostras de rt-PCR será necessário para detectar uma diferença estatisticamente significativa entre esses dois grupos em um erro tipo 1 de 0,05 e um poder estatístico de 0,80. Para responder a esta segunda pergunta, os investigadores vão estender o estudo para 2.000 participantes.

11. Ética: O protocolo do estudo será submetido ao Comitê de Ética da Faculdade de Medicina de Mannheim, Universidade de Heidelberg e o estudo não começará até que seja obtida permissão por escrito. O estudo será conduzido de acordo com a lei alemã, os regulamentos de Ensaios Clínicos da UE e a Declaração de Helsinque sobre os princípios éticos da pesquisa clínica.

11.1 Informações do paciente e consentimento informado: O objetivo, a natureza e a extensão do documento devem ser explicados por escrito a cada paciente antes de ele ser incluído no estudo (Apêndice 1). O paciente não deve ser incluído a menos que tenha dado consentimento por escrito (Apêndice 2). Os pacientes terão o direito de se recusar a participar ou retirar-se do estudo por qualquer motivo e em qualquer estágio sem afetar a qualidade ou acessibilidade de seus cuidados de saúde.

11.2 Proteção de dados: Os dados do paciente coletados para o estudo serão registrados em um formulário pseudonimizado (Anexo 4), com um número de paciente que não pode ser atribuído à identidade do paciente. Em caso de publicação dos resultados do estudo, os dados pessoais só poderão ser utilizados se o anonimato do paciente for respeitado. Os dados do paciente têm a garantia de estar sempre absolutamente protegidos.