Klinische und histologische Analyse menschlicher Zahnfleischphänotypen

Gesunde Freiwillige wurden einer von zwei Gruppen zugeteilt:

• Gruppe 1: Dünne Gingiva, wenn die freie Gingiva als transparent bewertet wurde, nach Einführung einer parodontalen Sonde (Hu-Friedy XP-23/QW, Hu-Friedy, Chicago, IL, USA) in der Mitte des fazialen dentogingivalen Sulcus eines oberen mittleren Schneidezahns
• Gruppe 2: Dicke Gingiva: Die freie Gingiva wurde mit der gleichen Methodik als nicht transparent bewertet.

Unter örtlicher Betäubung wurde von jedem Teilnehmer eine vollständige Probe der Mundschleimhaut entnommen. Die Probe hatte eine rechteckige Form mit einer Länge von 4 Millimetern und einer Breite von 1 Millimeter. Es war vertikal ausgerichtet und dehnte sich auf beiden Seiten des mukogingivalen Übergangs aus.

Die Mundschleimhautproben wurden für die histologische und immunhistochemische Analyse aufbereitet. Um das Gewebe histologisch zu beschreiben und auch die Gesamtzahl der darin enthaltenen Zellen zu berechnen, wurde eine Färbung mit Hämatoxylin-Eosin durchgeführt. Zur Berechnung der Anzahl von Fibroblasten, Makrophagen, Ki-67-positiven Zellen und positiven Glattmuskel-Actin-Antikörpern wurde eine immunhistochemische Färbung mit Anti-Vimentin-, Anti-Cluster of Differentiation 68-, Anti-Ki-67- und Anti-Smooth Muscle Actin-Antikörpern angewendet Zellen bzw. Außerdem wurde eine immunhistochemische Färbung durchgeführt, um die Expressionsniveaus von Kollagen I, Kollagen V, Elastin und Hyaluronsäure zu bestimmen.

Ganze Objektträgerbilder der Proben wurden mit dem NanoZoomer 2.0HT (Hamamatsu Pho-tonics K.K., Hamamatsu, Japan) aufgenommen. Die Zellzählung wird automatisch mithilfe einer Bildanalysesoftware (QuPath 3.0) durchgeführt. Der Grad der molekularen Expression wird mit der gleichen Software bewertet und als Prozentsatz der von den untersuchten Molekülen eingenommenen Fläche des Bindegewebes ausgedrückt.