Analisi clinica e istologica dei fenotipi gengivali umani

I volontari sani sono stati assegnati a uno dei due gruppi:

• Gruppo 1: gengiva sottile, quando la gengiva libera è stata valutata come trasparente, dopo l'inserimento di una sonda parodontale (Hu-Friedy XP-23/QW, Hu-Friedy, Chicago, IL, USA) nel mezzo del solco dentogengivale facciale di un incisivo centrale mascellare
• Gruppo 2: gengiva spessa: quando la gengiva libera è stata valutata come non trasparente, utilizzando la stessa metodologia.

Un campione a tutto spessore della mucosa orale di ciascuno dei partecipanti è stato raccolto in anestesia locale. Il campione aveva una forma rettangolare, con una lunghezza di 4 millimetri e una larghezza di 1 millimetro. Aveva un orientamento verticale e si stava espandendo su entrambi i lati della giunzione mucogengivale.

I campioni di mucosa orale sono stati processati per l'analisi istologica e immunoistochimica. La colorazione con ematossilina-eosina è stata eseguita per descrivere istologicamente il tessuto e calcolare anche il numero totale delle cellule in esso contenute. La colorazione immunoistochimica con anticorpi anti-Vimentin, anti-Cluster of Differentiation 68, anti-Ki-67 e anti-Smooth Muscle Actin è stata applicata per il calcolo del numero di fibroblasti, macrofagi, cellule Ki-67-positive e actina del muscolo liscio positivo cellule rispettivamente. È stata inoltre eseguita la colorazione immunoistochimica per determinare i livelli di espressione di collagene I, collagene V, elastina e acido ialuronico.

Le immagini di vetrini interi dei campioni sono state acquisite con l'uso del NanoZoomer 2.0HT (Hamamatsu Pho-tonics KK, Hamamatsu, Giappone). Il conteggio delle cellule verrà eseguito automaticamente utilizzando un software di analisi delle immagini (QuPath 3.0). I livelli di espressione molecolare saranno valutati con l'utilizzo dello stesso software e saranno espressi come percentuale dell'area del tessuto connettivo occupata dalle molecole indagate.