Klinisk och histologisk analys av mänskliga gingivalfenotyper

Friska frivilliga delades in i en av två grupper:

• Grupp 1: Tunn gingiva, när den fria gingiva utvärderades som genomskinlig, efter införandet av en periodontal sond (Hu-Friedy XP-23/QW, Hu-Friedy, Chicago, IL, USA) i mitten av ansiktets dentogingivala sulcus av en maxillär central framtand
• Grupp 2: Tjock gingiva: när det fria tandköttet utvärderades som icke-transparent, med användning av samma metodik.

Ett prov av full tjocklek av munslemhinnan hos var och en av deltagarna samlades in under lokalbedövning. Provet hade en rektangulär form, med en längd på 4 millimeter och en bredd på 1 millimeter. Den hade en vertikal orientering och den expanderade på båda sidorna av mukogingivalövergången.

Munslemhinnorna bearbetades för histologisk och immunhistokemisk analys. Färgning med hematoxylin-eosin utfördes för att beskriva vävnaden histologiskt och även beräkna det totala antalet celler den innehöll. Immunhistokemisk färgning med anti-Vimentin, anti-Cluster of Differentiation 68, anti-Ki-67 och anti-Smooth Muscle Actin-antikroppar användes för beräkning av antalet fibroblaster, makrofager, Ki-67-positiva celler och glattmuskelaktinpositiva celler respektive. Immunhistokemisk färgning utfördes också för att bestämma nivåerna av uttryck av kollagen I, kollagen V, elastin och hyaluronsyra.

Hela diabilder av proverna erhölls med användning av NanoZoomer 2.0HT (Hamamatsu Pho-tonics K.K., Hamamatsu, Japan). Cellräkning kommer att utföras automatiskt med hjälp av ett bildanalysprogram (QuPath 3.0). Nivåerna av molekylärt uttryck kommer att bedömas med användning av samma programvara och kommer att uttryckas som en procentandel av den yta av bindväven som upptas av de undersökta molekylerna.